無精子癥男性不育與染色體核型異常關系分析

李光，張譯夫，文陶非

（長春市婦產醫院 生殖醫學中心，吉林 長春 130042）

0 引言

男性不育是指性生活正常情況下，夫婦婚后同居生活一年以上，在排除女方因素且未采取任何避孕措施的情況下不育者[1]。臨床分析這主要是因男性生精異常而導致，在男性不育患者中，約20%患者是因精子生成障礙而導致的少精、弱精或無精。而且研究發現染色體異常是精子生成障礙的主要因此，臨床有必要對無精癥患者實施染色體核型分析，明確其異常情況。針對男性不育患者臨床診療中，一般會采取進行細胞遺傳學染色體核型分析檢驗項目。基于此，本文選擇110例無精少精弱精子癥男性不育患者，就無精子癥男性不育與染色體核型異常關系進行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料。選取我院2018年1月至2019年6月收治的110例無精子癥男性不育患者作為此次研究的研究對象。年齡21-58歲，平均（35.88±4.03）歲，不孕時間在1-11年，平均（7.88±2.02）年。以上患者婚后均未避孕，女方健康未見染色體異常。所有研究對象精液常規檢查3次，每次至少間隔3d。根據《人類精液及精子-宮頸粘液相互作用實驗室檢驗手冊》的實驗標準，精子密度>20×106/mL，（A+B）級精子百分率超過50%，表示處于正常范圍內。連續進行3次精液分析，且經離心沉淀鏡檢無精子，則判定為無精子癥，精子密度<5×106/mL者為嚴重少精子癥。110例患者經檢查均判定為無精子癥。所有患者接受專科醫生進行體格檢查，經《男性生殖病史詢問表》采集病史，包括結婚時間、性成熟情況、避孕措施、性生活狀況、既往病史、既往生育或受孕情況、外傷、泌尿系感染史與手術史等。

1.2 檢測儀器與試劑。選用Forma3111型的恒溫培養箱，恒溫水浴箱、隔水式電熱恒溫培養箱，人體外周血淋巴細胞培養基與細胞培養液。

1.3 檢查方法。取樣前需告知研究對象相關情況，并簽署同意書。取肝素抗凝靜脈血1-2 mL，實施無菌操作，接種在兩種不同廠家培養基中，并分別放入到2個獨立恒溫培養中，培養條件37℃、72 h，第3 d每個瓶中加入2滴秋水仙素（選用注射器劑量為2 mL，選用7號針頭）3 h收獲、處理、紙片與G顯帶。G顯帶分析，計數30個中期分裂相，對3-5個核型進行分析，染色體多態可結合C顯帶方法，確定具體核型。

2 結果

110例患者檢查被確診為無精子癥男性不育實施染色體核型檢查，顯示，15例出現染色體異常，異常率為13.67%。其中性染色體異常10例，占異常總數66.67%，包括47，XXY（Klinefelter綜合征）8例，Y多態2例。常染色體異常3例，約為異常總數20.00%。9號染色體臂間倒位2例。所有異常核型中，發病率最高即Klinefelter綜合征（47，XXY），占比53.33%（8/15），見表1。

表1 無精子癥男性不育與染色體核型狀況分析

3 討論

不孕不育癥為一種臨床常見病，不育是男女雙方共同問題，女性原因導致的稱為不孕，男性原因導致的成為不育。其中男性不育可分為性功能障礙性不育癥和性功能正常性不育癥，性功能正常性不育是因精液異常而導致。無精子癥為一種類型，是指精液離心沉淀鏡檢，連續3次未發現精子，并排除逆行射精、不射精情況，輸精管道梗阻、毒性藥物與感染等原因，也會導致男性無精子癥，遺傳性狀的變化，也會導致男性無精子癥[2-3]。導致男性不育的原因可分為細胞遺傳學原因，包括基因異常、染色體核型異常，還包括分子遺傳學原因，是指促性腺激素缺乏。

細胞遺傳學為男性不育的主要研究方法，染色體異常與相關基因缺失均會對精子產生不同程度影響，并影響生育能力，這是導致弱精、少精、無精的主要因此[4]。本研究中，110例患者檢查被確診為無精子癥男性不育實施染色體核型檢查，顯示，異常率為13.67%。染色體數目異常中Klinefelter 綜合征是發生率最高，本文研究15例異常核型中，Klinefelter綜合征共8例。這類患者多思維正常、身材高大、四肢細長、陰莖小、睪丸發育狀況不佳、無精子生成，有男性乳房發育，腋毛、胡須、陰毛稀少或基本無。其發生機制主要是因性染色體在減數分裂時，不分離而導致，與高齡孕產相關。47，XXY患者的Y染色體正常，因此存在正常睪丸發育，但睪丸發育狀況不佳，而導致生精上皮細胞死亡，因此出現無精[5-6]。

染色體多態性是高度重復DNA結構中出現異染色質區的微小變異，一般是D/G組染色體隨體區出現變異以及1、9、16號染色體出現缺失，這些高度重復DNA序列中幾乎無編碼結構基因[7]。其中Y染色體多態，主要是表現為小Y或大Y。研究表明，大Y多來自Y異染色質中DNA高度重復，重復DNA會導致染色質DNA量增加，出現有絲分裂錯誤，這可能受生殖異常的影響。因Y染色體長臂上有與男性生育能力相關、性別分化、性腺發育相關的基因，其高度重復可導致精子生成障礙。因此，臨床認為大Y主要與性分化異常相關。小Y為一種多態性變化，一般不會影響生育，但也有研究提出，Y染色體部分遺傳物質丟失，會導致自然流產、不育。因此臨床認為大Y或小Y均與遺傳效應相關。

常染色體易位。本次研究中檢出常染色體平衡易位患者3例。常染色體相互易位影響著男性不育，常染色體上存在較多影響精子生成基因，一旦出現易位導致基因斷裂或缺失，便會出現無精或少精。而且研究還發現9號染色體臂間倒位也會影響男性不育。其遺傳效應主要有缺失或重復片段的長短與所含基因致死效應相關。分析9號染色體臂間倒位影響精子障礙發生，可能是與基因到位阻礙第一次減數分裂時二價體的形成相關。

本研究性染色體異常占比4.55%。Y染色體是含有決定男性特征的關鍵基因，主要包括睪丸成熟因子和睪丸決定因子，以此調控男性生殖器的發育及成熟。因此性染色體異常自然會影響生殖器的正常發育成熟。本研究顯示異常核型中，發病率最高即Klinefelter綜合征（47，XXY），占比53.33%。Klinefelter綜合征發生機制與X染色體相關，主要是某些因素導致患者X染色體在生殖細胞減數分裂中出現分離異常[3]。染色體核型異常為男性不育的主要原因，臨床可通過檢測男性不育異常情況，其意義不在于早發現早治療，直至現在臨床并未發現有效的關于改變男性不育異常染色體核型的的方法，該檢測開展的意義在于提早放棄對男性不育的無效治療，引用他人精子提高受孕率。

綜上所述，男性不育的重要原因之一即染色體核型異常，對患者染色體核型進行分析有利于男性不育診斷，并為臨床治療提供依據，具有重要意義。