抗環瓜氨酸肽抗體、抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體和嗜酸性粒細胞聯合檢測在早期類風濕關節炎中的診斷價值

魏 薇，何金昌，余素君

(四川省攀枝花市中心醫院風濕免疫科，四川 攀枝花 617067)

類風濕關節炎(RA)好發于中年女性，以多關節慢性炎癥為主要臨床表現，且隨病情進展，還能誘發關節外器官、組織損傷，致殘率較高，患者預后較差[1]。故盡早診斷、及時治療，對RA患者預后非常重要。典型RA病例診斷并不困難，但早期RA可以單關節炎為首發癥狀，漏診及誤診率較高[2]。探尋早期早期的篩查指標，盡早確診RA，有其必要性。抗環瓜氨酸肽(CCP)抗體及抗突變型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗體均為RA相關自身抗體，近年來，在RA診斷方面研究較多，但二者靈敏度仍不太理想[3]。另外，T淋巴細胞及B淋巴細胞分泌的大量炎性因子在RA的發生發展中占據重要地位，在炎性因子的大量浸潤下，嗜酸性粒細胞(EOS)也能過度增殖，進一步增強炎癥反應，加速RA病情進展，故EOS也與RA發生密切相關[4]。本研究分析外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體及EOS聯合檢測在早期RA診斷中的應用價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料2018年4月至2019年12月我院63例早期RA患者(RA組)及52例非RA自身免疫疾病患者(非RA組)。納入標準：①RA患者與美國風濕病學會(ACR)/歐洲抗風濕病聯盟(EULAR)[5]制定的診斷標準相符，且以病程≤2年為早期；②RA組不合并其他免疫疾病；③年齡≥18歲；④臨床資料完整。排除標準：①入院前1個月內行高劑量糖皮質激素或生物治療；②合并肝腎功能障礙、惡性腫瘤；③神經精神疾病史；④合并過敏性疾病、寄生蟲感染等影響EOS水平的疾病。非RA組中系統性紅斑狼瘡18例，干燥綜合征14例，強直性脊柱炎11例，混合性結締組織病9例；非RA組疾病均符合ACR[6]制定的相關診斷標準。納入40例同期健康體檢者為健康對照組。三組性別、年齡及體質量指數(BMI)等基線資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 三組基線資料比較

1.2 方法RA組及非RA組均在入院次日清晨，抽取空腹外周靜脈血，健康對照組則收集體檢當日空腹外周靜脈血；采用酶聯免疫吸附法(試劑盒由美國R&D公司生產)檢測抗CCP抗體、抗MCV抗體水平，使用血細胞自動分析儀(儀器由日本日立公司生產)檢測外周血EOS含量。

1.3 統計學方法采用SPSS 21.0軟件分析數據。計量資料比較采用單因素方差分析及LSD-t檢驗；計數資料比較采用χ2檢驗；相關性分析采用Pearson相關分析；診斷價值分析采用受試者工作特征曲線(ROC)分析，記錄曲線下面積(AUC)。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體及EOS水平比較三組外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體及EOS水平比較，均為RA組>非RA組>健康對照組(P<0.05)，見表2。

2.2 早期RA患者外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體、EOS水平的相關性早期RA患者外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體、EOS水平相互呈正相關(P<0.05)，見表3。

表2 三組外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體及EOS水平比較

表3 早期RA患者外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體、EOS水平的相關性分析 (r)

2.3 外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體及EOS聯合檢測對早期RA的診斷價值分析外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體及EOS對早期RA均有較高診斷價值(P<0.05)，其Cut-off值分別為66.025 U/ml、51.780 U/ml、1.780 %；聯合診斷價值最高，AUC值可達0.997(P<0.05)，見圖1、表4。

圖1 外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體及EOS聯合檢測診斷早期RA的ROC曲線分析

表4 診斷價值分析

3 討論

大量研究證據顯示[7]，RA發病3個月內即可出現關節滑膜破壞，未得到及時治療者，2年內還能發生不可逆骨質破壞，嚴重影響患者預后及生存質量。因此，及時診療至關重要。目前，RA診斷多依據臨床表現、影像學檢查及類風濕因子等手段，但早期RA不典型，較為隱匿，使早期RA檢出率較低[8]。故通過自身免疫抗體等血清學檢測方式，篩查早期RA，成為近年來學術界研究的熱點[9]。

抗CCP抗體是一種含瓜氨酸氨基酸殘基的蛋白，且為環狀聚絲蛋白的多肽片段，以免疫球蛋白G型為主，在炎癥介質刺激下，凋亡的巨噬細胞分泌波形蛋白以及突變型波形蛋白，使抗CCP抗體水平隨之升高，研究表明[10]，抗CCP抗體不僅與RA發生發展密切相關，其血清含量還能輔助評估關節外損傷、骨侵蝕等預后情況。本研究發現，三組外周血抗CCP抗體水平比較，為RA組>非RA組>健康對照組。說明，抗CCP抗體在早期RA患者外周血中顯著增多，于診斷早期RA有利。抗MCV抗體為近年來發現存在于RA患者血液中的一種自身抗體，與抗CCP抗體共同屬于抗瓜氨酸化蛋白抗體，CCP抗原決定簇為人工合成，MCV抗原決定簇源自天然物質，CCP抗原決定簇也相對MCV要少，故理論上抗MCV抗體特異度及敏感度更高[11]。但臨床不少學者發現，抗MCV抗體與抗CCP抗體在診斷RA時，具有相近的靈敏性及特異性，2者診斷相當[12]。本研究中，三組外周血抗MCV抗體比較，為RA組>非RA組>健康對照組。表明，抗MCV抗體在鑒別早期RA中具有一定作用。且早期RA患者外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體水平呈顯著正相關。這也提示，抗CCP抗體及抗MCV抗體水平均與RA發生發展相關，于輔助診斷早期RA有積極意義。不僅如此，ROC曲線分析發現外周血抗CCP抗體、抗MCV抗體對早期RA均具有較高診斷價值，其靈敏度分別為84.13%、85.71%，特異度分別為95.65%、100.00%，診斷價值相似。也證實抗CCP抗體、抗MCV抗體對早期RA診斷價值相當。其Cut-off值分別為66.025 U/ml、51.780 U/ml，也可供臨床參考。

據文獻報道[13]，EOS來源于骨髓造血干細胞，與粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子、白細胞介素-5等細胞因子的增殖、分化、成熟密切相關，在過敏性疾病中高表達，在RA發生發展中的作用也受到關注。為減少其他因素的影響，本研究將過敏性疾病等可能影響EOS表達的因素排除，研究顯示，三組外周血EOS水平比較，為RA組>非RA組>健康對照組。說明，早期RA患者體內EOS水平顯著升高，利于臨床鑒別。分析其原因可能與RA作為自身免疫系統疾病，在發病早期即可出現Ⅰ型輔助性T細胞/Ⅱ型輔助性T細胞(Th1/Th2)平衡紊亂，分泌大量炎癥因子，刺激EOS產生有關[14]。且早期RA患者外周血EOS水平還與抗CCP抗體、抗MCV抗體相互呈顯著正相關。提示，EOS可能參與RA發生發展，且可能與抗CCP抗體、抗MCV抗體也有一定關系。考慮該結果與RA的免疫系統功能失衡及炎癥介質的大量釋放，引起EOS、抗CCP抗體及抗MCV抗體協同增加有關。此外，經ROC曲線分析發現外周血EOS對早期RA具有較高診斷價值，其Cut-off值為1.780 %。這也提示，在排除過敏性疾病等因素影響的條件下，外周血EOS水平>1.780 %時，患者發生RA風險較高。然而，該數據是在本研究有限的樣本量基礎上分析得到的，僅供臨床參考。本研究還就外周血EOS、抗CCP抗體及抗MCV抗體聯合檢測的診斷價值展開分析，發現聯合檢測診斷價值最高，其AUC可高達0.997。表明，檢測外周血EOS、抗CCP抗體及抗MCV抗體對RA早期診斷具有重要意義。

綜上所述，早期RA患者體內外周血EOS、抗CCP抗體及抗MCV抗體水平相關性顯著，EOS、抗CCP抗體及抗MCV抗體可作為早期RA診斷的新方向，3項聯合檢測診斷價值最高，可為RA盡早診療開辟新道路。