快速測試板用于飲用水微生物檢驗的效果分析

張蘭

（西寧市疾病預防控制中心 青海 西寧 810007）

目前，常用的微生物快速檢測技術有兩類，一類是由傳統微生物檢測技術改良而來，最具代表性的是快速測試板；另一類是運用生物工程、熒光法等高精尖科技，可直接特異性檢測微生物及其代謝產物等來對微生物做出有效鑒別，最具代表性的是ATP 發光技術。前者可將樣品處理過程簡化，可提高檢測靈敏度。其培養方法得到改良，用時和傳統技術相比卻未縮短，只是檢測用時縮短了一些，而檢測費用有所提高[1]。后者優點在于省略培養步驟或培養時間較短，檢測用時顯著縮短，但需配備一些精密設備，且對檢測人員有一定技術要求[2]。

1.微生物檢測技術在飲用水檢測上的應用現狀

生活飲用水中微生物指標主要有4 種，即總大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希氏菌等。微生物檢測需于無菌環境下進行，檢測室一般用紫外線燈進行消毒，樣品處理時所應用的儀器、器皿等均要經過高壓滅菌。對培養基的制備尤其重視，將所需藥劑混勻后需做好消毒處理[3]。就飲用水檢測的實際情況而言，應用快速測試板更經濟實惠、簡便快速，故首選此方法對飲用水進行生物檢測。

2.快速測試板檢測原理及具體開展步驟

2.1 快速測試板檢測原理

快速測試板為一種預先配置成的培養基產品，由營養培養基、吸水凝膠等兩部分組成。營養培養基根據特異性的酶底物反應可于自然環境下對不同的微生物做出鑒定，還能有效檢測共存的多菌種微生物。培養基顯色的原理為微生物在代謝過程中可生成的一種酶，其可和顯色底物發生作用。顯色底物組分有產色基因、微生物的一些可代謝物質，產色基因受到特異性酶的作用會有一定顏色出現，通過對菌落顏色進行觀察，從而有利于鑒別菌種[4]。有關研究發現[5]，應用顯色培養基對微生物進行篩查，其反應靈敏性高于傳統培養基，可提高菌落計數準確度及效率。

2.2 具體開展步驟

應用快速測試板，可縮減樣品處理、消毒及培養基制備等操作過程。在提取到水樣后，于無菌環境下將快速測試板置于操作臺上。打開上層膜后，用經過消毒處理的吸管吸取水樣1mL并將之滴到紙片上，再蓋好上層膜，靜置至培養基充分凝固，一般需10s 左右。疊好測試片后放于原自封袋內，封上袋口，透明面向上水平放于恒溫箱中。按照檢測項目實際情況，設定時間及溫度進行培養，最后通過菌落顏色及特征加以鑒別。

3.快速測試板的運用

將快速測試板應用到飲用水微生物檢驗中，取500 份水樣進行4 種菌體的分批檢驗，且對25 份水樣進行了精密度試驗，及以傳統方法做對照的試驗。

3.1 菌落總數檢測

參照《生活飲用水標準檢驗方法》并采用平皿計數法對菌落總數進行測定，在營養瓊脂上放置樣品，并于有氧條件下36 ℃培養48h，通過肉眼觀察獲知樣品中所含菌落數。菌落總數測試板使用原理同國際標準一致，先采集水樣1mL，于測試板上涂抹營養培養基，將四唑紅作為脫氫酶指示劑并將其添加進去，菌落顯現紅色，從而可提高計數效率，并有助于提升其準確度[6]。

3.2 總大腸菌群檢測

在37℃條件下培養24h 能發酵乳糖、產酸產氣的革蘭陰性無芽孢桿菌被稱為總大腸菌群。按照生活飲用水水質指標檢測方法，對于此類菌群檢測方法主要有多管法、濾膜法、酵底物法等3 種。

3.3 耐熱大腸菌群檢測

在44.5℃條件下仍可生長并發酵乳糖的大腸菌群則為耐熱大腸菌。故通過增加此菌群的培養溫度，可對來自自然環境及糞便中的大腸菌群做出有效區分。目前，耐熱大腸菌群的檢測方法主要有濾膜法、多管法等2 種。

3.4 大腸埃希氏菌檢測

此菌群又被稱為大腸桿菌，對人、動物具有較強的致病性，尤其是嬰幼兒、幼畜，極易導致其腹瀉或患敗血癥。根據國家《生活飲用水衛生標準》，通過檢測發現水樣中有總大腸菌群存在時，應進一步檢測是否存在大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群這2 種菌群；如未發現有總大腸菌群存在，則無需對上述2 種菌群進行檢測[7]。大腸埃希氏菌檢測的方法同國標規定的檢測總大腸菌群方法一致。

4.總結

水資源污染是當下我國面臨的重要問題。為保證居民飲水安全，對飲用水進行微生物檢驗十分有必要。快速測試板在飲用水微生物檢驗中應用，可很好地解決既往使用傳統方法培養基批次不同、制備條件不同等所帶來的問題。同時檢測操作更加便捷，取樣更加便利。此外，還可減少檢測費用，縮短檢測時間，并提高檢測準確度。