細菌感染性腹瀉患兒糞便培養及抗菌藥物敏感性分析

張杉，林莎莎

(安陽市婦幼保健院 檢驗科，河南 安陽 455000)

腹瀉分為感染性腹瀉、非感染性腹瀉兩種類型，其中感染性腹瀉是由病毒、細菌、原蟲等因素引起的腸道傳染病，是發展中國家重要的公共衛生問題[1-2]。合理使用抗生素是臨床治療感染性腹瀉及預防耐藥性發生的關鍵，因此明確致病菌，并了解其對不同抗菌藥物的敏感性可為臨床合理選用抗生素提供參考依據，以促進患兒早期康復。本研究旨在探討細菌感染性腹瀉病原菌分布情況及抗菌藥物敏感性，為臨床治療合理用藥提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2018年4月至2019年4月就診于安陽市婦幼保健院的744例細菌感染性腹瀉患兒，其中男352例，女392例，年齡6個月～12歲，平均(6.01±2.12)歲?；純杭覍僮栽竻⑴c本研究并簽署知情同意書。本研究經安陽市婦幼保健院醫學倫理委員會審核通過。

1.2 納入及排除標準納入標準：(1)經血常規、生化檢查確診；(2)年齡≤12歲；(3)伴有發熱、糞便性狀異常等臨床表現；(4)每天腹瀉≥3次；(5)為首次確診。 排除標準：(1)血液、免疫系統疾??；(2)1周內曾使用抗生素；(3)心、肝、腎、腦等重要器官功能障礙；(4)服用免疫抑制劑；(5)免疫缺陷性疾??；(6)病毒性、物理因素、不當飲食所致腹瀉。

1.3 標本采集方法于患兒入院后未使用抗菌素治療前采集糞便標本，取黏液膿血便標本，置于無菌瓶內，立即送至檢驗科。

1.4 細菌培養方法取患兒糞便標本中黏液膿血部分，挑出分別接種于麥康凱培養基、TCBS瓊脂平板、血瓊脂平板、SS瓊脂平板，于35 ℃條件下培養18～24 h，采用Microscan WalkAway-40全自動微生物分析儀及藥敏綜合反應板進行細菌鑒定和藥敏試驗，檢出致病菌或異常優勢生長條件致病菌者為培養結果陽性。

1.5 藥敏試驗采用K-B紙片擴散法測定臨床常用藥物抑菌濃度。由專業人員嚴格按照美國臨床實驗室標準化委員會標準(NCCLS)進行藥敏試驗，判定致病菌的耐藥情況。藥敏紙片包括氨芐西林、哌拉西林、頭孢唑啉、頭孢噻肟、頭孢吡肟、慶大霉素、亞胺培南、阿米卡星、左氧氟沙星、環丙沙星、復方磺胺甲噁唑、萬古霉素。質控菌株(均購自北京中科質檢生物技術有限公司)為銅綠假單胞菌ATCC27853、大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923。

1.6 觀察指標(1)細菌感染性腹瀉患兒致病菌分布情況；(2)常見致病菌藥物敏感性。

1.7 統計學方法采用SPSS 22.0統計軟件對數據進行分析，計數資料以頻數和率(%)表示。

2 結果

2.1 細菌感染性腹瀉患兒致病菌分布細菌培養結果顯示，744例細菌感染性腹瀉患兒共檢出133株病原菌，其中條件致病菌29株(21.80%)，致病菌104株(78.20%)；致病菌中檢出志賀菌48株(36.09%)，大腸埃希菌35株(26.32%)，沙門菌21株(15.79%)；條件致病菌中檢出變形桿菌6株(4.51%)，克雷伯菌5株(3.76%)，檸檬酸桿菌5株(3.76%)，腸球菌10株(7.52%)，銅綠假單胞菌3株(2.26%)。

2.2 常見致病菌藥物敏感性志賀菌對亞胺培南敏感性最高；大腸埃希菌對頭孢吡肟、阿米卡星、亞胺培南敏感性較高，沙門菌對頭孢唑啉、頭孢吡肟、阿米卡星、亞胺培南敏感性較高；腸球菌對亞胺培南、萬古霉素敏感性較高。見表1。

表1 常見致病菌藥物敏感性[n(%)]

3 討論

感染性腹瀉為嬰幼兒常見腸道疾病，以衣原體、病毒、細菌感染為主，引起小腸及結腸炎癥反應，在兒科發病率僅次于呼吸道傳染病。據報道，全球范圍內每年因感染性腹瀉死亡患兒達380萬例，占同齡兒童死因的30%左右，我國感染性腹瀉年發病率為每人0.9次，但5歲以下兒童年發病率達每人2.1次，因此臨床上應加強小兒感染性腹瀉的防治工作，及時明確病原菌種類及耐藥性，可指導臨床合理高效應用抗生素，降低患兒病死率[3]。

本研究細菌培養結果顯示，744例細菌感染性腹瀉患兒共檢出133株病原菌，主要為致病菌，其次為條件致病菌。主要致病菌分別為志賀菌、大腸埃希菌、沙門菌、腸球菌、變形桿菌、克雷伯菌、檸檬酸桿菌、銅綠假單胞菌，可見感染性腹瀉患兒致病菌種類多樣，且志賀菌、大腸埃希菌、沙門菌、腸球菌為其主要致病菌，與尚艷等[4]研究報道一致。因大多數志賀菌患者缺乏黏液膿血便、里急后重等腹瀉典型表現，故需加強志賀菌感染患者管理，糞便培養為其不可或缺的檢查措施。相關研究指出，細菌感染性腹瀉發生率較高與志賀菌屬對抗菌藥物產生耐藥性密切相關，非侵襲性腸毒素型腹瀉及非細菌感染性腹瀉無需應用抗菌藥物，但抗菌藥物廣泛應用問題較普遍，未能正規使用抗菌藥物，成為細菌耐藥的主要因素[5]。本研究結果發現，志賀菌對多種傳統抗生素具有嚴重的耐藥性，敏感性較差，對亞胺培南敏感性最高，對第3代頭孢菌素敏感性較以往報道低，其原因可能與產生超廣譜β-內酰胺酶、AmpC酶，導致第3代頭孢菌素活性下降有關，因第3代頭孢菌素抗菌譜較廣，易產生耐藥性，在臨床應用中需嚴格把控適應證，避免藥物濫用而產生耐藥性[6]。大腸埃希菌所涉及的致病因子主要為毒素和黏附因子，毒素可阻斷正常腸黏膜分泌，破壞腸細胞，黏附因子可促使大腸埃希菌特異性黏附于腸黏膜[7]。本研究結果發現，大腸埃希菌對頭孢吡肟、阿米卡星、亞胺培南敏感性較高。近年來，沙門菌檢出率逐漸升高，多與生活習慣、飲食結構轉變有關，飲食中牛奶、蛋、肉類食物占比增加，加上小兒免疫力低下、無良好衛生習慣等，導致沙門菌檢出率增加[8]。本研究結果顯示，沙門菌對頭孢唑啉、頭孢吡肟、阿米卡星敏感性較高，因此對于細菌性痢疾、飲食不潔引起的感染性腹瀉，未明確藥敏結果情況下，可選用第3代頭孢菌素、阿米卡星、亞胺培南等進行治療。腸球菌為腸道內正常定植菌，機體免疫力低下時可導致感染發生，且對臨床常用抗菌藥物具有天然耐藥性，本研究中腸球菌對萬古霉素、亞胺培南敏感性較高，但頻繁使用可導致耐萬古霉素腸球菌形成。因此，臨床上在細菌感染性腹瀉患兒治療過程中應慎用萬古霉素，避免濫用第3、4代頭孢菌素、碳青霉烯類及氨基糖苷類抗生素。

綜上所述，細菌感染性腹瀉患兒主要致病菌為志賀菌、大腸埃希菌、沙門菌、腸球菌，且不同病原菌的耐藥性不同，通過糞便標本及藥敏試驗于治療前掌握病原菌類型及其藥物敏感性，可為臨床合理選擇抗菌藥物提供依據，有助于提高疾病的治療效果。