自身免疫性肝炎患者血清趨化因子和GP73水平變化及其臨床意義研究

凌 晶，張友健，宋雄峰

自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis，AIH)是臨床常見的一種肝臟疾病，主要因自身免疫攻擊引起，該病可發展為肝衰竭或肝硬化，嚴重影響患者身體健康和生活質量[1]。目前，對AIH的發病機制尚不清楚，多數學者[2，3]認為AIH患者血清趨化因子C-C-基元受體6和20(chemokine C-C-receptor 6、20，CCR6、CCL20)、血清趨化因子配體10(chemmokine C-C-ligand 10，CXCL10)和血清高爾基體糖蛋白73(Golgi glycoprotein 73，GP73)水平發生了改變。CCR6、CCL20和CXCL10在多種自身免疫性疾病中發揮了促炎作用[4，5]。血清GP73在正常肝組織主要表達于膽管上皮細胞，而肝細胞很少表達或不表達。本研究檢測了AIH患者血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平，并分析了其臨床意義，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2018年3月～2019年3月我院就診的AIH患者46例，男性9例，女性37例；年齡為43～69歲，平均年齡為(55.75±5.01)歲；病程3個月～2年，平均病程為(13.57±5.21)個月；體質指數(body mass index，BMI)為21～24 kg/m2，平均為(22.66±0.51)kg/m2。符合《自身免疫性肝炎診斷和治療共識(2015年)》[6]的標準。排除標準：藥物性肝損傷、病毒性肝炎、酒精性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、代謝性肝病、血吸蟲病性肝病、近期有使用抗生素或免疫抑制劑治療、患有腫瘤、伴有嚴重的感染、具有嚴重的過敏史、精神嚴重障礙或哺乳期和妊娠期婦女。另選同期健康人46例作為對照組，男8例，女38例；年齡44～66歲，平均年齡為(55.25±5.31)歲；BMI為19～24 kg/m2，平均為(22.77±0.61)kg/m2。兩組性別、年齡和BMI比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。患者及其家屬簽署知情同意書，本研究經我院醫學倫理委員會審核同意。

1.2 肝活檢 常規行肝活檢。根據肝組織病理學檢查結果，將肝組織炎癥活動度分為G1～4級，病情程度分為輕度、中度和重度。輕度自身免疫性肝炎表現為G1～2，主要病理學表現為肝細胞變性，點、灶狀壞死或凋亡小體，有或無局限性碎屑樣壞死，匯管區有炎癥細胞浸潤，小葉結構完整；中度自身免疫性肝炎表現為G3級，主要病理學表現為匯管區炎癥明顯，伴中度碎屑樣壞死，小葉內炎癥嚴重，伴融合性壞死或伴少數橋接壞死，纖維間隔形成，小葉結構大部分保存；重度自身免疫性肝炎表現為G4級，病理學主要表現為匯管區炎癥嚴重或伴重度碎屑樣壞死，橋接壞死累及多數小葉，大量纖維間隔形成，小葉結構紊亂，或形成早期肝硬化[7]。

1.3 血清學檢測 采用ELISA法測定血清GP73水平(北京熱景生物技術股份有限公司)和血清CCR6、CCL20、CXCL10水平(上海江萊生物科技有限公司)。

2 結果

2.1 兩組血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平比較 AIH患者血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平均顯著高于健康人，差異具有統計學意義(P<0.05，表1)。

表1 兩組血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平比較

2.2 不同程度的AIH患者血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平比較 重度AIH患者血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平均顯著高于中度組或輕度組，中度組血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平均顯著高于輕度組，差異具有統計學意義(P<0.05，表2)。

表2 不同程度AIH患者血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平比較

2.3 肝組織不同炎癥活動分級患者血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平比較 G3～4級患者血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平均顯著高于G1～2級，差異具有統計學意義(P<0.05，表3)。

表3 不同肝組織炎癥活動分級患者血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平比較

3 討論

AIH患者肝組織學特征主要表現為以漿細胞和淋巴細胞浸潤為主的炎癥，病情嚴重者可進一步發展，嚴重威脅患者生命健康[8]。盡管AIH的發病機制目前尚不完全清楚，但多項研究表明，遺傳易感性、分子模型學說、血清趨化因子和整合膜蛋白等細胞因子參與了自身免疫性肝損傷。據有關文獻[9，10]報道，CCR6、CCL20、CXCL10等趨化因子是趨化免疫細胞定向遷移的一種細胞因子，可在AIH發病過程中發揮促炎作用，可作為判斷AIH病情嚴重程度的重要指標。GP73是位于細胞高爾基體順面的一種Ⅱ型整合膜蛋白，在正常肝組織中幾乎不表達，但在各種原因引發的自身免疫性肝炎等疾病中表達尤為強烈[11-14]。因此，本研究通過檢測血清CCR6、CCL20、CXCL10等趨化因子及GP73水平在AIH和同期健康人群的水平變化，以期為臨床預防和控制AIH的發生提供依據。

趨化因子主要由單核細胞、中性粒細胞等多種細胞分泌產生，參與人體各種重要的生理功能的實現以及疾病的發展進程。在正常免疫應答過程中，趨化因子可驅使白細胞定向遷移到受傷或感染部位，從而保護機體防御外來致病物，其中CXCL10 屬Th1 相關的 CXC 類趨化因子，主要介導Th1 型細胞炎癥反應。在正常免疫應答過程中，CXCL10 可通過驅使白細胞在受傷或感染部位定位，發揮保護機體的作用，但在特定情況下，免疫細胞也會由于過度的活化而對正常組織產生攻擊，可引發自身免疫性疾病。CCL20在肝臟組織中產生，主要負責基礎白細胞遷移，是CCR6的一種高親和力配體和有效激動劑。GP73作為高爾基體中的一個固定糖蛋白，可導致HBV復制增加，HBV復制又可激發GP73蛋白的表達，且GP73在正常肝組織中幾乎不表達，但在各種原因引發的肝臟疾病中，幾乎所有肝細胞均有表達，而本研究對AIH患者血清GP73水平進行了分析，發現GP73水平顯著升高。臨床多項研究[12-14]發現，自身免疫性疾病的發生、發展及病情嚴重程度與患者體內血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平密切相關，主要體現在當AIH發生時，患者體內血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平異常升高。本研究結果發現，AIH患者血清CCR6、CCL20、CXCL10及GP73水平均顯著高于同期健康人群，分析得出以上結果的原因在于AIH患者與同期健康人群相比，會出現一系列炎癥反應，導致患者體內轉氨酶升高，肝臟多種酶的生物學活性下降，進而破壞自身免疫性肝炎患者肝細胞膜的完整性及穩定性，使得患者肝細胞再生功能受到抑制，表現為不同形式的肝功能障礙，進一步加重患者的炎癥反應[15，16]，從而導致患者體內血清CCR6、CCL20、CXCL10等趨化因子和GP73水平異常升高。因此，血清CCR6、CCL20、CXCL10及GP73可作為反映AIH患者疾病發展進程的重要指標。

臨床有關學者[17，18]指出，自身免疫性肝炎患者會出現高γ-球蛋白血癥、循環中出現自身抗體以及血清轉氨酶升高等表現，從而可導致自身免疫性肝炎患者出現不同程度的炎癥反應，加重患者肝損傷，進一步加重患者病情。通過研究不同程度病情AIH患者血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平發現，重度組患者血清CCR6、CCL20、CXCL10、GP73水平均顯著高于中度組和輕度組，G3～4級患者血清CCR6、CCL20、CXCL10、GP73水平均顯著高于G1～2級，說明自身免疫性肝炎患者的疾病嚴重程度及不同肝組織炎癥活動分級與患者體內血清CCR6、CCL20、CXCL10、GP73水平高低相關，分析原因在于CCR6、CCL20、CXCL10等趨化因子和GP73是一類多功能細胞因子，這些細胞因子的表達水平與自身免疫性肝炎的治療進程具有一定的相關性[17-20]。在自身免疫性肝炎的各個階段，CCR6、CCL20、CXCL10等趨化因子和GP73不僅可激活患者免疫細胞，還能夠激活患者星狀細胞，進而在激活的星狀細胞中呈現過度表達，導致患者出現肝損傷，進一步加重患者病情。又因自身免疫性肝炎作為一種炎癥反應性疾病，在疾病發展的各個階段，從纖維間隔形成前的疾病早期到肝硬化早期均可出現界面性肝炎，導致患者肝細胞的免疫損害持續存在。當患者肝組織炎癥發生時，能誘發患者血清炎癥因子的釋放，使得CCR6、CCL20、CXCL10等趨化因子和GP73在活動期患者血清中呈現高表達。因此，血清CCR6、CCL20、CXCL10、GP73水平可作為反應自身免疫性肝炎患者疾病嚴重程度的重要指標。