制備冷沉淀凝血因子的新鮮冰凍血漿的質量優化

張福　涂源泉　陳均　杜霞

【摘 要】目的：對比全血采集后于不同儲存時間內完成制備的新鮮冰凍血漿中纖維蛋白原（FIB）以及Ⅷ因子（FⅧ）的變化，探索制備新鮮冰凍血漿的最佳條件。方法：從采血起算，選取60例于4℃條件儲存并分別于6～8h、8～10h、10～12h、12～14h、14～16h、16～18h內完成制備的新鮮冰凍血漿，檢測其FIB、FⅧ水平。結果：4℃條件下，儲存時間延長，血漿中FIB、FⅧ水平不斷降低，FⅧ下降在12～14h變化開始明顯（P<0.05），FIB在14～16h開始發生顯著變化（P<0.05）。結論：4℃條件下儲存時間在12h內完成制備的新鮮冰凍血漿中FIB、FⅧ水平更高，適合制備冷沉淀凝血因子。

【關鍵詞】冷沉淀凝血因子;新鮮冰凍血漿;質量優化

【中圖分類號】R446.11 【文獻標識碼】A 【文章編號】2095-6851（2020）10--02

冷沉淀凝血因子，是通過特殊方式，將新鮮血漿（在保存期中）融化（溫度為1～6℃），促使大多數血漿得以分離，并將其他未能溶解的物質，通過速凍，在1h中形成固態成分血，其能夠治療由于缺乏纖維蛋白原以及Ⅷ因子而導致的出血不止以及血友病。冷沉淀凝血因子主要適用于兒童以及成人輕型甲型血友病、血管性血友病等。冷沉淀凝血因子制備過程復雜，其影響因素較多，為優化冷沉淀凝血因子質量，需對影響血漿不穩定性凝血因子活性的因素進行分析[1]。本研究就制備冷沉淀凝血因子的新鮮冰凍血漿的質量優化做出如下研究，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究按照GB18469-2012要求采集全血樣本。采集時長：400ml不超過13分鐘。采集血液后4000r/min 離心處理6分鐘，分離血漿至轉移袋，離心溫度與實驗組儲存溫度相同，血液保存液為CPDA。

1.2 儀器與試劑

本次研究中采用的儀器主要包括：低溫KJX-IA型冰凍血漿解凍箱、美國儀器實驗室公司（Instrumentation Laboratory）ACL ELITE全自動凝血分析儀。試劑：美國儀器實驗室公司（Instrumentation Laboratory）因子Ⅷ缺乏血漿測定試劑盒（凝固法）、活化部分凝血活酶時間測定試劑盒（凝固法）、纖維蛋白原測定試劑盒（凝固法）、正常值血凝試劑質控品、校準品、凝血分析用稀釋液、清洗液。

1.3 方法

隨機留取全血采集后于4℃條件儲存并分別于6～8h、8～10h、10～12h、12～14h、14～16h、16～18h內完成制備的新鮮冰凍血漿各10份，分為6組，分別測量FIB、FⅧ水平。

1.4 統計學分析

采用SPSS 21.0分析，計量資料t檢驗，計數資料 檢驗，P<0.05為顯著性差異。

2 結果

4℃條件下，隨儲存時間延長，血漿FIB、FⅧ水平不斷降低，FⅧ下降在12～14h開始發生顯著變化（t=1.713，P=0.045），FIB在14～16h開始發生顯著變化（t=1.745，P=0.042）。見表1。

3 討論

冷沉淀凝血因子技術在幾年來得到了廣泛應用，且冷沉淀凝血因子近年來在臨床中應用不斷增多，其制備工作也得到人們的普遍重視，制備量呈現逐年上升的趨勢。新鮮冰凍血漿，指的是在采集值周，于冷藏環境中儲存，屬于全血狀態，在臨床中，最好能夠在6～8h之內，最長在18h之內，對血漿進行分離，獲取速凍固態成分血。在實施冷沉淀凝血因子的制作之前，需進行全血分離，其有效成分內，FⅧ含量容易波動，極易受到保存溫度、保存時間等因素的影響。因此，需對上述因素進行分析，選擇出更適合制備冷這一物質最適宜的時間以及溫度[2-3]。本研究結果指出，4℃條件下，儲存時間延長，血漿FIB、FⅧ水平不斷降低，FⅧ下降在12～14h開始發生顯著變化，FIB在14～16h開始發生顯著變化，這提示不同儲存時間下血漿FIB、FⅧ水平不一，需選取合適時間以及溫度制備冷沉淀凝血因子。

綜上所述，全血采集后于4℃條件儲存，12h內完成制備的新鮮冰凍血漿中FIB、FⅧ水平更高，適合制備冷沉淀凝血因子。

參考文獻

羅紅敏.對于有出血性休克風險的創傷患者可進行院前血漿輸注：一項多中心3期臨床試驗[J].中華危重病急救醫學，2018，30（9）：823-823.

陳國成，尹寧北，李海東.自體富血小板血漿在齒槽嵴裂修復中的應用[J].中華整形外科雜志，2019，35（7）：706-709.

黃雪原，吳斌，董航，等.英國非大量出血患者新鮮冰凍血漿和冷沉淀輸注指南的推薦意見及其啟示[J].中國輸血雜志，2018，031（008）：913-922.