中藥血清藥理學(xué)及血清藥物化學(xué)研究進(jìn)展

代啟良

【摘 要】本文重點(diǎn)整理和分析了最近幾年中藥血清藥理學(xué)和血清藥物化學(xué)研究情況，不僅涵蓋了藥物血清的制備和藥物血清與療效的關(guān)系，而且還包括血清藥物化學(xué)在提高中藥質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)中價(jià)值作用。同時(shí)，還歸納出血清藥物化學(xué)和血清藥理學(xué)在體外藥效研究中優(yōu)缺點(diǎn)，大膽提出了中藥血清指紋圖譜同微透析取樣技術(shù)的聯(lián)合使用，從而有效促進(jìn)中藥血清藥理學(xué)和血清藥物化學(xué)的蓬勃發(fā)展。

【關(guān)鍵詞】中藥;血清藥理學(xué);血清藥物化學(xué)

【中圖分類號】R285.6 【文獻(xiàn)識別碼】A【文章編號】1002-8714（2020）04-0288-01

1 血清藥理學(xué)與血清藥理學(xué)研究方法的提出

日本著名藥理學(xué)家田代真一在20世紀(jì)80年代，第一次提出了血清藥理學(xué)。田代真一認(rèn)為中藥經(jīng)口服吸收后，需要借助體內(nèi)胃腸道菌群的代謝和排泄才能充分發(fā)揮重要治療效果。因此，中藥和其他復(fù)方中存在的生物活性成分都屬于中藥經(jīng)過人體生物轉(zhuǎn)化后的產(chǎn)物。當(dāng)這些產(chǎn)物被人體吸收進(jìn)入血液以后，將與血漿蛋白結(jié)合，順著血液流向靶器官和組織。所以，傳統(tǒng)的體外藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，一旦直接將中藥水提液直接加入細(xì)胞反應(yīng)體系和離體組織中，其藥物生物活性和血清化學(xué)成分遠(yuǎn)不如靜脈給藥或整體口服藥物療效。

2 血清藥理學(xué)研究

2.1選擇含藥血清供體動(dòng)物

為了取得可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果，避免和降低動(dòng)物血清與人類血清在生物、理化等方面的不同，專家學(xué)者們需要選擇與人類生物學(xué)特性非常接近的動(dòng)物制備含藥血清，從而更加真實(shí)地模擬人體內(nèi)部環(huán)境。現(xiàn)階段，家兔和大鼠是常見的實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物。在探索菝葜抗炎活性部位時(shí)，謝長等人發(fā)現(xiàn)健康動(dòng)物是不能有效詮釋病理狀態(tài)下藥物入血活性成分和活性成分代謝過程。相關(guān)研究人員需要結(jié)合藥效試驗(yàn)結(jié)果來進(jìn)一步確定選擇模型動(dòng)物還是健康動(dòng)物。

2.2合理設(shè)計(jì)給藥方案

現(xiàn)代方式是在原處方用量基礎(chǔ)上，增加3-20倍，根據(jù)目標(biāo)成分，對患者連續(xù)給藥5-7個(gè)半衰期。或者按照藥物主要成分的“平均穩(wěn)態(tài)濃度”來科學(xué)規(guī)劃給藥時(shí)間。還需要按照“給藥劑量=臨床常用量×培養(yǎng)基內(nèi)的稀釋度×動(dòng)物等效劑量系數(shù)”方法進(jìn)行相應(yīng)計(jì)算，或者按照臨床日常用藥劑量的5、10、30倍等進(jìn)行給藥，然而此方法不適合那些劑量大、藥味多的復(fù)方藥。根據(jù)新藥藥理研究技術(shù)要求，對給藥劑量進(jìn)行了合理設(shè)計(jì)，即將含藥血清制成凍干粉，再讓實(shí)驗(yàn)動(dòng)物服下，經(jīng)過反復(fù)實(shí)驗(yàn)，專家學(xué)者發(fā)現(xiàn)，此方法不僅方便保存，而且還有效提高了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液藥物濃度，從而達(dá)到動(dòng)物血清中所需的藥物濃度。現(xiàn)階段，醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)中提出給藥方案多種多樣，比如7～10d給藥法、2次給藥法以及3次給藥法等。因中藥復(fù)方成分極其復(fù)雜，難以有效測定不同成分給藥后半衰期，目前各文獻(xiàn)給出的報(bào)道有所差異，但其最終目的是最大限度地使采血時(shí)間處于血液濃度最大峰值。

2.3采集血液

由于中藥成分極其復(fù)雜，不同藥物成分達(dá)峰時(shí)間存在差異，因此，難以形成統(tǒng)一的采血時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)。眾所周知，在血液濃度達(dá)到高峰期時(shí)，采血最佳，這樣可以防止因有效物質(zhì)沒有被吸收或完全代謝而產(chǎn)生假陰性結(jié)果。李儀奎等學(xué)者在分析大量重要藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)時(shí)，提出一種流行的給藥方式即連續(xù)服藥3天，一天兩次，最后一次服藥1小時(shí)之后進(jìn)行采血。通常情況下，采血時(shí)間大都集中在末次用藥后的半小時(shí)到3小時(shí)之間，但由于中藥成分非常復(fù)雜，含藥血清隨著時(shí)間推移，轉(zhuǎn)變成藥物代謝血清，與此同時(shí)，血液中可能存在一部分藥物成分沒有或者超過血藥峰濃度。總之，既要考慮中藥吸收轉(zhuǎn)化特點(diǎn)，又要考慮實(shí)驗(yàn)動(dòng)物消化生理特點(diǎn)，來選定取血時(shí)間范圍。通過查閱大量《血清藥理學(xué)》論著發(fā)現(xiàn)，很多論著內(nèi)容實(shí)際上關(guān)于《血漿藥理學(xué)》的;其中還有一小部分學(xué)者提出《血漿藥理學(xué)》療效超出《血清藥理學(xué)》。

2.4處理血液樣品

因血清樣品濃度偏低，且內(nèi)源性雜質(zhì)繁多，樣品量具有一定局限性，通常研究人員將血清進(jìn)行分離、純化及富集后再進(jìn)行測定。現(xiàn)階段，有機(jī)溶劑萃取法、熱水浴法、固相萃取法和超濾法都是常見的處理方法，其目的是盡可能地富集移行成分和消除干擾成分。通過仔細(xì)對比，從中篩選出最優(yōu)的血清處理方法。

2.5正在制備含藥血清時(shí)，運(yùn)用正交試驗(yàn)法

竇志華等人用動(dòng)物做了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步研究了取血時(shí)間、用藥間隔時(shí)間以及血液提出成分等，參照丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶漏出量、含藥血清對肝損傷細(xì)胞增殖、以及含藥血清中五味子乙素含量為標(biāo)準(zhǔn)，采用正交試驗(yàn)對含藥血清的制備方法、化學(xué)指標(biāo)及加權(quán)評分進(jìn)行研究。

3 血清藥物化學(xué)研究

血清樣品分析方法各式各樣，其中最常用的有氣相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜法、薄層色譜法、以及原子吸收光譜法等，常用于測定中藥及其復(fù)方提取物的指標(biāo)性成分。之后，在相同條件下，依次測定含藥血清、對照組、以及空白血清的指紋圖譜，并對空白血清組、中藥組以及含藥血清組的指紋圖譜進(jìn)行系統(tǒng)分析比較，同時(shí)，運(yùn)用相對完善成熟的分析技術(shù)，如HPLC-DAD-MS/MS等，同時(shí)歸屬和結(jié)構(gòu)解析含藥血清中移行成分，進(jìn)一步鑒定部分成分。然而因中藥進(jìn)入人體以后，其化學(xué)成分的吸收部位、理性性質(zhì)以及吸收效率等都表現(xiàn)出很大不同，所以，人體用藥之后，血清藥物成分不是一成不變的，會(huì)隨著時(shí)間推移發(fā)生相應(yīng)的組分變化。所以，必須綜合分析不同時(shí)間采血點(diǎn)的血清指紋圖譜，準(zhǔn)確找到整個(gè)入血成分譜隨時(shí)間的變化情況，構(gòu)建血清藥物化學(xué)動(dòng)態(tài)圖譜，這樣可以直觀地展示中藥化學(xué)成分群在體內(nèi)動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，同時(shí)挖掘藥物原型成分之間的相關(guān)性。此外，在分析技術(shù)不斷進(jìn)步發(fā)展下，研究人員更加頻繁地運(yùn)用超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，從而實(shí)現(xiàn)在線分離和鑒定生物體內(nèi)微量中藥成分，同時(shí)聯(lián)合使用質(zhì)譜數(shù)據(jù)處理方法，血清活性成分的快速準(zhǔn)確測定。中藥指紋圖譜適用于復(fù)雜化學(xué)成分的整體穩(wěn)定性分析。它是國內(nèi)外公認(rèn)的質(zhì)量評價(jià)模型，也是中藥血清藥物化學(xué)研究的主要方法。過去，在同一項(xiàng)研究中，只有一種動(dòng)物血清含有一種藥物來鑒定血液成分。指紋圖譜共有峰可以消除個(gè)體差異，造成藥物治療過程存在不同。因此，這13個(gè)峰被鑒定為共有指紋峰。通過比較血清色譜圖和體外制備的對照品色譜圖，測定三組分的含量。

結(jié)束語

綜上所述，專家學(xué)者只有合理運(yùn)用交叉學(xué)科研究成功和先進(jìn)技術(shù)，才能不斷健全和完善中藥血清藥理學(xué)和血清藥物化學(xué)，使其得到廣泛應(yīng)用，促進(jìn)中醫(yī)藥向著現(xiàn)代化方向蓬勃發(fā)展。

參考文獻(xiàn)

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