河南商丘地區豬偽狂犬病野毒感染和免疫情況調查

喬 波

（商丘市動物疫病預防控制中心，河南商丘 476000）

偽狂犬是由偽狂犬病毒（Psudorabies Virus，PRV）引起的一種急性、多種動物共患的、高度接觸性傳染病[1]。豬是PRV的傳染源和自然宿主，豬感染PRV后引起發熱、母豬流產、仔豬神經癥狀、高死亡率，中大豬呼吸道癥狀等臨床表現[2]。我國將豬偽狂犬病列為二類動物傳染病，該病在我國廣泛存在，給我國養豬業造成了巨大經濟損失[3]。我國廣泛使用的Bartha株基因缺失疫苗為gE基因缺失，對經典的PRV免疫保護效果較好，但隨著2011年后PRV強毒株出現，免疫保護效果明顯下降[4]。根據病毒基因遺傳進化分析，PRV野毒株屬于基因Ⅱ型，而Bartha株屬于基因I型，所以如果疫苗中病毒效價沒有足夠高，就會因免疫交叉保護不足而失去保護效果[5]。

為了解河南商丘地區PRV野毒株感染情況和免疫情況，采集養殖場、屠宰企業和無害化處理廠樣品，檢測PRV野毒感染情況和免疫抗體水平，為本地區豬偽狂犬病的防控提供依據。

1 材料與方法

1.1 血清和組織樣品

樣品來自商丘地區部分規模養豬場、生豬屠宰企業和無害化處理廠，共23家養豬場，17家生豬屠宰企業和3家無害化處理廠。樣品分為兩部分：第一部分為養豬場生豬和生豬屠宰企業調運的待宰生豬血液樣品，分離得到血清1518份。第二部分為生豬屠宰企業生豬和無害化處理廠病死豬組織樣品：采集肺臟、扁桃體、淋巴結、脾臟和肝臟等內臟組織冷凍保存，研磨后取上清，共520份。采樣時間為2020年上半年，具體采樣情況見表1。

表1 樣品采集情況

1.2 血清學檢測方法

PRV野毒株抗體檢測使用gE 抗體鑒別診斷ELISA試劑盒，免疫抗體檢測使用gB-ELISA檢測試劑盒，試劑盒購自洛陽萊普生信息科技有限公司，具體操作按照試劑盒說明書。

1.3 病原學檢測方法

組織樣品檢測使用PRV（gE基因）實時熒光PCR檢測試劑盒，購自北京世紀元亨動物防疫技術有限公司。

2 檢測結果與分析

2.1 PRV gE抗體檢測結果

共檢測血清樣品1518份，其中9個種豬場和17個規模免疫豬場均免疫Bartha株疫苗。結果顯示：9個種豬場中有3個PRVgE抗體陽性，場點陽性率33.33%；17個免疫豬場中7個gE抗體陽性，場點陽性率41.18%；9個未免疫豬場中有5個gE抗體陽性，場點陽性率55.56%；17個生豬屠宰企業的17個批次待宰生豬中11批次gE抗體陽性，陽性率64.71%。種豬場的237份樣品中有77個gE抗體陽性，陽性率32.49%；免疫豬場的505份樣品中有112個gE抗體陽性，陽性率22.18%；未免疫場的266份樣品中有61個gE抗體陽性，陽性率22.93%；調運的待宰生豬510頭有183個gE抗體陽性，陽性率35.88%。本地生豬1008份血清中gE抗體陽性250份，總體陽性率24.80%，結果見表2。

表2 PRV gE-ELISA檢測結果

2.2 免疫場PRV gB-ELISA檢測結果

17個免疫豬場的505份血清使用gB-ELISA和gE-ELISA檢測。結果，在17個免疫場中gB抗體陽性17個，場點陽性率100%，其中328份血清陽性，免疫抗體陽性率66.93%。與gE抗體檢測對比結果如表3。

表3 免疫豬場gE-EILISA和gB-ELISA檢測結果

2.3 組織樣品檢測結果

組織樣品520份，采用熒光PCR方法檢測，結果3份PRVgE基因陽性，分別為2份屠宰企業樣品和1份無害化處理廠樣品。結果如圖1。

圖1 組織樣品熒光PCR檢測擴增曲線

3 討論

通過此次調查商丘地區當前部分規模養豬場的PRV-gE抗體場點陽性率42.86%，低于屠宰企業調運生豬的66.67%。豬偽狂犬病在本地規模養豬場中已經得到高度重視，規模場普遍接種了疫苗，但免疫豬場個體免疫合格率不高，分析原因可能是隱性帶毒豬免疫效果不佳，或者豬場感染變異株影響免疫效果，也可能是免疫程序不合理。熒光PCR檢測結果顯示，周邊地區和本地豬群中已存在野毒株感染，陽性率較低可能是由于隱性感染和取樣部位病毒含量較低。

防控豬偽狂犬病最根本的措施是實施病源凈化，即“淘汰清群”方案，有條件的豬場可采用。對于大多數陽性豬場，可通過強化免疫，淘汰陽性種豬，培育或引進陰性后備母豬群，逐步實現凈化。從檢測結果看，商丘地區仍需要采取積極地防控措施，有針對性的制定免疫程序，逐步實現場點凈化和區域凈化。