鼻息肉患者血清TNF-α、IL-17的表達及其意義①

羅經(jīng)涇，黃曉麗，范宗憲

(佳木斯大學附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154003)

鼻息肉(nasal polyp)是一種很常見的耳鼻咽喉頭頸外科的疾病，目前的治療方法以手術治療為主。其成人發(fā)病率約為1%～2%，術后復發(fā)率約為15%[1]。其難治性和易復發(fā)性的一個重要原因就在于該病的發(fā)病機制尚不明了。鼻息肉的發(fā)病已有很多學說表明可能與遺傳、變態(tài)反應、感染等多種因素相關[2]。 就目前已有的研究來看，各種免疫細胞和細胞因子的作用舉足輕重。很多學者發(fā)現(xiàn)Th1和Th2細胞失衡是鼻息肉病程的關鍵機制，而Th17細胞是否參與其中的平衡也是目前很多研究的對象。Th17細胞通過產(chǎn)生的白介素17[3]與Th1細胞產(chǎn)生的腫瘤壞死因子α可能在鼻息肉的發(fā)病及復發(fā)中扮演重要角色。在Reibman等的研究中TNF-α和IL-17會導致呼吸道的上皮細胞產(chǎn)生巨噬細胞炎性蛋白MIP-3α/CCL20增多[4]，而吳等[5]學者認為MIP-3α/CCL20直接對鼻黏膜產(chǎn)生作用，且趨化嗜酸性粒細胞和中性粒細胞，促進炎癥的發(fā)展，刺激新生血管的產(chǎn)生，最終造成鼻息肉發(fā)生。本次研究旨在通過ELISA測定和比較初發(fā)與復發(fā)的鼻息肉患者和正常志愿者血清中IL-17和TNF-α的濃度，并分析它們的關系，從一個側面來探討在這兩個因子在鼻息肉的發(fā)病和復發(fā)中可能起到作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018-01～2018-12在佳木斯大學附屬第一醫(yī)院確診的初發(fā)鼻息肉患者40例作為A組，其中男25例，女15例，年齡21～58歲，平均(45±13)歲，診斷依據(jù)病史采集、前鼻鏡檢查、鼻內鏡檢查和鼻竇CT檢查，排除標準為患有其他良惡性腫瘤、其他急慢性炎癥性疾病、支氣管哮喘或阿司匹林過敏史。手術后復發(fā)鼻息肉患者24例作為B組，其中男15例，女9例，年齡35～60歲，平均(51±16)歲，其診斷和排除標準同上。選取同期于我院體檢的健康成人20例為健康對照組，其中男12例，女8例，年齡24～60歲，平均(43±13)歲，排除標準同上。所有研究對象均已獲得知情同意。實驗組和對照組之間性別、年齡差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 材料準備，實驗組和對照組所有對象晨起空腹采血，EDTA抗凝，加入1.5mL的離心管中，經(jīng)3500r/min離心10min后分離出血清，-20℃冰箱保存待測。將IL-17 ELISA試劑盒和TNF-α ELISA試劑盒保存在4℃冰箱中。

1.2.2 ELISA法測量所有對象血清中的TNF-α和IL-17的濃度，試劑盒為武漢博士德公司產(chǎn)品，操作步驟嚴格地按試劑盒的使用說明書進行，所有待測對象和標準品設兩個復孔，用酶標儀450nm處測量OD值。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS21.0軟件進行處理，數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差的方法來表示，比較采用獨立樣本t檢驗，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 各組血清TNF-α和IL-17水平的檢測

A組、B組血清中TNF-α和IL-17的水平均明顯高于對照組(P<0.05)，見表1～2。差別有統(tǒng)計學意義，且B組血清中的TNF-α和IL-17濃度明顯高于A組(P<0.05)，差別具有統(tǒng)計學意義。見表3。

表1 初發(fā)組(A組)與對照組血清TNF-α和IL-17水平對比

表2 復發(fā)組(B組)與對照組血清TNF-α和IL-17濃度對比

表3 復發(fā)組(B組)與初發(fā)組(A組)血清TNF-α和IL-17濃度對比

2.2 各組血清中TNF-α水平和IL-17水平的相關性

在A組和B組TNF-α和IL-17的濃度之間存在中等程度正相關的關系，而對照組兩因子之間的為極弱程度相關。見表4。

表4 各組TNF-α和IL-17濃度之間的相關性Pearson分析

3 討論

鼻息肉的發(fā)病與復發(fā)過程中各種免疫細胞和其產(chǎn)生的細胞因子的作用舉足輕重。IL-17主要由Th17細胞產(chǎn)生，在炎癥反應的進一步進行當中扮演重要角色[6]。它能促進很多細胞釋放各種其他細胞因子來促進炎癥反應，它還可以和其他細胞因子(TNF-α、IL-1等)協(xié)同作用加強炎癥反應[7]，它可能參與鼻息肉的基質纖維化、基底細胞增厚等[8]結構異常中。TNF-α則是一種前細胞因子，主要由單核巨噬細胞、Th1、Th17等細胞產(chǎn)生。研究表明，TNF-α大量且廣泛地在鼻息肉上皮 、血管內皮、腺體以及部分炎性細胞中表達[9]。張敏等[10]的研究則認為鼻息肉的發(fā)生發(fā)展與TNF-α和IL-17刺激鼻息肉上皮細胞產(chǎn)生MIP-3α/CCL20增加有關。吳等[5]學者認為MIP-3α/CCL20能直接對鼻黏膜產(chǎn)生作用，持續(xù)改變局部微環(huán)境并影響捕獲不成熟的樹突狀細胞，與此同時，MIP-3α/CCL20還能趨化嗜酸性粒細胞和中性粒細胞，令這些細胞捕獲附近的上皮細胞，促進慢性炎癥的發(fā)展，刺激新生血管的產(chǎn)生，最終造成鼻息肉發(fā)生。在本次研究中，健康志愿者、初發(fā)鼻息肉患者和復發(fā)鼻息肉患者血清的TNF-α和IL-17的水平依次增高，并且差異具有統(tǒng)計學意義，提示TNF-α和IL-17可能與鼻息肉的發(fā)生發(fā)展尤其是復發(fā)有著密切的關系。同時，各組血清TNF-α和IL-17之間具有正相關性，提示兩個細胞因子之間可能存在相互的協(xié)同作用，并推動鼻息肉的發(fā)生和復發(fā)。Fokkens教授認為白種人的鼻息肉組織中效應T細胞主要是Th2，而中國人的則以Th1、Th17為占優(yōu)[11]。本實驗結果也間接支持了這一觀點。尤其是對于鼻息肉的易復發(fā)性，可能和Th1、Th17的作用有極其密切的關系。綜上所述，TNF-α和IL-17與鼻息肉的發(fā)生發(fā)展尤其是鼻息肉的易復發(fā)性密切相關，可能參與到鼻息肉的發(fā)病和復發(fā)中，并且可能存在協(xié)同作用。