申恒然
(河南省許昌市畜牧技術推廣站,河南許昌 461000)
目前,在動物養殖過程中由于抗生素濫用,不僅導致動物免疫功能缺損,細菌產生嚴重的耐藥性,同時還危害人類的健康,抗生素的殘留問題已經成為公共衛生問題。因此,研發替代抗生素的新型制劑成為新的研究方向(張召興,2018)。中草藥是我國天然的藥用植物,具有毒副作用小、無耐藥性和殘留等特點,并具有提高機體免疫力,促進生長發育等多種作用,被廣泛應用于畜禽養殖中(李欣,2019;韓戰強,2019)。相關研究表明,中草藥的有效成分多存在于細胞的胞漿中,其結構致密,導致中草藥的有效活性成分利用較低,利用現代的超微粉技術將中草藥的成分有效的釋放,彌補了傳統中草藥的不足,提高了中草藥在動物的體內的利用率(李蘊玉,2019;徐春華,2017)。國內關于中草藥超微粉在羊養殖中的應用較少。本試驗在試驗肉羊的基礎日糧中添加不同水平的復方中草藥超微粉,旨在研究其對肉羊生長性能、養分表觀消化率及免疫機能的影響,為進一步復方中草藥超微粉在臨床的應用提供研究基礎。
1.1 試驗材料 復方中草藥超微粉主要包括黃芪、黨參、刺五加、茯苓、金銀花,按照 3:3:2:2:1的比例混合,先用普通的粉碎機粉碎,再用超微粉碎機粉碎,由本單位實驗室提供;細胞因子IL-2、IL-6 ELISA Kit,免疫球蛋白 IgG、IgM、IgA ELISA Kit均購自上海允麥生物科技有限公司;全自動營養成分分析儀由德國Eppendorf公司生產。
1.2 飼糧配比 杜寒雜交肉羊的精料配比參照NRC(2004)推薦的中國肉羊飼養標準,飼糧組成及營養水平見表1,精料制成顆粒飼料(直徑為6 mm,長度為 10 mm)。
1.3 試驗設計與管理 采用單因素設計試驗,選擇體重為(25±2.2)kg健康杜寒雜交肉羊80只(由本市杜寒雜交肉規?;B殖場提供),隨機分成4個組,每組20個重復,每個重復1只,1組為空白對照組飼喂基礎日糧,試驗2、3、4組分別在基礎日糧中添加2.0%、4.0%、8.0%的復方中草藥超微粉,試驗期為60 d。每個重復單獨圈舍飼養,精粗比混合飼喂,自由飲水,定期疫苗防疫和驅蟲。

表1 日糧組成及營養水平(干物質基礎)%
1.4 指標測定及方法
1.4.1 生長性能測定 在試驗期間,記錄每一只試驗肉羊試驗開始的體重和試驗結束的體重,每天稱取每個重復單獨圈舍飼養的投料量和剩料。試驗結束測定平均日增重、平均日采食量、料重比。
1.4.2 養分表觀消化率測定 試驗結束前5 d,采集每個重復組新鮮的糞便,混勻用硫酸固氮。參考文獻中何韻秋(2019)等報道的方法,測定糞便中粗蛋白質、粗脂肪、粗灰分、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、鈣、磷含量,計算養分表觀消化率。
1.4.3 免疫指標測定 各個試驗組,在試驗結束后,每個組隨機抽取10只試驗杜寒雜交肉羊,用一次性靜脈采血針和促凝真空采血管頸靜脈采血4 mL,離心分離血清。采用ELISA方法檢測細胞因子(IL-2、IL-6)及免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)等免疫指標。
1.5 試驗數據分析 試驗結果以 “平均值±標準差”表示,采用SPSS 19.0軟件進行單因素方差分析,以P<0.05表示差異顯著。
2.1 復方中草藥超微粉對肉羊生長性能的影響由表2可知,試驗2組平均日增重高于1組,差異不顯著(P>0.05),試驗3、4組的平均日增重較1組相比分別提高9.1%、8.7%,差異性顯著 (P<0.05),試驗 2、3、4 組之間相比,差異性不顯著 (P>0.05);試驗 2、3、4 組平均采食量均高于 1 組,但是差異性不顯著(P>0.05);試驗2組的料重比低于1 組,差異不顯著(P>0.05),試驗 3、4 組料重比較1組相比分別降低10.6%、7.0%(P<0.05),試驗2、3、4組之間相比,差異性不顯著(P>0.05)。

表2 復方中草藥超微粉對肉羊生長性能的檢測結果
2.2 復方中草藥超微粉對肉羊養分表觀消化率的影響 由表3可知,試驗2組的粗蛋白質、粗灰分表觀消化率均高于1組,但是差異性不顯著 (P>0.05),試驗3、4組的粗蛋白質、粗灰分表觀消化率較1組相比分別提高13.8%、13.6%、13.7%、10.4%(P < 0.05),試驗 2、3、4 組之間相比,差異性不顯著(P>0.05); 試驗 2、3、4組的粗脂肪、 中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、鈣、磷表觀消化率均高于1組,但未達到差異性顯著的水平(P>0.05)。

表3 復方中草藥超微粉對肉羊養分表觀消化率的檢測結果%
2.3 復方中草藥超微粉對肉羊免疫機能的影響由表4可知,試驗2組血清中IgG、IgA、IL-2的含量均高于1組,但差異性不顯著(P>0.05),試驗3、4組血清中 IgG、IgA、IL-2的含量較 1組相比分別提高 11.0%、10.3%、10.1%、8.6%、23.5%、21.2%(P < 0.05),試驗 2、3、4 組之間相比,差異性不顯著 (P>0.05)。 試驗 2、3、4 組血清中的IgM、IL-6含量均高于1組,但是未達到差異性顯著的水平(P>0.05)。

表4 復方中草藥超微粉對肉羊免疫機能的檢測結果ng/mL
相關研究表明,中草藥超微粉可以提高動物生長性能,被廣泛應用于畜禽的健康養殖中。李蘊玉(2019)等報道,中草藥超微粉可以提高雛雞的生長性能。徐春華(2017)研究表明,不同水平的中草藥超微粉可以提高仔豬的生長性能。本試驗研究表明,試驗3、4組的平均日增重較1組相比分別提高 9.1%、8.7% (P<0.05),試驗3、4組料重比較1組相比分別降低10.6%、7.0%(P<0.05),試驗2、3、4組平均采食量均高于 1組 (P>0.05),說明不同水平的中草藥超微粉可以提高肉羊的生長性能,以4.0%添加較為適宜??赡苡捎趶头街胁菟幫ㄟ^超微粉碎后,將中草藥中的有效成分更好的釋放,提高了中草藥中的有效成分利用率,促進飼料中營養物質消化與吸收,提高飼料利用率,增強抗病能力,從而提高肉羊的生長性能。
干物質中養分表觀消化率是評價飼料中營養物質消化利用率的主要標準之一,當飼料中纖維的含量過高時,可影響其他營養物質的消化與吸收(周雄,2015)。本試驗結果顯示,試驗3、4組的粗蛋白質、粗灰分表觀消化率較1組相比分別提高13.8%、13.6%、13.7%、10.4% (P<0.05),試驗 2、3、4 組的粗脂肪、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、鈣、磷表觀消化率均高于1組(P>0.05)。說明不同水平的復方中草藥超微粉對肉羊飼料中營養物質的消化吸收沒有明顯影響,可以提高肉羊養分表觀消化率。其作用機理有待進一步研究。
免疫球蛋白主要包括IgG、IgM、IgA等,在動物機體體液免疫過程中,尤其在抗感染免疫中起重要的作用,血清中免疫球蛋白含量是評價免疫機能的重要指標之一(張召興,2017)。相關研究表明細胞因子IL-2是介導細胞免疫主要細胞因子,在免疫過程中具有重要作用,細胞因子IL-6主要參與機體的體液免疫和細胞免疫,是免疫系統中重要的細胞因子(劉明生,2018)。因此,血清中細胞因子IL-2、IL-6含量的高低直接影響其免疫機能。本試驗研究表明,試驗3、4組血清中IgG、IgA、IL-2的含量較 1組相比分別提高 11.0%、10.3%、10.1%、8.6%、23.5%、21.2%(P < 0.05),試驗 2、3、4組血清中的 IgM、IL-6含量均高于1組 (P>0.05)。說明不同水平的中草藥超微粉可以提高肉羊血清中細胞因子和免疫球蛋白的含量,因而提高其免疫機能。可能由于復方中草藥超微粉中所含的活性物質可以促進動物體內抗體合成及細胞因子分泌,提高其細胞免疫和體液免疫水平,從而增強機體免疫功能。
本試驗條件下,不同水平的復方中草藥超微粉可以提高杜寒雜交肉羊的生長性能、養分表觀消化率及免疫機能,添加量以基礎日糧的4.0%較為適宜。