HPLC法測定甘草中甘草苷和甘草酸含量

張 浩

（遼寧盤錦檢驗檢測中心，遼寧 盤錦 124010）

甘草具有補脾益氣、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛、調和諸藥等功效，其用途廣泛，有著“國老”別名[1-2]。神農本草經甘草是上品常用中藥，在中國甘草應用于臨床的時間已有4000多年。甘草中的主要活性成分甘草酸具有抗炎、解熱消毒、抗腫瘤、抗過敏和保肝等作用[3]。本文選取了不同產地的甘草，采用高效液相色譜法對甘草苷和甘草酸含量進行了測定，為以后的科研、醫院購藥、百姓用藥提供了指導。

1 材料與儀器

1.1 儀器與試劑

Agilent1100型高效液相色譜儀，PRO-DI-T超純水機（德國Sartorius公司），BP211D電子天平（德國Sartorius公司），700VDE型數控超聲波清洗器（合肥金龍克機械制造有限公司），HL-100 型高速多功能粉碎機（上海塞耐機械有限公司），202-OAB型電熱恒溫干燥箱（天津市泰斯特儀器有限公司），甘草苷對照品（批號：111610-201908，含量為95.0%）購于中國食品藥品檢定研究院，甘草酸銨對照品購于中國食品藥品檢定研究院，乙腈為色譜純，磷酸為優級純（國藥集團化學試劑有限公司）。

1.2 材料

本實驗中所使用的甘草中藥飲片均購自遼寧盤錦地區的不同藥品經營單位（6個產地，分別是新疆、內蒙古、寧夏、甘肅、黑龍江、山西），經遼寧盤錦檢驗檢測中心主任中藥師張國友鑒定均為正品。

2 方法與結果

2.1 甘草酸測定方法

2.1.1 色譜條件

以十八烷基硅烷鍵合硅膠作為填充劑；流動相A為乙腈，流動相B為0.05%磷酸溶，檢測波長237 nm；按下表中規定進行梯度洗脫。

表1 色譜條件

2.1.2 對照品溶液制備

甘草苷和甘草酸銨對照品精密稱定后加70%乙醇制成每l.0 ml含甘草苷20μg和甘草酸銨0.2 mg的溶液，用0.45μm微孔濾膜濾過，供測試使用(甘草酸重量=甘草酸銨重量/1.0207)。

2.1.3 供試品溶液的制備

取全部供試樣品，分別粉碎，粉碎后過三號篩，精密稱定上述6個供試樣品粉末約0.2g，加入100ml70%乙醇溶液，超聲處理30min，室溫放冷后稱定重量，補足超聲前后減少的重量，加入乙醇后搖勻，進行過濾，取續濾液，即得供試品溶液。

2.1.4 甘草苷和甘草酸含量測定

吸取對照品和供試品溶液各10.0μL，注入高效液相色譜儀，通過峰面積計算進而得到甘草苷和甘草酸的含量。

2.2 結果

《中國藥典》2015年版一部中對甘草中甘草苷和甘草酸含量進行了規定：按干燥品計算，含甘草苷不得少于0.45%，甘草酸不得少于1.8%。本文選取的6個產地的甘草均符合要求，其數值見表2。

表2 6個產地的甘草中甘草苷和甘草酸含量

3 討 論

本文選取了6個不同產地的甘草，采用高效液相色譜法分別測定了甘草中甘草苷和甘草酸的含量。高效液相色譜法，操作簡單，靈敏度高，結果準確可靠。經過測定得出：內蒙古出產的甘草中甘草苷和甘草酸含量最高，進一步體現了藥材地道性的重要性。