精子形態(tài)與體外受精結(jié)局的相關(guān)性研究

教 郁，宋晶晶，王玉婷，印顯勃

（沈陽二〇四醫(yī)院，遼寧 沈陽 110000）

體外受精和自然受精存在很大的差別，尤其是單精子卵胞漿注射體外受精對精子的要求較低，但部分特殊類型精子依然很難實(shí)現(xiàn)體外受精，甚至受精失敗，有些畸形精子還會導(dǎo)致胚胎發(fā)育異常，由此可見精子形態(tài)直接影響體外受精結(jié)局[1]。對此，本研究以IVF/ICSI治療患者為研究對象，分析了精子形態(tài)與體外受精結(jié)局的相關(guān)性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2015年10月～2019年10月IVF/ICSI（常規(guī)體外受精及單精子卵胞漿內(nèi)注射）治療患者為研究對象，根據(jù)不同周期精子形態(tài)分為A、B、C、D、E、F六組，其中A、B、C組屬于IVF周期，A組精子正常形態(tài)＜2%，B組精子正常形態(tài)在2%～4%范圍內(nèi)，C組精子正常形態(tài)≥4%；D、E、F組屬于ICSI周期，D組精子形態(tài)＜2%，E組精子形態(tài)在2%～4%，F(xiàn)組精子正常形態(tài)≥4%，助孕周期均為684個，每個周期都使用長方案促排卵，并要求男方禁欲2～7d，然后取精。所有組別的男女雙方在年齡、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、不孕年限、原發(fā)不孕比及回收卵數(shù)等基本情況上均有可比性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 受精及胚胎培養(yǎng)

受精前：女方要根據(jù)實(shí)際情況注射絨毛膜促性腺激素（HCG），約（39.8±1.1）h后利用B超引導(dǎo)取卵，即在體視顯微鏡下找到卵丘；然后將取出的卵丘復(fù)合體（OCCC）經(jīng)拾卵沖洗液（HM）沖洗后放置在規(guī)格為Falcon 353002 60 mm的培養(yǎng)皿中（此皿為經(jīng)過夜平衡后的受精培養(yǎng)皿，每個液滴2～5個卵子），最后放置到專門的培養(yǎng)箱中進(jìn)行平衡和培養(yǎng)，培養(yǎng)箱的C02濃度及溫度分別控制在6%、37.0℃[2]。具體IVF/ICSI受精及培養(yǎng)如下.

1.2.1 IVF受精及培養(yǎng)

①注射HCG后約（38.9±0.4）h進(jìn)行授精；②受精時將5 mL圓底試管（裝有預(yù)先處理好的精液）由洗精室的培養(yǎng)箱中取出，再將FM受精皿（裝有卵子）由培養(yǎng)箱中取出，以每個卵子對應(yīng)5000～1000條精子將精卵進(jìn)行混合培養(yǎng)。③培養(yǎng)（16.8±0.6）h后觀察原核形成情況，培養(yǎng)箱的C02、溫度分別控制在6%、37.0℃，（64.9±1.2）h后繼續(xù)觀察胚胎情況[3]。

1.2.2 ICSI受精及培養(yǎng)

①注射HCG后約（39.7±0.6）h去掉卵子顆粒細(xì)胞；②先于去顆粒皿中（透明質(zhì)酸酶）脫顆粒，然后置于沖洗皿中進(jìn)行洗滌，最后放置到規(guī)格為Falcon 353002 60 mm培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng)；③精子在PVP中制動后對MII卵子行ICSI受精，受精后（16.8±0.6）h對原核的形成情況進(jìn)行觀察，培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度控制在6%、37.0℃，（64.9±1.2）h后繼續(xù)觀察胚胎情況[3]。

1.3 觀察指標(biāo)

受精率、卵裂率、優(yōu)胚率及妊娠率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 22.0對計(jì)數(shù)資料及計(jì)量資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，其中計(jì)數(shù)資料使用x2進(jìn)行檢驗(yàn)，用“%”表示，計(jì)量資料使用t檢驗(yàn)，用“±s”表示，同時具有差異和統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的數(shù)據(jù)結(jié)果用“P＜0.05”。

2 結(jié) 果

2.1 IVF周期A、B、C三組的體外受精結(jié)局比較

C組的受精率最高，且與A、B兩組比較呈現(xiàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），卵裂率、優(yōu)胚率及妊娠率比較有可比性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），詳見表1。

表1 A、B、C組體外受精結(jié)局比較（%）

2.2 ICSI周期D、E、F三組的體外受精結(jié)局比較

D、E、F三組的受精率、卵裂率、優(yōu)胚率、妊娠率均具有可比性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），詳見表2。

表2 D、E、F組體外受精結(jié)局比較（%）

3 討 論

研究結(jié)果顯示，IVF周期治療中A、B、C三組的受精呈逐漸上升趨勢且都具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這說明精子形態(tài)越正常則體外受精成功率越高。相關(guān)文獻(xiàn)顯示，精子生成和成熟過程中會受到各種因素影響[4]，從而導(dǎo)致異常精子形態(tài)發(fā)生，最終形成畸形精子，影響體外受精結(jié)局，諸如染色體缺陷、基因缺陷、精子DNA碎片增多等異常都會影響精子正常功能，從而影響體外受精結(jié)局，降低體外受精率，嚴(yán)重者完全不受精。

ICSI周期治療中D、E、F三組中，受精率、卵裂率、優(yōu)胚率、妊娠率均有可比性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），這因?yàn)镮CSI是將精子直接注射到卵胞漿內(nèi)，不需要精子游動，減少了精子與卵子透明帶周圍、卵子透明帶之間的摩擦，從而更加準(zhǔn)確的識別和穿透到卵子中，彌補(bǔ)了精子游動中受到各種不利因素的影響，最終證實(shí)了精子形態(tài)對ICSI受精的影響有限。

研究結(jié)果還顯示因?yàn)镮VF/ICSI技術(shù)中受精精子都應(yīng)用到了精液處理技術(shù)，能夠快速將活力很好的精姿選出，有效去除了形態(tài)異常的精子，從而保證體外受精成功率，但I(xiàn)VF受精受到精子形態(tài)的影響較大。