怒江州不同產(chǎn)地野生羌活中羌活醇與異歐前胡素的含量測(cè)定

和 祎

云南省怒江州食品藥品檢驗(yàn)所，云南 怒江 673199

羌活又名羌青，為常用中藥材，有數(shù)千年的藥用歷史，其味辛、苦、性溫，具有解表散寒、祛風(fēng)除濕、止痛等功效，可用于風(fēng)寒感冒、頭痛項(xiàng)強(qiáng)、風(fēng)濕痹痛、肩背酸痛等的治療[1-4]。隨著中醫(yī)藥事業(yè)的發(fā)展，羌活藥材不僅在中藥配方中廣泛應(yīng)用，也是許多中成藥的主要原料，羌活屬于三級(jí)中藥材保護(hù)品種，由于過多的采挖，導(dǎo)致野生資源嚴(yán)重減少。鑒于羌活藥材的應(yīng)用廣泛，而目前市場(chǎng)上羌活藥材緊缺，對(duì)野生羌活進(jìn)行合理的保護(hù)和引種種植顯得非常重要。怒江州地處滇西北橫斷山脈縱谷地帶，有少量野生羌活資源，但基于羌活品種繁多，辨別起來非常困難，本研究按《中國(guó)藥典》2015年版一部羌活質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，主要通過對(duì)怒江州不同產(chǎn)地的羌活進(jìn)行羌活醇和異歐前胡素含量測(cè)定，為怒江州開展羌活引種馴化的種植企業(yè)提供參考。

1 材料與試藥

1.1 儀器 LC-20A高效液相色譜儀(日本島津儀器公司)，GH-252電子天平(廣州市愛安得儀器有限公司)，CPA225D賽多利斯電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器北京有限公司，十萬(wàn)分之一)。

1.2 試藥 羌活醇對(duì)照品(批號(hào)：111520-2013，中國(guó)食品藥品檢定研究院，含量99.8%)；異歐前胡素對(duì)照品(批號(hào)：110827-201812，中國(guó)食品藥品檢定研究院，含量99.6%)；藥材采自于2019年10月至11月的新鮮樣品，選取根莖和根，除去須根和泥沙，曬干。采集地分別為怒江州蘭坪縣、瀘水縣等地。乙腈為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：Inertisl ODS-3 C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流動(dòng)相：以乙腈-水(44∶56)為流動(dòng)相；流速為1.0 mL/min；柱溫：40 ℃；進(jìn)樣量：10 μL；檢測(cè)波長(zhǎng)為310 nm；理論板數(shù)按羌活醇峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。色譜圖如圖1所示。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取羌活醇對(duì)照品13.20 mg，置25 mL的容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，制成每1 mL含0.5269 mg羌活醇的對(duì)照品儲(chǔ)備液。另精密稱取異歐前胡素13.43 mg，置于50 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，制成每mL含0.2675 mg的異歐前胡素的對(duì)照品儲(chǔ)備液。分別精密量取以上兩種對(duì)照品儲(chǔ)備液5 mL，置于50 mL的容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，及得對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 取本品粉末(過三號(hào)篩)約0.4 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，稱定重量，超聲處理(功率250 W，頻率50 kHZ)30 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。

2.4 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取已知含量的同一批藥材供試品細(xì)粉，約0.4 g(蘭坪縣營(yíng)排鎮(zhèn)小橋村 四川引種種植)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，共6份，每二份分別加入“2.2”項(xiàng)下配制的對(duì)照品溶液儲(chǔ)備液1.0、2.0、5.0 mL，按“2.3”項(xiàng)下的方法制成供試品溶液6份，各取10 μL注入液相色譜儀，依法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算。結(jié)果羌活醇平均回收率為100.26%，RSD為1.74%(見表1)。異歐前胡素平均回收率為100.08%，RSD為1.64%(見表2)。

表1 羌活醇回收率試驗(yàn)結(jié)果 (n=6)

表2 異歐前胡素回收率試驗(yàn)結(jié)果 (n=6)

2.5 樣品含量測(cè)定 取不同產(chǎn)地的羌活藥材按“2.3”項(xiàng)下方法分別制備供試品溶液，各取10 μL,每份溶液進(jìn)樣2次，計(jì)算，不同產(chǎn)地羌活藥材中羌活醇和異歐前胡素的含量見表3。

表3 不同產(chǎn)地羌活藥材中羌活醇和異歐前胡素測(cè)定結(jié)果 (n=2)

3 討論

《中國(guó)藥典》2015年版規(guī)定，羌活中含羌活醇和異歐前胡素的總量不得少于0.40%。從表1得出有3個(gè)產(chǎn)地的羌活藥材中無(wú)羌活醇，甚至有的兩個(gè)成分都沒有，6個(gè)不同產(chǎn)地的樣品，僅有一個(gè)達(dá)到《中國(guó)藥典》的要求。

通過比對(duì)，6個(gè)樣品的含量差別很大。經(jīng)過分析，筆者認(rèn)為可能存在幾個(gè)方面的原因。首先羌活品種繁多，對(duì)羌活品種的認(rèn)定顯得尤為重要，一旦品種選擇出錯(cuò)，將對(duì)企業(yè)造成很大的損失。其次由于羌活主要成分受生長(zhǎng)環(huán)境影響較大，生長(zhǎng)環(huán)境不同，含量差別也很大。再次種植年限對(duì)羌活成分的影響也比較大，種植的時(shí)間越長(zhǎng)含量越高。此次試驗(yàn)樣品均由相關(guān)種植企業(yè)提供，并非我所試驗(yàn)人員采集。怒江州被列為全國(guó)“三區(qū)三州”深度貧困地區(qū)，在脫貧攻堅(jiān)的關(guān)鍵時(shí)期，建議相關(guān)種植企業(yè)要引起高度重視，在種植的品種、生長(zhǎng)環(huán)境等方面要進(jìn)行認(rèn)真的選擇，以免造成更大的損失。