兒童急性下呼吸道感染的病毒抗原檢測及結果分析

尹文艷，靳蓉，蘇守碩，王菲，李悅，劉燕

（貴陽市婦幼保健院/貴陽市兒童醫院 呼吸科，貴州 貴陽 550002）

0 引言

急性下呼吸道感染 （acute lower respiratory tract infection，ALRTI）是兒童常見的感染性疾病，嚴重威脅兒童健康，并給患兒家庭及社會帶來巨大的經濟負擔。且據WHO統計，發展中國家兒童肺炎的發病率比發達國家高l0倍。病毒是引起兒童肺炎的主要病原，2歲以下病毒性肺炎占86%，5歲以上占37%。其中，呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）、流感病毒（influenzavirus，IFV）、副流感病毒（parainfluenza virus，PIV）、鼻病毒（rhinovirus，RV）及腺病毒（adenovirus，AdV）等是引起兒童ALRTI的常見病毒病原[1]。本次研究選擇于我院呼吸科住院的200例急性下呼吸道感染患兒作為研究對象，并對其鼻咽分泌物進行收集，通過直接免疫熒光法對兒童急性下呼吸道感染的病毒抗原進行檢測，并對檢測結果進行分析，現將報道示下。

1 資料與方法

1.1 一般資料。選擇2017年12月至2019年10月前來本院接受診療的200例急性下呼吸道感染患兒作為研究對象，其中男112例，女88例；年齡28天至14歲，平均（7.03±1.24）歲。入選患者中，急性肺炎42例，急性支氣管炎78例，急性毛細支氣管炎80例。本次研究患兒家屬已知情，并簽署知情同意書，研究已獲得院內倫理委員會同意。

1.2 方法。主要通過直接免疫熒光法對病毒抗原進行檢測，檢測的下呼吸道感染病毒抗原主要包括RSV、IFV、PIV1、PIV2、PIV3、RV、Adv共7種病毒抗原。檢測方法如下：將一次性塑料導管經患者鼻腔插入，插入深度達7 cm左右直達咽部，然后將鼻咽分泌物吸取出，并使用2 mL濃度為0.9%的無菌氯化鈉注射液進行沖洗導管，將標本取出之后馬上送檢。檢測步驟為：將標本置入到離心管之中，并保持均勻狀態，以1000 r/min完成離心操作，時間為10 min，將上部清液去除，向沉淀物之中擠入PBS，劑量為2 mL，然歐再以1000 r/min完成離心操作，時間仍設定為10 min，然后再將上清液去除，將0.5 mL PBS加入到沉淀物之中，對其充分混勻，然后取出25 mL置于多孔載玻片進行風干，完成風干之后使用冷丙酮將其固定5 min，之后使用試劑盒7中熒光標記單克隆抗體分別向標本上滴加，在37℃環境下孵育30 min，進行3次PBS洗片，風干之后進行封片鏡檢。通過熒光顯微鏡進行讀片，若一孔涂片含有的細胞個數≥100個，則可以認為該涂片能夠應用到檢測結果評價之中，若出現的完整細胞≥2個，且細胞之中存在蘋果綠熒光，則可判定為陽性[2]。

1.3 統計學分析。以SPSS 20.0進行統計學分析，將（）代表計量資料，經t檢驗，將%代表計數資料，經χ2檢驗，差異明顯時，P<0.05，有統計學意義。

2 結果

2.1 本組標本病毒抗原檢測結果。200份標本中，病毒抗原陽性檢出率 48.5%（97/200），在7種病毒抗原中，以RSV陽性率檢出率最高，其次為RV，兩者差異明顯，有統計學意義，P<0.05，見表1。

2.2 三種下呼吸道感染病毒抗原檢測結果。毛細支氣管炎病毒抗原陽性檢出率高于其他兩種疾病，P<0.05，差異有統計學意義，見表2。

3 討論

表1 本組標本病毒抗原檢測陽性結果（n，%）

表2 三種疾病病毒抗原檢測結果（n，%）

直接免疫熒光法是當前呼吸道感染病毒抗原檢測的一種廉價、快速、高效的方法，目前，此方法已在臨床檢測中推廣應用。通過此方法能夠對病毒抗原進行準確檢測，可于兒童急性下呼吸道感染發病初期階段便能夠進行明確的指導。而從當前該疾病用藥方面，濫用抗生素現象比較普遍，若未能夠找出病毒抗原從而對患兒實施針對性治療，則患兒在用藥過程中很容易出現病毒耐藥性，從而降低治療效果，甚至不能夠發揮藥物效用[3]。因此，需要對兒童急性下呼吸道感染的病毒抗原進行準確檢測，從而為臨床治療提供指導。目前，雖然直接免疫熒光法得以在呼吸道疾病檢測之中得到普遍應用，但該方法還存在一定的缺陷，即在使用這種方法進行篩查的過程中，通常會存在4%-8%的染色具有非特異性，從而容易出現誤診的情況，對于該缺陷，閱片醫務人員的工作經驗顯得非常重要，閱片醫務人員可通過自身豐富的經驗來對特異性和非特異性之間做出區分。

呼吸道病毒主要指的是侵犯呼吸道而引發呼吸系統以及呼吸系統外組織器官病變的一類病毒。在呼吸道病毒抗原中，以RSV、IFV、PIV1、PIV2、PIV3、RV、Adv這7種抗原最為常見。在這7種病毒抗原之中，RSV屬于最為常見的一種抗原，其能夠造成間質性肺炎，也能夠造成毛細支氣管炎，其病毒感染的潛伏期一般在2-8 d，大多數情況下，其潛伏期通常在4-6 d，其產生的癥狀一般比較輕，單純感染病例一般會在6-10 d便可自行恢復[4]，通過X線檢查，其產生的陰影一般會在2-3周時間范圍內消失，若未能夠采取有效的隔離措施，將會容易造成繼發感染，并再度出現發熱癥狀，因為患兒的呼吸道局部與成人相比缺乏IgA抗體，因此此類人群對RSV比較易感[5]。通過本次研究顯示，病毒抗原陽性檢出率為48.5%，其中單一陽性檢出率最高的是RSV（40.21%），其次為RV（24.74%），RSV能夠引發病毒性肺炎以及毛細支氣管炎，病毒感染的潛伏期一般為2-8 d，如果未能夠采取有效的隔離措施，容易繼發感染，并再次出現發熱，而因兒童呼吸道局部缺乏IgA抗體，故比較容易感染RSV[6]。此外，本次研究提示，在三種急性下呼吸感染病例中，以急性毛細支氣管炎的病毒陽性檢出率最高（77.5%），這與國內相關報道研究結果一致，可見，RSV是毛細支氣管炎最常見的病毒病原，針對這一檢測結果，需要臨床醫師指導患兒家屬積極配合做好預防工作，尤其是對一般治療進行重視，注意對患兒隔離，并做好其他病毒感染的預防工作。

綜上所述，經檢測分析，本地區兒童急性下呼吸道感染病毒抗原主要為RSV，其次為RV，臨床用藥治療過程中，應該根據各病原體進行合理用藥，并且相關單位還應該加強防控工作，對一般治療特別重視，一旦出現感染病例，應該重視采取隔離措施，著重預防激發細菌感染以及其他類型病毒感染。