聯(lián)合Y-STR家系分型及ITO分析法鑒定祖孫關(guān)系1例

陳潤珍 張蓓蕾

關(guān)鍵詞Y-STR ITO法 祖孫關(guān)系鑒定

日常親權(quán)關(guān)系鑒定中，祖孫關(guān)系鑒定尤其是缺少生母（父）的祖孫關(guān)系鑒定較為復(fù)雜，這類鑒定可以通過檢測性染色體STR基因座分型提供排除信息，并利用ITO法分別計(jì)算祖父-孩子、祖母-孩子之間的祖孫親緣關(guān)系似然率（LR）來提供判定依據(jù)。參照規(guī)范，累積祖孫親緣關(guān)系似然率（LRs）大于10000時可以認(rèn)定兩個體為祖孫關(guān)系或小于0.0001時可以排除兩個體的祖孫關(guān)系，但由于ITO法計(jì)算時缺少一方的遺傳信息。，累積祖孫親緣關(guān)系似然率（LRs）往往數(shù)值較小而達(dá)不到認(rèn)定標(biāo)準(zhǔn)。本文報道1例聯(lián)合利用Y-STR分型與ITO法提供明確結(jié)論的祖孫關(guān)系鑒定。

一、案例資料

（一）簡要案情

鄭某（疑似祖父）與沈某（疑似祖母）為給父母雙亡的小鄭（孩子）上戶口，委托本鑒定中心進(jìn)行祖孫親緣關(guān)系鑒定。采集鄭某、沈某與小鄭3人指尖末梢血各1份，留作鑒定之用。

（二）檢驗(yàn)方法

1.DNA提取。將采集的3份血樣用Chelex-100法分別提取DNA。

2.STR基因座分型檢測。將提取的3份DNA用AGCUEX22、AGCU 21+1（無錫中德美聯(lián)生物技術(shù)有限公司）對39個常染色體STR基因座和性別基因座Amelogenin進(jìn)行復(fù)合PCR擴(kuò)增，將提取的鄭某與小鄭的DNA用Microreader“24YDirect ID System（閱微基因技術(shù)有限公司）對24個Y-STR基因座進(jìn)行復(fù)合PCR擴(kuò)增，并對全部的擴(kuò)增產(chǎn)物用3130xl遺傳分析儀（美國AB公司）進(jìn)行毛細(xì)管電泳，用GeneMapper ID-X進(jìn)行基因型分析。

3.祖孫親緣關(guān)系計(jì)算。利用ITO法分別計(jì)算鄭某-小鄭、沈某-小鄭的祖孫親緣關(guān)系似然率（LR）及其累積祖孫親緣關(guān)系似然率（LRs）。

（三）檢驗(yàn)結(jié)果

1.STR基因座分型檢測結(jié)果。用AGCU EX22、AGCU21+1檢測得到的3人39個常染色體STR基因座和性別基因座Amelogenin分型結(jié)果見表1。由表1可知，小鄭在FGA、D3S4529、D5S2500等3個基因座的等位基因從鄭某與沈某中找不到來源。

用Microreader24Y Direct ID System檢測得到的鄭某與小鄭Y-STR基因座分型結(jié)果見表2。由表2可知，小鄭在DYS393，DYS570，DYS392、y GATA H4，DYS458、DYS635，DYS448、DYS533、DYS456、DYS389 I、DYS390、DYS389 II、DYS438、DYS576、DYS391、DYS439、DYS385ab、DYS643等19個基因座的等位基因從鄭某中找不到來源。

2.祖孫親緣關(guān)系計(jì)算結(jié)果。按文獻(xiàn)的基因頻率，采用ITO法分別計(jì)算鄭某-小鄭、沈某-小鄭共39個常染色體STR基因座的LR及LRs值結(jié)果見表1。由表1可知，最終鄭某.小鄭的LRs值為0.0008，沈某-小鄭的LRs值為20627.9411。

二、討論

根據(jù)孟德爾遺傳規(guī)律，孩子的等位基因分別來源于親生父母雙方，則孩子必然會有1個等位基因來源于其祖父母。觀察鄭某、沈某與小鄭三人39個常染色體STR基因座的分型結(jié)果，發(fā)現(xiàn)小鄭在3個基因座的等位基因從鄭某與沈某中找不到來源，無法得出明確的結(jié)論。則按照雙親皆疑分別判定鄭某-小鄭、沈某-小鄭之間的祖孫親緣關(guān)系。

表1顯示，在檢測21個常染色體STR基因座分型后，沈某-小鄭的LRs值為1576.7075，未達(dá)到判定標(biāo)準(zhǔn)。而增加檢測至39個常染色體STR基因座分型后，沈某.小鄭的LRs值為20627.9411，祖孫親緣關(guān)系概率為0.99995152，達(dá)到判定標(biāo)準(zhǔn)，可以得出明確結(jié)論，支持沈某與小鄭存在祖孫親緣關(guān)系。

由于所有Y-STR基因座均連鎖遺傳，故Y-STR基因座分型可以提供排除信息。利用Y-STR基因座的這一特性，觀察鄭某與小鄭的Y-STR基因座分型結(jié)果，發(fā)現(xiàn)小鄭在19個基因座的等位基因從鄭某中找不到來源，可以排除鄭某與小鄭的祖孫親緣關(guān)系。同時，在增加檢測至39個常染色體STR基因座分型后，鄭某-小鄭的LRs值由0.0512累積變?yōu)?.0008，也可以輔助驗(yàn)證Y-STR基因座的排除結(jié)論。

在本案例中，疑似祖母與孩子一方可以直接通過計(jì)算39個常染色體STR基因座的LRs值得到明確的支持結(jié)論，而疑似祖父與孩子這一方則需要通過增加檢測Y-STR基因座提供排除結(jié)論，LRs值僅作為輔助驗(yàn)證，這提示我們：在鑒定雙親皆疑又缺少生母（父）參與的祖孫親緣關(guān)系時，需要根據(jù)案例情況，在常染色體STR基因座的基礎(chǔ)上增加檢測性染色體STR基因座補(bǔ)充驗(yàn)證;在利用ITO法計(jì)算LRs值時，不一定能得到明確結(jié)論，但仍需要增加檢測常染色體STR基因座的數(shù)量，提高結(jié)論的準(zhǔn)確性。