腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者中采取定量病理技術(shù)對(duì)預(yù)后效果的影響

譚翠松，侯昕

（吉化總醫(yī)院 病理科，吉林 吉林 132021）

0 引言

乳腺癌是發(fā)生在腺上皮的惡性腫瘤疾病，屬于女性常見(jiàn)腫瘤病癥，50-54歲是女性高發(fā)年齡段，嚴(yán)重影響患者的身心健康。目前醫(yī)學(xué)界就乳腺癌的發(fā)病機(jī)制尚未達(dá)成統(tǒng)一共識(shí)，患者發(fā)病與家族乳腺癌病史、晚婚晚育、基因突變等因素關(guān)聯(lián)密切。乳腺癌患者早期無(wú)典型體征及癥狀，隨著病情的發(fā)展，常規(guī)體檢時(shí)可見(jiàn)乳腺腫塊、乳頭溢液、腋窩淋巴結(jié)腫、乳腺皮膚變化等，可利用超聲、磁共振檢查、乳腺X線鑒別病例[1]。臨床中約有1/3的乳腺癌患者伴發(fā)腋窩轉(zhuǎn)移情況，初期主要表現(xiàn)為同側(cè)腋窩淋巴結(jié)腫大，隨著病情的進(jìn)展，腫大淋巴結(jié)會(huì)逐漸與周圍組織融合、粘連和固定，部分晚期病例可轉(zhuǎn)移到對(duì)側(cè)和鎖骨上淋巴結(jié)，嚴(yán)重威脅患者的生命安全。因此早期篩查存在轉(zhuǎn)移危險(xiǎn)性患者，及時(shí)對(duì)癥處理，是改善預(yù)后的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[2]。為了探討評(píng)估腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者預(yù)后的可靠手段，本文就腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者中采取定量病理技術(shù)對(duì)預(yù)后效果的影響展開(kāi)了如下研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料。選取2012年6月至2014年6月醫(yī)院收治的腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者93例。根據(jù)術(shù)后5年隨訪結(jié)果將其分為對(duì)照組（無(wú)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，n=76）和觀察組（復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，n=17）。對(duì)照組患者年齡29-67歲，平均（45.21±5.19）歲。觀察組患者年齡27-65歲，平均（45.28±5.26）歲。上述數(shù)據(jù)對(duì)比同質(zhì)性優(yōu)良。納入標(biāo)準(zhǔn)：①組織活檢證實(shí)為腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌；②TNM分期Ⅰ-Ⅱ[3]；③腫瘤直徑＜3 cm，均行手術(shù)治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①手術(shù)禁忌癥；②合并其他腫瘤；③心血管嚴(yán)重疾?。虎芫癞惓?。

1.2 方法。使用蘇木精-伊紅染色法處理全部參與研究患者的病理切片，使用Feulgen染色法在放大400倍后行核細(xì)胞檢測(cè)，隨機(jī)選取無(wú)重疊腫瘤細(xì)胞（100-200個(gè)）與淋巴細(xì)胞（＞50個(gè)），測(cè)定細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)參數(shù)，包括核最大直徑、最小直徑、核面積、核周長(zhǎng)和核形狀因子；DNA指數(shù)（DI）計(jì)算方式如下，記錄平均積分吸光度A值，腫瘤細(xì)胞核DNA A值與淋巴細(xì)胞核DNA A值的比值即為DI[4]。

1.3 觀察指標(biāo)。①結(jié)合定量病理技術(shù)檢驗(yàn)結(jié)果，比較兩組的細(xì)胞核形態(tài)定量分析結(jié)果和DI。②利用logistic回歸法完成多因素分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。用SPSS 23.0處理數(shù)據(jù)，以χ2檢驗(yàn)定性資料（%、n），以t檢驗(yàn)定量資料（±s）；多因素分析運(yùn)用Logistic回歸法，P＜0.05，提示有差異。

2 結(jié)果

2.1 兩組的細(xì)胞核形態(tài)定量參數(shù)與DI對(duì)比。兩組患者在形狀因子方面比較無(wú)明顯差異（P＞0.05），兩組患者在核最小直徑、核最大直徑、核周長(zhǎng)、核面積、DI方面比較比較存在明顯差異（P＜0.05），詳見(jiàn)表1。

表1 兩組的細(xì)胞核形態(tài)定量參數(shù)與DI對(duì)比（±s）

表1 兩組的細(xì)胞核形態(tài)定量參數(shù)與DI對(duì)比（±s）

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2.2 多因素分析。經(jīng)過(guò)多因素分析可知，預(yù)后因素的標(biāo)準(zhǔn)誤差、回歸系數(shù)（β）、P值分別如下，核最小直徑：0.083、0.237、0.008；核最大直徑：0.084、0.176、0.035；核周長(zhǎng)：0.036、0.068、0.046；核面積：0.004、0.013、0.030；DI：0.094、0.253、0.009。由此可知，核最小直徑、核最大直徑、核周長(zhǎng)、核面積、DI是影響乳腺癌患者預(yù)后的獨(dú)立性危險(xiǎn)因素（P＜0.05）。

3 討論

近年來(lái)，隨著國(guó)民生活方式的轉(zhuǎn)變和生活節(jié)奏的加快，國(guó)內(nèi)乳腺癌發(fā)病率呈不斷上升趨勢(shì)，乳腺癌的臨床診療已成為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域關(guān)注的重點(diǎn)問(wèn)題。大多數(shù)乳腺癌患者在確診時(shí)已出現(xiàn)區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，貽誤了最佳治療時(shí)機(jī)，增加了治療難度，預(yù)后較差，病死率約為50%。早期檢出乳腺癌病例，患者經(jīng)過(guò)治療后的遠(yuǎn)期治愈率達(dá)到了90%以上，因此早期準(zhǔn)確判斷患者病情對(duì)預(yù)后產(chǎn)生著深遠(yuǎn)的影響[5-6]。臨床中腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者的檢出率較低，容易延誤患者病情，加劇了患者復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，影響預(yù)后。傳統(tǒng)的手術(shù)病理組織檢查作為診斷乳腺癌的金標(biāo)準(zhǔn)，盡管準(zhǔn)確性較好，但屬于有創(chuàng)檢查，限制了臨床的應(yīng)用和推廣。因此有必要探討評(píng)估腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌預(yù)后的有效路徑。

隨著醫(yī)學(xué)影像技術(shù)的不斷發(fā)展，超聲、CT、MRI等影像學(xué)檢查手段在乳腺癌疾病的診斷中得到了逐步應(yīng)用和推廣，但準(zhǔn)確率較低，尤其是對(duì)于未發(fā)生癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的病例，容易出現(xiàn)漏診情況，延誤患者治療時(shí)間。臨床中腫瘤細(xì)胞核形態(tài)變化可反映細(xì)胞分化程度，而核異質(zhì)性是導(dǎo)致局部復(fù)發(fā)的重要因素，采用行之有效的方法對(duì)形態(tài)變化進(jìn)行定性、量化分析，可描述核異型特征，為醫(yī)師診療患者病況、評(píng)估預(yù)后提供參考依據(jù)。李斌等[7]研究發(fā)現(xiàn)的，定量病理技術(shù)可通過(guò)多方式觀察生物微觀形態(tài)、宏觀組織，獲取細(xì)胞核核周長(zhǎng)、面積等細(xì)胞核具體參數(shù)形態(tài)，而腫瘤細(xì)胞核形態(tài)與腫瘤細(xì)胞分化程度關(guān)聯(lián)密切，根據(jù)腫瘤細(xì)胞核形態(tài)可為醫(yī)師判斷腫瘤細(xì)胞有無(wú)轉(zhuǎn)移，評(píng)估預(yù)后提供參照。

經(jīng)本文研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者的腫瘤細(xì)胞核最小直徑、核周長(zhǎng)、核最大直徑、DI、核面積均低于無(wú)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者，形狀因子對(duì)比未見(jiàn)顯著性差異，提示單獨(dú)根據(jù)形狀因子無(wú)法反映患者細(xì)胞核形態(tài)變化，而復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者和無(wú)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者的腫瘤細(xì)胞核形態(tài)、DI存在明顯差異，以此為依據(jù)可對(duì)預(yù)后進(jìn)行判斷。分析后可知，癌細(xì)胞通過(guò)不停地翻譯、轉(zhuǎn)錄等過(guò)程，復(fù)制自身DNA，達(dá)到增殖效果，引發(fā)細(xì)胞轉(zhuǎn)移，因此細(xì)胞核DNA含量顯著上升是惡性腫瘤細(xì)胞具有的特征之一，可作為評(píng)估乳腺癌預(yù)后的重要參照指標(biāo)。本文中復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者的DI遠(yuǎn)高于無(wú)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者，證實(shí)了這一觀點(diǎn)。臨床中利用定量病理學(xué)技術(shù)可獲取腫瘤細(xì)胞生物組織微管形態(tài)數(shù)據(jù)，從量化角度分析發(fā)病機(jī)制、病變形態(tài)特征。樊寧[8]對(duì)77例腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者研究后發(fā)現(xiàn)，采用定量病理技術(shù)能夠獲取較為客觀腫瘤生物特性信息，結(jié)合檢驗(yàn)結(jié)果可知復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者的腫瘤細(xì)胞核最小直徑、最大直徑、核周長(zhǎng)、核面積、DI高于無(wú)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者，提示定量病理技術(shù)可用于評(píng)估腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌預(yù)后，是一種可靠的方法。本文研究證實(shí)，DI、核面積、核周長(zhǎng)、核最大直徑、最小直徑是影響乳腺癌患者預(yù)后的危險(xiǎn)因素，說(shuō)明定量病理技術(shù)是一種評(píng)估腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌預(yù)后的有效定量方法。研究后發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞的分化程度、生物學(xué)行為與腫瘤的細(xì)胞核關(guān)系緊密，而細(xì)胞核的核異質(zhì)性是引起腫瘤局部復(fù)發(fā)的重要原因。因此通過(guò)定性描述、圖像等能夠分析和了解乳腺癌細(xì)胞核的特征、形態(tài)，為臨床診斷患者病情提供參照。本文采用的定量病理技術(shù)可保留細(xì)胞核完整的組織形態(tài)，獲得生物宏觀組織的形態(tài)變化特征，掌握核直徑、核面積等形態(tài)參數(shù)，并通過(guò)宏觀圖像或微觀數(shù)據(jù)量化病因，同時(shí)結(jié)合常規(guī)病理檢查結(jié)果，同步進(jìn)行定量檢驗(yàn)和形態(tài)觀察，具有操作簡(jiǎn)單、可重復(fù)操作的特點(diǎn)，在腫瘤病理研究中適用性廣泛。且采取定量病理技術(shù)可客觀反映腫瘤細(xì)胞完整細(xì)胞核中的DNA含量，獲取腫瘤生物學(xué)特性信息，根據(jù)細(xì)胞核形態(tài)判斷有無(wú)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移，并結(jié)合核異質(zhì)性變化評(píng)估預(yù)后。

綜上所述，本文對(duì)93例腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者進(jìn)行了定量病理技術(shù)檢測(cè)，通過(guò)觀察腫瘤細(xì)胞核微觀形態(tài)，發(fā)現(xiàn)DI、核面積、核最小直徑、核最大直徑、核周長(zhǎng)等參數(shù)是影響乳腺癌預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，可作為評(píng)估腋淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者預(yù)后的有效方法，具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。