吉西他濱聯(lián)合順鉑對kaiso蛋白漿表達(dá)的NSCLC患者療效變化及血清CEA、CY211水平的影響

張蕊 鄒勤光 趙暉 賈春祎 孫少林 曲明江 張立新 張曉凱 趙鑫 王啟文 王寶

(吉林省腫瘤醫(yī)院 1內(nèi)一科，吉林 長春 130062；2胸外二科)

kaiso是一種轉(zhuǎn)錄抑制因子〔1〕。研究表明kaiso存在核漿穿梭現(xiàn)象，并可以通過抑制Wnt信號通路的靶基因抑制肺癌細(xì)胞的增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移〔2,3〕。kaiso蛋白發(fā)現(xiàn)在多種實(shí)體惡性腫瘤中表達(dá)，但目前化療藥物對kaiso蛋白異位表達(dá)的非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者的治療效果研究很少，本文旨在研究采用吉西他濱聯(lián)合順鉑對kaiso蛋白漿表達(dá)的NSCLC患者進(jìn)行治療，考察患者的生存質(zhì)量及治療前后對血清癌胚抗原(CEA)、骨膠素(CY211)的影響。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年6月至2019年6月吉林省腫瘤醫(yī)院胸外科手術(shù)切除，病理結(jié)果證明肺癌的存檔蠟塊標(biāo)本160例，免疫組化法判定出kaiso蛋白漿表達(dá)陽性組為實(shí)驗(yàn)組，呈陰性的為對照組。患者術(shù)前均沒有接受放化療或其他腫瘤針對性的治療，其中男89例，女71例；年齡60～84歲，中位年齡69歲。術(shù)后根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟(UICC)制定的第7版TNM分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行手術(shù)分期〔4〕。對照組50例，鱗癌32例；其中Ⅲ期26例，Ⅳ期6例；腺癌18例，Ⅲ期15例，Ⅳ期3例。觀察組110例，鱗癌59例，其中Ⅲ期49例，Ⅳ期10例；腺癌51例，其中Ⅲ期40例，Ⅳ期11例。所有標(biāo)本被切除離體后冷凍保存，使用和采集均獲得患者本人同意并由吉林省腫瘤醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2免疫組化法及結(jié)果的判定 將標(biāo)本制作成4 μm厚的切片，常規(guī)免疫組化S-P 法染色，檢測kaiso蛋白表達(dá)，稀釋濃度1∶40，同時(shí)用0.01 mol/L、pH7.4 的磷酸鹽緩沖液代替一抗作陰性對照。kaiso 蛋白鼠抗人單克隆抗體購于美國BD 公司，S-P免疫組化試劑盒購于福州邁新公司。

結(jié)果判定:選腫瘤細(xì)胞陽性染色集中區(qū)域，每張切片計(jì)數(shù)高倍視野(×400)下400個(gè)腫瘤細(xì)胞，按kaiso表達(dá)百分率分為4個(gè)等級:<25%為0分，26%～50%為1 分，51%～75%為2分，>75%為3分。根據(jù)免疫組化染色強(qiáng)度分為3 個(gè)等級:淺黃色計(jì)1分，棕黃色計(jì)2分，黃褐色計(jì)3分。以陽性細(xì)胞率和染色強(qiáng)度的分值乘積作為每例標(biāo)本的積分。積分為0分與1分計(jì)為陰性表達(dá)，≥2 分為陽性表達(dá)。

1.3治療方法 所有患者采用吉西他濱聯(lián)合順鉑，吉西他濱1 250 mg/m2(江蘇豪森藥業(yè))第1天和第8天用藥;順鉑25 mg/m2(齊魯制藥有限公司)第1～3天靜脈滴注，3 w為1個(gè)周期，治療2個(gè)周期及以上。用藥期間密切檢測患者的不良反應(yīng)，如發(fā)生嚴(yán)重不良反應(yīng)及時(shí)停藥。

1.4觀察指標(biāo)及評定方法 ①治療結(jié)束后觀察兩組臨床療效，完全緩解(CR)：腫瘤病灶消失無新病灶出現(xiàn)，至少維持30 d；部分緩解(PR)：腫瘤體積增大或縮小≥30%，至少維持30 d；疾病穩(wěn)定(SD):腫瘤體積直徑縮小或增大25%，至少維持30 d;疾病進(jìn)展(PD):腫瘤體積增大20%或出現(xiàn)新病灶。總有效率=(CR+PR)/總例數(shù)〔5〕，穩(wěn)定率=(CR+PR+SD)/總例數(shù)。②所有患者治療前及治療2個(gè)周期后，空腹抽取靜脈血3 ml，離心取上清液，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測定血清腫瘤標(biāo)志物CEA、CY211水平。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1kaiso蛋白在NSCLC患者中表達(dá)陽性率的判定 kaiso蛋白被染色后在細(xì)胞質(zhì)中呈現(xiàn)粗細(xì)不均勻的淺黃至棕褐色顆粒，根據(jù)判定標(biāo)準(zhǔn)，160例NSCLC患者標(biāo)本中kaiso陽性表達(dá)率為68.75%(110/160)，見圖1。

2.2兩組臨床療效比較 治療后對照組有效率高于觀察組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.51，P<0.05)。對照組穩(wěn)定率高于觀察組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

2.3不同病理組化療前后血清CEA、CY211水平比較 化療前，兩組腺癌、鱗癌血清中CEA、CY211水平無明顯差異(P>0.05)，化療后，均顯著降低(P<0.05)。治療前后腺癌和鱗癌血清CEA、CY211水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表1 兩組臨床療效對比(n)

表2 不同病理組化療前后血清CEA、CY211水平變化

2.4不同分期化療前后血清CEA、CY211水平比較 化療前，Ⅲ期對照組和觀察組血清CEA、CY211水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。Ⅳ期觀察組與對照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。化療后，Ⅲ期、Ⅳ期觀察組與對照組比較血清CEA、CY211水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 不同分期化療前后血清CEA、CY211水平比較

3 討 論

目前對kaiso蛋白在NSCLC方面研究甚少，化療藥物對其治療進(jìn)程的影響研究也少有報(bào)道。但已經(jīng)證實(shí)kaiso蛋白擁有雙重DNA綁定識別轉(zhuǎn)錄抑制因子，且與眾多腫瘤相關(guān)基因啟動因子有關(guān)，參與Wnt/β-catenin通路調(diào)節(jié)，與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)〔4～7〕。Dai等〔6〕研究發(fā)現(xiàn)，kaiso蛋白在肺癌細(xì)胞質(zhì)中呈現(xiàn)63.61%較高表達(dá)，在TNM高分期及淋巴轉(zhuǎn)移的癌細(xì)胞中陽性率更高，增強(qiáng)了肺癌細(xì)胞增殖和侵襲能力，還發(fā)現(xiàn)kaiso蛋白細(xì)胞核表達(dá)癌細(xì)胞在生物學(xué)功能上與細(xì)胞質(zhì)表達(dá)發(fā)揮相反的作用。梁鍵等〔7〕研究發(fā)現(xiàn),p120可能與kaiso蛋白共同異位表達(dá)在細(xì)胞質(zhì)中，且通過kaiso蛋白解除靶基因的抑制作用，從而促進(jìn)matrilysin的表達(dá)參與肺癌的發(fā)生進(jìn)程。

本研究結(jié)果說明kaiso蛋白陽性表達(dá)組的患者對治療后效果較差，且kaiso蛋白的細(xì)胞質(zhì)是否陽性表達(dá)在不同肺癌病理?xiàng)l件下，對血清CEA、CY211沒有明顯影響。與王寶等〔8〕研究結(jié)果相一致。本研究結(jié)果還說明kaiso蛋白細(xì)胞漿的陽性表達(dá)影響了患者對化療藥物的作用，可能降低了患者對化療藥物的敏感性，降低了化療藥物的有效性。

綜上，吉西他濱聯(lián)合順鉑對kaiso蛋白漿表達(dá)的NSCLC患者，治療后kaiso蛋白細(xì)胞漿陽性表達(dá)的患者治療效果降低，病理類型對治療前后血清中CEA、CY211水平基本沒有影響，但在病理分期中，對Ⅳ期患者影響較大，降低了患者對藥物的敏感性及治愈率，但其他治療方案對其影響是否一致，仍需要繼續(xù)研究。