柴 艷, 李琦華, 賈俊靜, 張文杰, 魯瓊芳, 陳 濤, 師正鵬, 梁建平
(1.芒市科技成果轉化服務中心,云南德宏678400;2.云南農業大學動物科學學院,省動物營養與飼料科學重點試驗室,云南昆明 650201;3.濰坊六和飼料有限公司臨朐分公司,山東濰坊262609;4.芒市畜牧站,云南德宏 678400;5.德宏州畜牧站,云南德宏 678400;6.德宏州情報所,云南德宏 678400)
白術多糖(PAM)是植物多糖中的一種,為菊科多年生草本植物,在我國的南方地區廣泛種植,長期以來主要作為中草藥配方的成分被利用,其用量居大宗常用中藥材之首。藥理研究表明PAM具有以下作用:(1)提高淋巴細胞增殖和抗體的產生、提高細胞免疫功能。(2)提高細胞過氧化物歧化酶(SOD)活性,抑制紅細胞自氧化溶血,直接清除自由基(呂圭源等,1996)。(3)增強家兔離體小腸平滑肌自發性收縮,使其收縮幅度加大(馬允慰,1982);能明顯促進小鼠小腸蛋白質的合成;對應激性潰瘍,有顯著抑制作用(馬曉松等,1995)。 (4)具有抗菌消炎作用,對傷寒桿菌、甲型副傷寒桿菌、福氏痢疾桿菌等有抑制作用。PAM能使小鼠TH細胞明顯增加,提高TH/Ts比值,糾正T細胞亞群分布紊亂狀態,可使低下的IL-2水平顯著提高,并能增加T淋巴細胞表面IL-2R的基因表達。這有可能是PAM有增強免疫和調節免疫作用的重要機制之一(余上才,1994)。此外,白術還有抗血凝、擴張血管、防護放射線損害等作用,是國家中醫管理局公布的中醫防治“非典”處方中的重要藥材之一(余上才,1994)。本研究以白術多糖作為一種添加劑,添加至早期斷奶仔豬料中,研究其對斷奶仔豬生產性能及腸道組織形態的影響。
1.1 試驗動物及設計 采用單因子試驗設計,從昆明和牧牧業有限公司豬場選擇胎次、體重(7.5 kg左右)相近、健康狀況良好的三元雜交(DLY)仔豬,公母各半,共60頭,按處理隨機分為5組,每個處理12頭,分為3個重復(欄),每個重復4頭。
1.2 飼料原料及其日糧水平 試驗用白術多糖由華南農業大學提供,試驗日糧原料由昆明云嶺廣大種禽飼料有限公司提供。白術多糖以3個不同劑量在預混料添加工序中分別均勻添加至飼料中。試驗日糧組成和營養水平見表1。抗生素組中添加的抗生素為1:5的硫酸粘桿菌素和桿菌肽鋅,除抗生素組以外,其他試驗組中均未添加任何藥物和抗生素。
1.3 飼養管理 飼養試驗在統一條件下進行,試驗豬按體重相近原則隨機分配到各個處理中,且全部飼養在同一棟朝向相同的豬舍內。試驗的前10 d,采用相同功率的紅外燈人工補溫,后20 d采用自然溫度。試驗前對豬舍進行統一清洗、消毒,試驗豬用耳牌編號,同時按常規免疫程序免疫,并做好疾病控制。整個試驗期采用自由采食和飲水的飼養管理方式。
1.4 生長性能的測定 在預飼期開始和結束及正試期結束時清晨空腹各欄逐頭稱重,以欄為單位記錄采食量及腹瀉頭數,并計算平均日增重、平均日采食量、料重比和腹瀉率。
料重比=飼料消耗量/增重;
腹瀉率/%=(試驗期內該組飼養日腹瀉豬數/該期此組飼養總豬數)×100。
1.5 腸道組織切片的制作與觀察
1.5.1 腸道組織切片的制作 腸道組織切片的制作參照劉惠和李麗立等(2008)組織切片的制備方法并對其做了一些改進。
1.5.2 腸道組織切片的觀察 在低倍鏡下觀測切片,選擇典型視野。在400倍鏡下觀測視野中所有完整絨毛,記錄最長絨毛的長度和最深隱窩的深度,并計算兩者比值。
1.6 數據處理 試驗數據均采用SPSS 13.0統計軟件進行分析。
2.1 不同處理斷奶仔豬平均日增重的比較 由表2可見,各處理組間平均日增重存在一定的差異,但統計結果差異不顯著(P>0.05)。

表2 不同處理斷奶仔豬平均日增重的比較分析kg
2.2 不同處理斷奶仔豬日采食量和料肉比的比較 由表3可知,0.1%PAM處理組的日采食量顯著低于對照組、抗生素組、0.15%PAM組和0.05%PAM 組 (P<0.05), 分別降低 9.17%、8.22%、8.22%和12.94%。其中0.15%PAM組和抗生素處理組的日采食量相同,都是0.572 kg。0.1%PAM處理組的料重比與0.05%PAM處理組相比差異顯著 (P<0.05)。0.1%PAM處理組的料肉比較0.05%PAM組低13.05%。

表3 不同處理斷奶仔豬日采食量和料肉比的比較分析
2.3 不同處理斷奶仔豬腹瀉率及腹瀉頻率的比較 從表4可以看出,各處理間仔豬的腹瀉率存在一定的差異,但沒有顯著性差異(P>0.05)。

表4 不同處理斷奶仔豬腹瀉率的比較分析%
2.4 不同處理斷奶仔豬小腸絨毛高度的比較分析 由表5可見,在十二指腸中0.1%PAM組絨毛高度顯著高于 (P<0.05)對照組、抗生素組、0.05%PAM組、0.15%PAM組,分別比其高33.38%、13.48%、17.07%、14.16%; 在空腸段中0.1%PAM處理組絨毛高度與對照組、抗生素組、0.05%PAM組和0.15%PAM處理組相比差異顯著(P<0.05), 分別提高了 23.45%和 16.38%、24.86%和22.19%;在回腸中各組絨毛高度差異不顯著(P > 0.05)。
2.5 不同處理斷奶仔豬小腸隱窩深度的比較分析 由表6可知,在十二指腸中0.1%PAM組隱窩深度與對照組、抗生素組、0.05%PAM組、0.15%PAM組相比差異性顯著(P<0.05),分別降低了27.27%、27.16%、14.77%、0.76%; 回腸中 0.1%PAM組隱窩深度與對照組相比差異性顯著 (P<0.05),其隱窩深度比對照組低13.26;在空腸中0.1%PAM組隱窩深度與對照組相比差異顯著(P<0.05),隱窩深度比其低12.38%。

表5 不同處理斷奶仔豬小腸絨毛高度的比較分析 μm

表6 不同處理斷奶仔豬小腸隱窩深度的比較分析 μm
2.6 不同處理斷奶仔豬小腸絨毛高度/隱窩深度的比較分析 由表7可見,在十二指腸中0.1%PAM組絨毛高度/隱窩深度與對照組、抗生素組、0.05%PAM組、0.15%PAM組相比差異性顯著(P< 0.05), 分 別 提 高 39.64%、21.09%、21.09%、26.02%;在空腸中0.1%PAM組絨毛高度/隱窩深度與對照組、抗生素組、0.05%PAM組、0.15%PAM組相比差異性顯著(P<0.05),分別提高34.45%、33.33%、33.33% 、33.33%。回腸中各組絨毛高度/隱窩深度相比差異性不顯著(P>0.05)。

表7 不同處理斷奶仔豬小腸絨毛高度/隱窩深度的比較分析
3.1 不同白術多糖添加水平對仔豬生長性能的影響 本試驗結果表明,在日糧中添加0.1%劑量的白術粗多糖不僅能夠提高仔豬的平均日增重,還能提高飼料報酬。本試驗中各處理組間平均日增重存在一定的差異,但統計結果差異不顯著(P>0.05),0.1%PAM處理組平均日增重最高。對于日采食量本試驗中0.1%PAM處理組顯著低于對照組、抗生素組、0.15%PAM組和0.05%PAM組(P<0.05);對于料肉比本試驗中0.1%PAM組最低。從已報道的研究結果來看,關于多糖對斷奶仔豬生產性能的影響報道不一,林斌等(2000)采用白術、黃芪、黨參、茯苓等中草藥組方作為飼料添加劑飼喂仔豬,斷奶后14 d增重比對照組提高15.4%。金淑英等(2001)對28日齡斷奶仔豬飼喂含1%酵母多糖顆粒料,結果表明料肉比較對照組差異顯著。但也有研究表明日糧中添加多糖對生長性能無顯著影響,魏鳳仙等(2006)認為,基礎日糧中添加500 mg/kg黃芪多糖不影響生長豬的生產性能(P≥0.05),但有一定提高生產性能的趨勢。
3.2 不同白術多糖添加水平對仔豬腹瀉率的影響 本研究中白術多糖對斷奶仔豬的腹瀉率沒有顯著性的影響,但是添加0.1%的白術多糖可以降低仔豬腹瀉率。近年來,對于多糖能夠提高斷奶仔豬免疫功能,降低腹瀉率的報道很多。胡倉云等(2007)研究黃芪多糖對斷奶仔豬腹瀉和促生長的效果試驗中表明,黃芪多糖能夠顯著降低斷奶仔豬的腹瀉率。祁鶴民等(2008)報道,黃芪多糖對仔豬“三痢”的效果有顯著作用。崔錦鵬等(2001)研究也發現,復方中草藥(黨參、白術、黃芩、板蘭根、蒲公英等)能有效殺滅大腸桿菌和沙門氏菌。趙銀麗等 (2006)在黃芩抗雞大腸桿菌作用的研究中指出,黃芩可顯著降低雞腸道中大腸桿菌數量,降低家禽的發病率。喻育才(2007)在黃芪粗提物對乳仔豬抗腹瀉作用及生長性能影響的研究結果表明,黃芪粗提物能有效的降低斷奶仔豬腹瀉率。李鳳玲(2008)在黃芪多糖(APS)對斷奶仔豬抗病力的影響研究中發現,黃芪多糖(APS)能有效降低斷奶仔豬腹瀉率和腹瀉頻率。所有報道與本試驗研究結果相似,但本試驗研究結果表明添加0.1%的白術多糖能最為有效地降低仔豬腹瀉率。
3.3 不同白術多糖添加水平對仔豬小腸絨毛高度和隱窩深度的影響 辜玉紅等(2003)報道,營養物質的消化吸收主要在動物腸道中進行,腸道健康與否將直接影響動物對營養物質的攝取,特別對幼齡動物而言,腸黏膜發育不完全將影響其生長、發育、免疫功能等。斷奶應激和飼料抗原引發的過敏反應可引起不同程度的絨毛變短、隱窩加深以及絨毛高度與隱窩深度的比值下降 (陳代文等,1996)。未斷奶仔豬隨著日齡增大,隱窩深度降低,絨毛高度增加,仔豬斷奶后則表現為隱窩深度增加,而絨毛長度變短(張宏福等,2002;Jacobs等,1986)。腸道黏膜上皮絨毛長度變短,隱窩深度增加意味著絨毛吸收細胞減少,分泌細胞增多,腸道黏膜萎縮,造成吸收能力下降,未被消化吸收的物質不僅使腸道中滲透壓升高,引起滲透性腹瀉,而且使腸道中大腸桿菌等腐敗菌大量繁殖(Li等,1991)。絨毛長度和隱窩深度反映小腸的功能狀態,絨毛變短使營養物質的消化吸收能力降低,隱窩深度反映小腸上皮更新速度,更新過程減慢,則隱窩變淺。隱窩變淺表明腸上皮細胞成熟率上升,分泌功能增強(成令忠,1994)。
本研究表明,在飼料中添加0.1%的白術多糖與對照組和抗生素組相比可以顯著提高 (P<0.05)十二指腸段和空腸段的絨毛高度,與對照組相比顯著降低十二指腸段、空腸、回腸段隱窩深度。從已報道的研究結果來看,關于多糖對斷奶仔豬小腸絨毛高度和隱窩深度的影響報道不一。陳清華等(2007)在飼料中添加牛膝多糖,試驗結果表明與對照組和抗生素組相比,添加0.1%的牛膝多糖能夠顯著提高十二指腸、回腸和空腸絨毛長度及顯著降低十二指腸隱窩深度,這與本試驗研究結果相似。說明白術多糖在改善小腸前段腸道對養分的利用和吸收功能比后段好。劉惠等(2008)研究結果表明,添加0.6%的白術多糖對斷奶仔豬十二指腸、空腸、回腸絨毛高度和隱窩深度均沒有顯著影響,但回腸和空腸的絨毛高度均比對照組高。而采用白術、黃柏、黨參、蒼術、陳皮、山楂、馬齒莧粉7種中草藥作為飼料添加劑飼喂仔豬,結果表明,添加0.6%的復合多糖能顯著提高十二指腸的絨毛高度,對空腸和回腸的絨毛高沒有顯著改善;添加0.6%的復合多糖和0.6%的白術多糖均對十二指腸、空腸和回腸隱窩深度沒有顯著影響。
3.4 不同白術多糖添加水平對仔豬小腸絨毛高度/隱窩深度比值的影響 小腸黏膜絨毛高度與隱窩深度的比值是決定仔豬消化吸收功能的結構基礎。比值大說明腸內膜面積較大,消化吸收能力較強;比值小,則說明腸內膜變態反應大,消化吸收能力差。
本研究表明,在飼料中添加0.1%的白術多糖與對照組和抗生素組相比可以顯著提高仔豬十二指腸和空腸絨毛高度/隱窩深度的比值,但對回腸段的小腸絨毛高度/隱窩深度的比值沒有顯著性影響。劉惠等(2008)研究結果表明,添加0.6%的白術多糖和0.6%的復合多糖對斷奶仔豬十二指腸、空腸和回腸段的小腸絨毛高度/隱窩深度的比值沒有顯著性影響,但在十二指腸和回腸段中0.6%的白術多糖和0.6%的復合多糖處理組的小腸絨毛高度/隱窩深度的比值均比對照組和抗生素處理組有所提高。本研究仔豬生長性能、腹瀉率、腸道組織形態結果與以上的報道結果有不相一致的地方,導致的原因可能與多糖的種類、來源、有效成分的含量、添加量、日糧組成、試驗條件、選擇不同的試驗動物等有關。具體情況有待進一步研究。
本試驗結果表明,日糧中添加0.10%白術多糖可以提高斷奶仔豬生產性能,并能通過提高小腸絨毛高度與隱窩深度的比值改善腸道消化功能。