雷元元
摘 ?要:雞傳染性喉氣管炎 (Avian Infectious Laryngotracheitis,AILT) 是一種常見的雞呼吸系統疾病,該病呈世界流行,死亡率極高,近年來給國內外養禽業造成了巨大的經濟損失。因此,本病的防治對養禽業的發展意義重大。本文通過對AILT的病原、流行病學、臨床診斷及診斷、防治措施的研究進展進行描述,以其為養禽業AILT的防控提供參考。
關鍵詞:雞;傳染性喉氣管炎;研究進展;病原;流行病學; 防治措施
中圖分類號:S858.31 ? ?文獻標識碼:A ? ? 文章編號:1673-1085(2020)8-0056-05
雞傳染性喉氣管炎(Avian Infectious Laryngotracheitis,AILT)是由雞傳染性喉氣管炎病毒 (infectious laryngotracheitis virus,ILTV)引起的一種急性接觸性呼吸系統傳染病。該病自1925年由美國科學家Mag和Tcttsles等首次報道以來在世界范圍內廣為流傳[1],1931年該病被正式命名為雞傳染性喉氣管炎[2]。1959年我國首次在貴陽市發現該病原,1987年以后在我國廣州、陜西、河南、江蘇、河北、新疆、北京等省市自治區相繼報道AILT的感染[3-4],1992年以后AILT在我國再次呈現地方性流行,直到1999年該病被世界動物衛生組織(OIE)定為B類傳染病[5],我國將其列為二類動物傳染病。據OIE報道,2004年[6]ILTV攻擊拉丁美洲特立尼達和多巴哥的雞、鴨、鸚鵡,暴發一起傳染性喉氣管炎,受感染的有產蛋雞、鴨、公雞,累計死亡408羽,無害化處理1 7266羽,給當地帶來了巨大經濟損失。2008年9月秘魯首都利馬市郊一庭院農場飼養的斗雞發生AILT[7],死亡26羽,這也是該地區首次發生該病。2009年以來,國內再次出現多地爆發,2013年云南省肉雞爆發AILT疫情,2014年河北蛋雞發生疫情,2015年青海西寧蛋雞場被ILTV攻擊[8-10]。近年來,國內AILT的發病呈上升趨勢且本病發病率接近100%,死亡率可達40%,產蛋雞感染后可使產蛋率急劇下降,甚至停產,由此可見AILT嚴重制約著國內外養禽業的發展,給養禽業造成巨大的經濟損失。
ALIT的防控遵循“預防為主,防重于治”的原則開展,雖然ILTV的研究已經進入分子生物學階段,基因工程疫苗已成為目前AILT疫苗研究的熱點話題,但這些疫苗至今尚未應用到實際生產中,因此現在預防本病發生的主要方法還是加強生物安全,注射弱毒疫苗來提高群體免疫力。由于傳統活疫苗和野毒均可引起雞群潛伏感染,且排毒期較長,潛伏感染的病毒在一定條件下(比如應激),會重新激活,引起雞群呈現周期性的自然發病,同時新的ILTV流行株發生改變,這就使近年來AILT再度復發。本文將國內外關于AILT防控的先進技術進行整理綜述,為廣大養殖企業防控本病提供參考。
1 ?病原
雞傳染性喉氣管炎病毒屬于皰疹病毒科A型皰疹病毒屬,雙股線性DNA分子,二十面立體對稱,核衣殼由162個殼粒組成,與其他皰疹病毒顆粒形態基本相似,具有囊膜、核衣殼和核心,成熟的病毒顆粒在細胞核內呈散在或結晶狀排列。ILTV生長環境比較特殊,只能在氣管上增值,其他臟器很難檢測到病原,這就指導人們采集病料時以氣管組織及滲出物為主。ILTV[11]能在雞胚中良好生長,雞胚感染后會出現胚體變小,絨毛尿囊膜增生和壞死,形成混濁的斑塊病灶,最后在12 d內死亡。同時ILTV也可在細胞培養物中生長繁殖,接種4~6 h便出現核染色質變位和核仁變圓,隨后細胞融合,成為多核的巨細胞(合胞體),并且在接種后12 h 便能檢出核內包涵體。隨著培養時間的延長,多核細胞的胞漿出現大的空泡,并且由于細胞變性而更趨嗜堿性。ILTV 的不同毒株在致病性和抗原性上均有差異,但只有一個血清型,由于不同毒株對雞的致病力差異很大,給該病的控制帶來困難。
目前AILT病毒編碼和病毒蛋白為研究熱點,ILTV 的編碼基因主要分長度特區UL和短獨特區Us兩個部分,目前確定的編碼基因中共有7種,有 VL區的TK、gB和 gc 基因,Us 區的pk、gx、p60 基因及反向序列的 ICP4 基因[12]。非必需基因TK 為該病毒主要的獨立基因;病毒感染性所必需的gB 基因是ILTV主要保護性免疫原,主要影響ILTV吸附和穿入主細胞,同時誘導各種免疫應答。
gB、gC、gD、Gh、gL氨基酸突變影響著細胞嗜性,為目前研究空白[13]。國內外對ALIT病毒保護性抗原的研究主要為TK、gB、gC、gD、GX、gK和gP60[14]。TK主要同時影響病毒毒理和死亡率;gB為病毒感染所必須;gC影響病毒吸附;gD為病毒復制所必需,其編碼的糖蛋白能夠誘導體液、細胞免疫,為主要的保護性抗原[15-17]。上述蛋白進一步研究對基因工程疫苗研究具有深遠意義。
2 ?流行病學
ILTV主要感染雞,不同日齡雞均可感染,但7~10月齡雞更易感染,青年雞群和成年雞群感染后常呈現為急性暴發性,產蛋雞感染后產蛋率急劇下降甚至出現停產現象,雞群恢復后產蛋率也逐漸恢復,1月后產蛋率恢復到最高,可達80%左右,雛雞和其他禽也可感染,但較為少見。AILT呈散發性,為四季病,但由于秋冬季節受氣候條件影響更易發病。AILT 的主要傳染源為病雞、帶毒雞及其污染物,有報道[18]顯示接種活疫苗使雞群可長時間排毒,2%的康復雞也可排毒兩年,病毒通過呼吸道和眼結膜發生直接或間接傳播,至今還未證實ILTV可通過種蛋進行垂直傳播。病原進入機體后在易感雞群氣管和上呼吸道中存活、繁殖,感染后在整個雞群迅速傳播,發病率可達90%以上,死亡率在5%~70%,高產蛋雞死亡率較高,一般雞群病程為2~3周,少數雞群病程可達2~3月之久且有復發風險,西方有報道[19]稱美國和新西蘭等國家發生溫和型AILT,發病率為 5%,死亡率都很低,僅為 0.11%~2%。ILTV基因較穩定,近年來該病并未出現新的流行病學特點。
3 ?癥狀及診斷
ILTV自然感染后潛伏期一般為6~12 d,根據臨床發病率和死亡率的不同該病主要分為喉氣管炎型 (急性型)和眼結膜型(溫和型)兩種。溫和型癥狀較輕,發病率和死亡率也較低,常表現為病雞采食量降低、生長緩慢,產蛋率也降低、病程較長,伴有結膜炎、眶下竇炎、鼻炎及氣管炎等,大部分雞一段時間后耐過,若雞群出現雞群、環境變化等應激因素或繼發其他病原微生物感染時,死亡率明顯增大。急性型病初采食量降低,有半透明狀鼻液,流眼淚并伴有結膜炎,隨后出現咳嗽、呼吸困難(吸氣時頭和頸部向前向上、張口)并伴有濕性啰音、喘鳴音、產蛋量迅速下降,迅速消瘦,雞冠發紫,部分出現拉稀(綠色稀糞),最后多因衰竭在5~10 d內死亡,耐過雞10 d后恢復正常,但可長時間帶毒。嚴重者可出現度呼吸困難,痙攣咳嗽,常咳出帶血的粘液污染喙角、顏面及頭部羽毛等,最快的可于24 h內死亡。
對病死雞剖解可見病變主要集中在上呼吸道,肺臟一般正常,偶爾可出現充血及小區域的炎癥變化,上呼吸道粘膜充血、腫脹、有粘液,部分出現粘膜出血、變性甚至壞死。嚴重者可見氣管變窄,氣管中有含血粘液或血凝塊,炎癥也可波及到支氣管、肺和氣囊等部位,甚至上行至鼻腔和眶下竇。最新研究顯示ILTV也可引起腦、哈德氏腺、腺胃和盲腸的病變[20]。
該病一般根據臨床鑒別即可初步斷定,進一步確診需在實驗室進行。常用的實驗室檢測方法有病理組織學檢查、病毒分離培養、細胞培養、動物接種試驗、瓊脂擴散試驗、病毒中和試驗、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、聚合酶鏈式反應技術 (PCR)等。環介導等溫擴增[21](LAMP)能夠更加精確的檢測ILAV;TaqMan實時PCR[22]特異性較高,能夠有效區分野毒和疫苗毒感染;qPCR[23]能夠有效檢測排泄物和環境中的病毒,上述方法的運用對AILT的凈化提供了必要條件。
4 ?防治措施
對于AILT的防控要遵循“預防為主、防治結合”的原則進行。預防的重點工作為加強飼養管理,注重養殖場生物安全,同時按程序進行免疫接種,提高機體免疫,降低感染風險。目前尚無有效的藥物治療本病,對于本病的治療通常采用中西結合對癥治療,減少并發癥的發生,從而最大限度降低死淘率,減少養殖場經濟損失。
4.1 ?飼養管理 ?為了便于管理,利于做好生物安全,雞場選址應該選在遠離城市、遠離居民區,5 km范圍內沒有其他家禽養殖,水電、交通便利,離主干道1 km以上地勢干燥、排水好且向陽背風的地方;場區生產區、生活區要嚴格分離且生產區與生活區要建立消毒設施,嚴防非生產人員進入雞舍;雞舍內安裝水簾、保暖設備以降低晝夜溫差,減少雞群應激,改善雞舍通風換氣,做好雞舍增濕除塵,定期打掃清糞,降低雞舍氨氣濃度,定期對雞舍進行消毒;降低養殖密度,逐步更換飼料,減少應激;統一雞舍盡量全進全出,空舍期嚴格消毒。
4.2 ?免疫接種 ?近年來,國內外對ILTV的研究已經進入分子層面。早在1960年一代AILT弱毒活疫苗已經應用于市場,實際證明這種疫苗能夠有效降低雞群發病和集體排毒,但有研究表明這種疫苗也會出現毒力返強,引起AILT的爆發,雖然西方一些國家考慮到該疫苗毒力返強被禁止使用,但目前還沒有其他疫苗能替代此疫苗保護效果,因此是世界范圍使用最為廣泛的疫苗。2000年以后出現二代重組活載體AILT疫苗,相對一代疫苗安全性更高,不存在毒力返強的風險,但該疫苗產生免疫力是上呼吸道粘膜免疫不能降低雞群感染率,只能保護雞群不出現典型臨床癥狀,因此沒有廣泛應用。基因缺失疫苗、亞單位疫苗、DNA疫苗已成為目前AILT疫苗研究的熱點[24-25],雖然這些疫苗改善了傳統疫苗的缺點,但研究難度較大,且保護效力亞于傳統一代疫苗,因此此類疫苗需要后續更加深層次的研究。在實際使用一代疫苗過程中,盡量使用點眼的方式,能夠進行精確的粘膜傳遞,且在臨床安全性和效力上表現良好。
4.3 ?中藥治療[26] ?AILT中醫學理論認為,病初風和熱侵襲肺部、熱邪壅肺、肺氣上逆、呼吸不利,隨后發展到氣逆痰壅,熱毒內積、損傷肺絡。治療時應遵循清熱解毒、止咳平喘、消炎鎮痛的主線進行。
2018年延安市某農村散養蛋雞場飼養180日齡蛋雞400羽,確診為AILT,利用下列藥物進行治療[26]:板藍根400 g、知母350 g、 陳皮 300 g、 桔 梗 250 g、射干250 g、枇杷葉250 g、杏仁200 g、黨參200 g、黃連 200 g、 黃柏 200 g、 黃芩200 g、 麻黃 150 g、 半夏 150 g、 甘草150 g,將以上各藥研末,以每只雞每天3次的用量拌入飼料,讓雞自由采食,5~7 d 為一療程,可視病情,隔2~3 d再用一個療程。通過使用該藥方治療取得了明顯效果,治愈率達 95%,但目前藥物還未正式應用于市場。
4.4 ?西藥治療 ?目前AILT尚無有效的特效藥,治療主要以對癥治療為主,臨床上使用廣泛的為飼料中增加維生素和微量元素以提高群體免疫力,使用廣譜的呼吸道抗菌藥予以治療。取5萬~10萬IU鏈霉素,添加適量注射用水,混合均勻后給病雞肌肉注射,每天2次,連續使用3~5 d。如果伴有呼吸困難,也可肌肉注射0.5~1.0 mL 20%樟腦水注射液[27]。
5 ?小結
近年來,AILT對養禽業的危害逐漸增加,這與傳統疫苗毒力返強息息相關,這就迫切需要更加安全有效的ILT疫苗,基因工程疫苗彌補了傳統疫苗的一些缺點,因此分子生物學和基因工程疫苗發展已經被人們重視,但由于基因工程疫苗的研究難度較大,基因工程疫苗真正投入使用的路還很長,需投入大量人力、物力、財力去研究。但深信隨著研究的不斷深入,安全高效的基因工程疫苗的應用勢在必得,從而為AILT的最終凈化,減少發病率、死亡率以及降低經濟損失奠定基礎。
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Abstract:The avian infectious laryngotracheitis is one of the common disease that was infected chicken respiratory and high mortality;its prevalent all over the word and seriously affect the healthy development of aviculture recently.Therefore,prevention and control avian infectious laryngotracheitis purify breeder flock signality for the development of aviculture.This paper reviews etiology, pathogen, epidemic characteristics, symptoms and prevention measures,many aspects about avian infectious laryngotracheitis research progress ect.,in order to provide references for the prevention and control of avian infectious laryngotracheitis.
Key words:Avian infectious laryngotracheitis; research progress; pathogen; epidemiology; prevention measures