曹潁超,陶曉麗
(臨潁縣畜牧局,河南 臨潁 462600)
牛病毒性腹瀉病的病原為病毒性腹瀉病毒,在分類上,它和豬瘟病毒、羊的邊界病毒都屬于瘟病毒屬。在電子顯微鏡下,本病毒外觀呈球型,遺傳物質為單股正鏈的RNA。該病毒的全長為約為12.5kb,只有一個開放閱讀框,可以編碼12個蛋白左右。本病毒有兩個基因型,不同的基因型之間的差異并不顯著。
牛病毒性腹瀉病毒在世界范圍內廣泛流行,其流行情況因不同的牛場,飼養管理水平和防控措施不同而又很大的差異。有研究報道,加拿大牛病毒性腹瀉的抗體陽性率在38%左右,巴西和韓國在60%左右。在牛病毒性腹瀉病毒的流行株當中,因地方差異而有很大的不同,如美國流行的毒株是1a亞型,一些歐洲國家流行的毒株是1d亞型。我國關于此病的報道可以追溯到20世紀的四十年代,但是是疑似病例,并沒有得到證實。直到1980年才從牛場第一次分離到本病的毒株病被證實我國也有此病的發生和流行。在隨后的幾年里,我國各地區之間都有此病的報道,且感染程度各有不同。在楊得勝的一項調查當中,牛病毒性腹瀉病毒的平均陽性率達到92.5%,且有3個牛場是100%感染。從流行得毒株看出,我國的毒株以BVDV-1型為主,2型毒株也有報道,只不過比較少。
牛感染病毒性腹瀉病毒后,常表現為亞臨床癥狀,亞臨床癥狀指的是在臨床正呈一過性,外觀上看不到癥狀的出現,可能會有輕微得體溫升高和白細胞得減少。有的牛對此病毒比較敏感,就會表現出明顯的臨床癥狀,其中以腹瀉為主。當感染的牛是犢牛時,其死亡率相對比較高。患病牛在腹瀉后場表現為精神沉郁、食欲減退、分泌物增多等。有的地方流行的毒株是高致病性的話,患病牛就會出現血便、鼻出血、粘膜出血等癥狀,隨后會出現貧血、消瘦白細胞嚴重減少,中性白血球減少等癥狀。
病毒的分離并不能確診本病,這只是病毒確診的第一步,但是病毒的分離鑒定是病毒進行純化和分型的主要環節,且病毒分離的方法的可信度非常高。但是這種方法有自身的缺陷,如花費時間比較長,且只適合小樣本的檢測,對于大批量的樣本的檢測,并不適用。
PCR技術是實驗室鑒定該病毒最常見的方法,本方法所用的病料也非常易得,如血清、血漿全血、組織等都可以。用核酸提取試劑盒提取基因組RNA,再以RNA為模板進行擴增反應,即可得到樣本的陰性或者陽性結果。普通的PCR檢測方法相對于病毒的分離方法速度有很大的提升,可以在較短時間內批量檢測樣本。隨著分子生物學的研究進展,熒光定量PCR技術也被應用到該病毒的檢測上,該檢測方法以其特異性好,靈敏度高等有點被廣泛應用到該病的檢測當中。
ELISA試驗是基于抗原抗體反應的原理建立的檢測方法,有用該檢測方法檢測血清中的抗原的,也有檢測血清中的抗體的,但是無論是檢測抗原還是抗體,本檢測方法的敏感性、特異性和重復性都非常好。
機體受到牛病毒性腹瀉病毒感染之后,機體會產生特異性的中和抗體,這種抗體與病毒粒子相結合,可以應用病毒與抗體的這種特性,在體外培養的細胞上阻止這種結合,從而使病毒失去感染的能力。中和試驗是根據病毒受待檢血清中和后的感染來判定免疫血清中和病毒的能力的。常見的中和試驗的方法有兩種,一種是一定病毒量與相同量的血清進行混合,另一種是一定量的血清與等量的病毒進行混合。然后把混合液接種到牛腎細胞,從而測定其效價。
牛病毒性腹瀉病對于養牛業造成了嚴重的經濟損失,因此,必須制定全面的防控策略進行該病的防控。首先要做的是對該病進行流行病學調查,包括流行的地區、流行的毒株類型,群體和個體的感染情況,發病情況以及發病率與死亡率,在此基礎上進行采樣,實驗室監測與診斷、用藥。其次就是提高管理水平,在養殖業生產實踐當中要制定合理的生物安全防護措施,嚴格規定牛場的飼養密度,落實疫苗接種計劃。最后就是對該病的凈化。對牛群進行全滿篩查,一旦查出陽性牛只,立即淘汰,從而凈化整個養牛場的環境。