AMI患者血中EMPs、sICAM-1、Cys-C水平與冠脈病變的相關性

王愛國，程彩霞，蔣翔寧，王 磊，蔣趙明，張 婷

(1.黃山首康醫院檢驗科，安徽 黃山 245000; 2.黃山市人民醫院檢驗科，安徽 黃山 245000;3.黃山首康醫院心內科，安徽 黃山 245000)

急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)發展過程中，細胞因子能加劇心肌細胞的氧化應激性損傷，增加冠狀動脈粥樣斑塊的形成速度[1-2]。血內皮微粒(endothelial microparticles,EMPs)的表達變化，能夠反應冠狀動脈內皮細胞的功能及其損傷程度和凋亡水平[3]；血清可溶性細胞間黏附分子-1(serum soluble intercellular adhesion molecule-1，sICAM-1)可加速趨化因子在冠狀動脈內皮細胞的沉積，進而促進冠狀動脈的損傷，導致血管的粥樣硬化性病變；胱抑素C(cystatin C，Cys-C)能夠通過誘導氧化自由基的釋放，增加冠狀動脈血管的脆性，促進心肌細胞的缺血缺氧性損傷[4]。為了揭示血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C的表達與AMI發生發展的關系，本研究選取急性心肌梗死患者90例，探討了血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C的表達與患者的病情及經皮冠脈介入術(PCI)后復流程度的關系，為評價急性心肌梗死患者的癥狀提供臨床參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取經冠脈造影檢查確診的AMI患者90例為AMI組，患者入組時間2016年7月～2017年12月，另選取90例健康對象作為對照組。

AMI組，年齡范圍52～77歲，平均(65.2±7.8)歲，男55例、女35例，體質量指數(BMI)23.1±2.0 kg/m2；其中冠脈單支病變23例、雙支病變39例、三支病變28例；合并高血壓59例、糖尿病23例、血脂異常38例；吸煙34例、飲酒27例。對照組，年齡范圍46～79歲，平均(64.4±8.0)歲，男50例、女40例，BMI 22.9±2.4 kg/m2；吸煙30例、飲酒25例。AMI組和對照組基線資料均衡可比(P>0.05)，見表1。

納入標準：(1)AMI的診斷標準參考《中國急性心肌梗死診斷和治療指南》中的標準[5]；(2)研究對象年齡均≤79歲；(3)所有患者均經過冠脈造影或者血管內超聲檢查確診；(4)對照組為經體檢健康的體檢人員；(5)研究方案獲得醫學倫理委員會批準，實施前與研究對象簽署相關知情同意協議。

排除標準：(1)阿爾茨海默病；(2)精神疾??；(3)基線資料缺失；(4)腦卒中等腦血管病史；(5)合并創傷、惡性腫瘤；(6)風濕、免疫系統疾病患者。

表1 兩組研究對象的一般資料對比

1.2 血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C檢測方法

住院第二天，收集患者肘關節靜脈血4 mL，自然凝固收集上層清液，-20 ℃存放。Cys-C的檢測運用上海宇庭生物科技有限公司生產的全自動生化檢測儀(Biotetic-2008)及配套試劑，按照說明書和試劑盒的相關流程使用；采用ELISA法檢測sICAM-1。

采集入院后靜脈血，加入枸櫞酸鈉抗凝，通過離心方法獲取血小板貧瘠血漿，收集50 μL的血小板貧瘠血漿，加入CD42-PE+CD31-FUTC抗體，采用流式細胞技術檢測EMPs(FACS calibur流式細胞儀購自美國BD公司，流式細胞抗體購自羅氏檢測公司)。

1.3 Gensini評分及PCI術后冠脈病變程度的判斷標準

冠脈病變程度評價采用Gensini評分，(1)根據冠狀動脈的狹窄程度：病變冠脈管腔狹窄<25%評分為1分，病變冠脈管腔狹窄25%～49%評分為2分，病變冠脈管腔狹窄50%～74%評分為4分，病變冠脈管腔狹窄75%～90%評分為8分，病變冠脈管腔狹窄90%～99%評分為16分，如果病變冠脈管腔的狹窄達到100%評分為32分；(2)依據冠狀動脈的病變部位：病變靶血管為左主干則評分5分，病變靶血管為左前降支或回旋支則評分為2.5分，病變靶血管為左前降支中段則評分為1.5分，病變靶血管為左前降支遠段則評分為1.0分，右冠狀動脈、左回旋支中、遠段三個部分均為1.0分，其他的小分支病變則為0.5分?？偡?部位評分+狹窄程度評分。

對AMI患者PCI前后的梗死血管TIMI血流分級進行評價：TIMI 0級：血管完全閉塞，閉塞處遠端血管無前向血流充盈；TIMI 1級：可觀察到少量對比劑通過血管閉塞部位，遠端血管少部分顯影，血管充盈不全；TIMI 2級：部分對比劑能夠完全充盈冠狀動脈遠端，但對比劑前向充盈及排空速度顯著的緩慢與正常冠脈；TIMI 3級：冠脈完全再管注，3個心動周期內對比劑完全充盈或排空。TIMI≤1級判斷為無復流。

1.4 統計學方法

2 結 果

2.1 兩組血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C水平

AMI組患者的血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C水平顯著高于對照組(表2)。

表2 AMI組和對照組的血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C水平比較

2.2 不同冠脈病變支數的AMI患者血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C水平

血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C在不同冠脈病變支數(單支、雙支、三支)患者中比較，方差分析顯示，組間對比差異具有顯著性(表3)。

表3 不同冠脈病變支數的AMI患者血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C水平比較

2.3 PCI術后不同TIMI分級與血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C水平

90例AMI組患者PCI術后共有TIMI≥2級患者73例，TIMI≤1患者17例，TIMI≥2級患者的血漿EMPs、血清sICAM-1低于TIMI≤1患者(P<0.01)；TIMI≥2級與TIMI≤1患者Cys-C水平差異無統計學意義(P>0.05，表4)。

表4 PCI術后不同TIMI分級的AMI患者的血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C水平

2.4 不同冠脈病變支數的AMI患者Gensini評分

單支、雙支、三支冠脈病變的AMI組患者的Gensini評分組間呈現逐漸升高的趨勢，且差異具有顯著性，任意兩組間對比差異均顯著(P<0.05，表5)。

表5 不同冠脈病變支數的AMI患者Gensini評分比較 (分)

2.5 相關性分析

AMI組患者的Gensini評分與血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C水平均呈顯著的正相關關系(P<0.01，表6)。

表6 相關性分析結果

3 討 論

冠狀動脈粥樣硬化的患者中AMI的發病率逐年上升[6]。臨床血清學指標評價AMI患者病情的依據較少。臨床上采用心肌酶譜相關指標評估AMI患者的一致性率不足35%，其對于患者冠狀動脈損傷評估的價值較低[7]。血漿EMPs是冠狀動脈內皮細胞損傷過程中釋放的囊泡顆粒，能夠反應內皮細胞的凋亡程度。在內皮細胞炎癥性損傷或者氧化應激性損傷過程中，血漿EMPs的表達可顯著的上升。血漿EMPs能夠提高炎性細胞的激活，加劇冠狀動脈病變速度的進程[8]；血清sICAM-1是粘附分子相關家族成員，其能夠通過誘導下游炎癥性因子的激活，增加腫瘤壞死因子或者補體成分C3的富集，加劇冠狀動脈的痙攣，導致心肌細胞的缺血性損傷[9]；Cys-C是胱氨酸及胱抑素代謝相關指標，其通過參與游離自由基的釋放，提高氧自由基對于心肌細胞膜的損傷程度[10]。文獻報道，AMI患者血清sICAM-1、Cys-C的表達可明顯上升[11-12]，但對于EMPs的表達與冠狀動脈病變程度的關系分析不足。

本研究發現，AMI患者EMPs、sICAM-1、Cys-C水平明顯升高，提示了血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C的高表達與AMI的病情進展過程密切相關。揭示了不同細胞因子對AMI的病情影響程度，主要與下列幾個方面的作用有關[13-14]：(1)高水平的血漿EMPs表達不僅反映了冠狀動脈內皮細胞的損傷程度，同時還能夠提高中性粒細胞酶的激活程度，增加其對于心肌組織的浸潤和損傷；(2)血清sICAM-1的表達上升能夠提高趨化因子的富集，增加自身免疫性復合物在心肌組織的沉積，而Cys-C的上升能夠引起心肌細胞線粒體的損傷，導致心肌細胞收縮功能的障礙。不同冠狀動脈病變數量的患者，隨著冠狀動脈病變數量增加，血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C的表達濃度逐漸的上升，提示這些細胞因子的表達與促進泡沫細胞在內皮下的富集，引起冠狀動脈血管病變數量的增加有關。本組研究還發現，TIMI≥2級患者的血漿EMPs、血清sICAM-1低于TIMI≤1患者；TIMI≥2級與TIMI≤1患者Cys-C水平差異無統計學意義，表明血漿EMPs、血清sICAM-1還與PCI術后復流有關，而Cys-C則無明顯相關。Gensini法是評估患者冠狀動脈血管狹窄程度的指標，本研究發現Gensini評分與AMI患者的血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C密切相關，進一步提示了血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C與冠狀動脈血管病變的關系。臨床上可以檢測相關細胞因子，進而評估冠狀動脈的累及程度。

綜上所述，血漿EMPs、血清sICAM-1、Cys-C的表達與AMI患者的冠狀動脈病變程度密切相關。Cys-C的表達與冠狀動脈PCI術后復流的情況關系不大。