宮頸脫落細胞中高危型人乳頭瘤病毒、k-ras、c-myc基因表達與宮頸上皮內瘤變病變程度的相關性分析

李鴻雁

河南省林州市婦幼保健院檢驗科 456550

宮頸上皮內瘤變(CIN)是宮頸浸潤癌相關癌前病變的統稱，主要由人乳頭瘤病毒(HPV)感染引發[1]。根據病變程度的不同，臨床上可將CIN分為1～3級，不同分級的CIN其進展的可能性與治療方式存在較大差異，故及時明確CIN患者的病變程度對指導后續治療、評估患者預后具有重要作用[2-3]。基于此，本文分析宮頸脫落細胞中高危型HPV-DNA、k-ras mRNA與c-myc mRNA的表達水平同CIN病變程度的關系。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2016年10月—2019年3月于本院接受診治的CIN患者的臨床資料，所有患者均經病理學檢查確診，篩選CIN1級、CIN2級、CIN3級患者各30例納入分析對象，分別記為A組、B組、C組。另選本院的健康體檢女性30例作為對照組。A組年齡35～60歲，平均年齡(47.56±10.12)歲；已婚18例，未婚12例。B組年齡37～61歲，平均年齡(46.76±10.03)歲；已婚20例，未婚10例。C組年齡35～62歲，平均年齡(47.22±10.40)歲；已婚18例，未婚12例。對照組年齡36～60歲，平均年齡(46.38±10.29)歲；已婚21例，未婚9例。四組年齡、婚姻狀況相比，差異無統計學意義(P>0.05)，有可比性。

1.2 方法 (1)應用DNA抽提試劑盒(北京全式金公司)從宮頸脫落細胞中抽提高危型HPV-DNA，采用實時熒光定量核酸擴增檢測系統(北京卓信博澳儀器有限公司)檢測高危型HPV-DNA的表達水平。(2)應用RNA抽提試劑盒(美國Invitrogen公司)對宮頸脫落細胞進行總RNA抽提，采用定量逆轉錄聚合酶鏈反應檢測k-ras mRNA、c-myc mRNA的表達水平。

1.3 評價指標 對比四組高危型HPV-DNA、k-ras mRNA、c-myc mRNA的表達水平，分析三者表達水平與CIN病變程度的關系。

2 結果

2.1 三項指標表達水平對比 C組高危型HPV-DNA、k-ras mRNA、c-myc mRNA的表達水平最高，而后依次為B組、A組、對照組，各組間比較，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 四組的三項指標表達水平對比

2.2 三項指標的相關性檢驗結果 雙變量Pearson相關性檢驗結果顯示，HPV-DNA表達與k-ras mRNA、c-myc mRNA的表達均呈正相關(r>0，P<0.05)。見表2。

表2 三項指標的相關性檢驗結果[r(P)]

2.3 線性回歸分析結果 將CIN病變程度作為因變量，高危型HPV-DNA、k-ras mRNA、c-myc mRNA的表達水平作為自變量，得到線性回歸方程：Y=0.713+1.509X1+0.042X2-1.333X3。結果顯示，三項指標的表達水平均對CIN病變程度有影響(P<0.05)。見表3。

表3 三項指標的表達水平與CIN病變程度關系的線性回歸檢驗結果

3 討論

CIN是一組與宮頸浸潤癌關聯密切的癌前病變，可反映宮頸癌發生發展的過程。CIN的發展有2種結局，低級別的CIN(CIN1)大部分會自然消退，而高級別的CIN(CIN2、CIN3)則有癌變潛能，大概率會進展為宮頸浸潤癌[4-5]。而在CIN早期階段即明確病情并盡快治療，對防治宮頸浸潤癌、改善患者預后具有重要作用。

相關調查研究顯示，高危型HPV感染、性生活過早、性傳播疾病、癌基因改變等因素會影響CIN的發生發展[6-8]。HPV屬嗜上皮細胞病毒，是主要性傳播病毒之一[9]。目前，臨床上已鑒定出100余種的HPV亞型感染，其中，高危型HPV如HPV16、HPV18等與宮頸浸潤癌及CIN具有密切關系[10-12]。本文結果中，C組的高危型HPV-DNA表達水平最高，而后依次為B組、A組、對照組；線性回歸分析顯示，高危型HPV-DNA表達水平會影響CIN病變程度。由此可見，HPV-DNA表達水平愈高則CIN病變程度愈高。相關研究認為，CIN的發生發展還是一個涉及多基因改變的復雜過程，其中，k-ras的高表達會一定程度上促進HPV所誘導的上皮細胞轉變，進而加快CIN的發生發展；高危型HPV蛋白E7的高表達可導致c-myc的蛋白活性提升，此類改變的組織學表現主要為細胞不典型增生與異常增生[13-15]。本文結果中，C組k-ras與c-myc的mRNA表達水平最高，而后依次為B組、A組、對照組；相關性分析顯示，高危型HPV-DNA表達與k-ras mRNA、c-myc mRNA的表達呈正相關；線性回歸分析顯示，k-ras mRNA、c-myc mRNA的表達水平均會影響CIN病變程度。由此可見，高危型HPV-DNA表達水平增高可引起k-ras mRNA、c-myc mRNA的高表達，進而加重CIN病情。

綜上所述，高危型HPV的高表達可引起k-ras與c-myc的高表達，這可能是CIN發生發展的一項重要機制。