CPS1與CPS1-IT1在肝內(nèi)膽管癌患者中的表達(dá)及與病理的相關(guān)性研究*

吳 飛

河南大學(xué)第一附屬醫(yī)院普通外科一病區(qū) （河南 開封，475001）

肝內(nèi)膽管癌（ICC）又稱膽管細(xì)胞癌，是由肝內(nèi)膽管上皮化引起，但其發(fā)病機(jī)制仍存在爭議［1］。ICC常無包膜，中間發(fā)硬灰白色，周圍是淡黃色，大體可分為3類：管內(nèi)生長型、團(tuán)塊型和周圍肝組織界限型。其中多數(shù)患者是團(tuán)塊型，團(tuán)塊型可以分為普通型、非普通型［2］。普通型病理狀態(tài)下可見乳頭狀、冠狀結(jié)構(gòu)，并呈中、高分化；而非普通型病理狀態(tài)下多以立方體、柱狀為主，多呈低分化。腫瘤細(xì)胞的胞漿中和管腔內(nèi)常可見到黏蛋白樣分泌物［3］。此外，腫瘤細(xì)胞亦可浸入血竇中，增殖、生長。因目前針對ICC的腫瘤標(biāo)志物缺乏特異性和敏感性，難以對患者進(jìn)行早期診斷和預(yù)后評估［4］。因此，本文以ICC患者為研究對象，探討氨甲酰磷酸合成酶（CPS1）與氨甲酰磷酸合成酶1-內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄本1（CPS1-IT1）在ICC的表達(dá)水平及其與病理的相關(guān)性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年4月至2019年4月在我院確診為ICC的患者36例，其中男23例，女13例；年齡38～53歲，平均（48.23±3.50）歲；腫瘤直徑1～6cm，平均（3.22±0.51）cm；分化類型：低分化18例，中分化11例，高分化7例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：轉(zhuǎn)移16例，無轉(zhuǎn)移20例。分別通過手術(shù)選取患者的癌旁肝組織及癌組織。所有患者均知情且同意本次研究，本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 納入、排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合ICC診斷標(biāo)準(zhǔn)，且患者均經(jīng)手術(shù)組織檢查確診；②術(shù)前均經(jīng)過CT或MRI掃描確定腫瘤位置及大小［5］；③均擬行手術(shù)治療，且患者均能耐受；④意識清楚，能與醫(yī)生進(jìn)行溝通、交流。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并傳染性疾病、重要臟器損傷者；②合并神經(jīng)功能、認(rèn)知功能異常或伴有內(nèi)分泌疾病者；③非原發(fā)性肝癌患者。

1.3 研究方法 所有患者分別通過手術(shù)選取患者的癌旁肝組織及癌組織，首先利用生物信息學(xué)的方法分析ICC組織芯片中19 850個基因的表達(dá)情況［6］。通過此分析發(fā)現(xiàn)：CPS1的基因與其轉(zhuǎn)錄的lnc RNA——CPS1-IT1在ICC內(nèi)共同高表達(dá)；借助實時熒光PCR技術(shù)、免疫組織化學(xué)法等相關(guān)實驗完成標(biāo)本中CPS1基因及CPS1-IT1表達(dá)水平測定。查閱患者病理資料，記錄患者的性別、年齡、分化類型、腫瘤分化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，分析癌旁肝組織及癌組織不同病理狀態(tài)下CPS1基因及CPS1-IT1的表達(dá)水平，并完成多因素Logistic分析；采用SPSS Pearson相關(guān)性分析對CPS1和CPS1-IT1表達(dá)水平與ICC病理情況進(jìn)行相關(guān)性分析。

1.4 觀察指標(biāo) ①觀察不同組織中CPS1基因、CPS1-IT1表達(dá)水平。②觀察CPS1基因及CPS1-IT1的表達(dá)水平與ICC患者不同病理分期的相關(guān)情況。③影響因素。查閱兩組患者病理資料，分析不同病理狀態(tài)下ICC中CPS1與CPS1-IT1表達(dá)水平，并完成多因素Logistic分析。④相關(guān)性分析：CPS1基因及CPS1-IT1的表達(dá)水平與ICC病理情況的相關(guān)性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 18.0軟件處理，計數(shù)資料采用n（%）表示，采用χ2檢驗；計量資料采用±s表示，采用t檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 癌組織和癌旁組織CPS1、CPS1-IT1表達(dá)情況 見表1。

表1 癌組織與癌旁組織CPS1、CPS1-IT1陽性表達(dá)比較 ［n（%）］

2.2 癌組織不同病理狀態(tài)下CPS1基因及CPS1-IT1的表達(dá)水平情況 見表2。ICC患者癌組織CPS1、CPS1-IT1表達(dá)與腫瘤分期、分化類型及T分期具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表2 癌組織不同臨床病理狀態(tài)下CPS1、CPS1-IT1表達(dá)比較

2.3 ICC患者癌組織CPS1基因及CPS1-IT1的表達(dá)水平影響多因素Logistic分析 見表3。多因素Logistic分析結(jié)果表明，ICC患者癌組織CPS1基因及CPS1-IT1的表達(dá)水平與腫瘤直徑、分化類型、淋巴轉(zhuǎn)移、T分期有關(guān)，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表3 ICC患者癌組織CPS1基因及CPS1-IT1的表達(dá)水平影響多因素Logistic分析

2.4 CPS1基因及CPS1-IT1的表達(dá)水平與ICC病理情況的相關(guān)性分析 見表4。SPSS Pearson相關(guān)性分析結(jié)果表明，CPS1基因及CPS1-IT1的表達(dá)水平與腫瘤直徑、淋巴轉(zhuǎn)移、T分期呈正相關(guān)性（P＜0.05），與分化類型呈負(fù)相關(guān)性（P＜0.05）。

3 討論

ICC如果能得到及時的治療，將大大提高其生存率［7］。膽管癌的早期癥狀一般表現(xiàn)為以下幾方面。①肝臟腫大：肝臟腫大是ICC患者常見癥狀，且多數(shù)患者由于膽汁淤積引起。②膽囊腫大：腫瘤位于三管匯合或以下部位能引起膽囊腫大。③腹水：晚期患者病灶組織將侵犯腹膜、門靜脈，導(dǎo)致門脈高壓，從而引起腹水［8］。④其他：病灶位于膽總管末端者，臨床以膽總管、胰管阻塞為主，部分患者伴有貧血等。因此，加強(qiáng)ICC患者早期治療對改善患者預(yù)后具有重要的意義［9］。

目前，臨床上對于ICC以手術(shù)治療為主，且病灶切除率為46%～75%，但是盡管手術(shù)治療能延長患者壽命，但3年生存率較低（一般為40.0% ～50.0%）［10，11］。國外學(xué)者研究表明，通過手術(shù)治療能完全切除腫瘤（R0切除），保留足夠的肝臟，同時解除與膽道梗阻相關(guān)的所有癥狀，切除范圍需根據(jù)腫瘤的部位、大小、是否發(fā)生局部轉(zhuǎn)移等因素而決定。對于肝細(xì)胞癌的根治性切除，多選擇以肝段為基本單位行單個肝段或聯(lián)合肝段切除，保證切緣距離腫瘤1 cm［12］。但由于ICC部位較為特殊，腫瘤細(xì)胞具有較強(qiáng)的侵襲性，手術(shù)治療時宜以肝葉為基本單位進(jìn)行完整切除可能更為合理。常用手術(shù)方式包括肝葉切除、半肝切除、擴(kuò)大半肝切除等術(shù)式，如腫瘤已侵犯肝臟內(nèi)脈管分支（門靜脈、膽管）［13］。但是由于ICC通常起病隱匿，臨床診斷比較困難，診斷ICC的主要標(biāo)志物是糖類抗原，但是也僅有30%的患者在檢查時糖類抗原超過了1 000 U／m l，其他大多數(shù)患者的這一指標(biāo)沒有明顯變化，這使得糖類抗原在ICC的診斷和病情評估存在很大局限性。而其他腫瘤標(biāo)記物如癌胚抗原、甲胎蛋白等在診斷ICC時價值更小。所以多數(shù)的ICC患者在初次診斷時已經(jīng)是中晚期了，這使得很多患者失去手術(shù)機(jī)會，僅有20%～40%的ICC患者可以進(jìn)行手術(shù)治療［14］。然而即使接受了手術(shù)治療，術(shù)后復(fù)發(fā)率也高達(dá)46% ～65%。ICC是多因素疾病，是膽道疾病及一系列肝臟疾病導(dǎo)致的，目前沒有更好的治療方案。近年來，CPS1基因及CPS1-IT1被不斷證實在ICC癌組織內(nèi)共同高表達(dá)，且與患者不同病理分期相關(guān)［15］。本研究結(jié)果說明CPS1與CPS1-IT1在ICC的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，并可能成為ICC臨床診斷相對特異的腫瘤標(biāo)志物。因此，臨床治療過程中應(yīng)加強(qiáng)CPS1與CPS1-IT1水平測定，評估患者預(yù)后，指導(dǎo)臨床治療，鞏固手術(shù)效果。