寄生于羅非魚的刺紋車輪蟲種群分析及其寄主偏好性研究

秦微微 趙元莙 唐發輝

(重慶師范大學動物生物學重點實驗室, 重慶 401331)

羅非魚隸屬于鱸形目Perciformes、麗魚科Cichlidae、羅非魚屬Oreochromis, 是原產于非洲的中小型硬骨魚類, 現為世界水產業重點培養的海、淡水養殖魚類, 是漁業經濟發展的重要組成。自20世紀60年代以來, 我國羅非魚養殖業發展迅速[1], 但在養殖過程中常常遭受多種病害的困擾。其中, 車輪蟲就是常見的寄生蟲, 主要寄生于魚類的皮膚及鰓,往往引起皮膚病和鰓病, 從而影響幼魚的生長發育,嚴重時可引起魚苗大批死亡, 嚴重危害養殖漁業的發展[2—4]。迄今, 基于健康養殖的理念, 尚未有高效低毒的車輪蟲病防治手段。

作為一類具有危害性的游走類纖毛蟲, 車輪蟲的寄主十分廣泛, 除魚類外, 其亦可廣泛地外寄生或共棲生于貝類以及兩棲類。據報道, 全世界已記錄車輪蟲400余種[5—10], 其中感染羅非魚的車輪蟲達30種, 包括車輪蟲屬Trichodina18種, 擬車輪蟲屬Paratrichodina1種, 小車輪蟲屬Trichodinella2種,三分蟲屬Tripartiella9種。刺紋車輪蟲Trichodina centrostrigataBasson, Van As & Paperna, 1983是羅非魚上常見的病害性纖毛蟲[7,9,11—18]。本文結合其形態學特征、分子特征及系統發育分析, 對刺紋車輪蟲的種群多樣性及寄主偏好性進行了研究, 以期為羅非魚的車輪蟲病原的鑒定提供參考資料。

1 材料與方法

1.1 樣本采集與鑒定

寄主羅非魚(單性吉富系列:Oreochromis niloticus×Oreochromis mossambicus)分別于2017年7月、2018年7月采自重慶市江津區長沖鎮魚類養殖場。將其帶回實驗室解剖取鰓進行涂片鏡檢以觀察車輪蟲的活體, 自然空干后的鰓涂片采用干銀法進行染色[19]。車輪蟲的形態描述及測量依據Lom的統一特定方法進行[20]; 齒體定位圖則借助CorelDRAW 11.0繪制; 齒體定位描述則依據Van As和Basson[21]倡導、唐發輝等[22]補充的方法進行。基于形態學測量數據, 利用SPSS和Past3軟件進行種群間的顯著性差異分析與主成分分析(PCA)。

1.2 DNA提取、擴增、測序與序列提交

為了DNA數據獲取的準確性, 用于分子研究的刺紋車輪蟲兩種群[Trichodina centrostrigata(W)與Trichodina centrostrigata(Q)]各自分別進行了兩次(2條序列)與四次(4條序列)純化蟲體的分離與DNA樣本的擴增測序。具體操作為: 每次收集1—2只無菌水洗滌數次的刺紋車輪蟲于1.5 mL的Eppendorf管中, 按照REDExtract-N-AmpTM Tissue PCR Kit (Sigma, St. Louis, USA)試劑盒說明書提取樣本DNA, 隨后保存于–20℃備用。18S rDNA擴增共涉及3對引物和3種PCR反應條件: (1) 82F (5′-GAAACTGGGAATGGCTC-3′)和LSUR (5′-GT TAGTTTCTTTTCCTCCGC-3′)[23], 反應條件為:94℃預變性1min 30s; 94℃變性20s, 58℃退火20s,72℃延伸2min, 35個循環; 72℃再延伸5min; (2) TGF (5′-AACCTGGTTGATCCTGCCAGT-3′)和TG-R(5′-TGATCCTTCTGCAGGTTCACCTAC-3′)[23], 反應條件為: 94℃預變性5min; 94℃變性1min, 56℃退火1min, 72℃延伸2min, 35個循環; 72℃再延伸10min; (3) 18S-F1 (5′-ACCTGGTTGATCCTGC CAGT-3′)和18S-R1 (5′-TGCAGGTTCACCTACG GAAA-3′)[24], 反應條件為: 94℃預變性1min, 56℃退火2min, 72℃延伸2min, 5個循環; 94℃變性1min,58℃退火1min, 72℃延伸2min, 35個循環; 72℃再延伸10min。ITS-5.8S rDNA擴增引物為ERIB10-V(5′-CCGTAGGTGAACCTGCGGAAG-3′)和28S1R(5′-GTGTTTCAAGACGGGTCG-3′)[25], PCR反應條件為: 94℃預變性3min, 94℃變性30s, 54℃退火30s,72℃延伸2min, 35個循環; 72℃再延伸10min。PCR純化產物送至英濰捷基(上海)貿易有限公司完成測序。

本研究共獲得6條刺紋車輪蟲18S rDNA序列,包括T. centrostrigata(W)種群2條序列:T. centrostrigata(W1, MN071225)和T. centrostrigata(W2,MN071226);T. centrostrigata(Q)種群4條序列:T.centrostrigata(Q1, MN071227)、T. centrostrigata(Q2, MN071228)、T. centrostrigata(Q3, MN071229)和T. centrostrigata(Q4, MN071230)。同樣, 共獲得刺紋車輪蟲ITS-5.8S rDNA序列6條, 包括T. centrostrigata(W)種群2條序列:T. centrostrigata(W1,MN071231)和T. centrostrigata(W2, MN071232);T.centrostrigata(Q)種群4條序列:T. centrostrigata(Q1, MN071233)、T. centrostrigata(Q2, MN071234)、T. centrostrigata(Q3, MN071235)和T. centrostrigata(Q4, MN071236)。

1.3 18S rDNA的一級和二級結構分析

通過GenBank中BLAST對本研究所獲的刺紋車輪蟲序列進行序列同源性比對; 使用MEGA6中的Kimura 2-parameter模型計算遺傳距離; 采用MEGA6和BioEdit 7.0.5.3進行變異位點分析。基于自由能最小化利用RNA structure 5.2進行RNA二級結構預測, 參照選自European ribosomal RNA database的二級結構模型, 使用RNAViz 2.0進行手動調整[26]。本研究選取與系統發育相關的18S rDNA的三個高變區(V4、V5和V7區)來分析刺紋車輪蟲的種群變異。

1.4 系統發育樹的構建

將本研究新獲得的18S rDNA序列和從Gen-Bank數據庫中選取的寡膜綱53條完整或部分18S rDNA序列(共59條序列), 以大腎形蟲Colpoda magna(EU039896)和毛板殼蟲Coleps hirtus(AM 292311)為外群, 所有序列在MEGA6中的Clustal W多重比對后, 分別使用MrBayes 3.1.2軟件與CIPRES Science Gateway在線網站構建BI樹與ML樹[27,28], 最后使用FigTree v1.4.2與Photoshop CS3完成系統發育樹的繪制。

2 結果

2.1 形態學重描述

本研究所獲刺紋車輪蟲兩個種群均采自重慶市江津區長沖鎮魚類養殖場的單性吉富系列羅非魚(Oreochromis niloticus×Oreochromis mossambicus)的鰓表; 基于本研究對寄主魚的解剖調查數據: 兩次檢測種群樣本的感染率高而感染強度卻較低(表 1)。

種群1: 刺紋車輪蟲,Trichodina centrostrigata(W)

感染率: 100% (檢查84條, 84條感染)

感染強度: 輕度感染(+)

采集時間: 2017年7月

形態學描述(標本測量數n=14): 蟲體呈圓盤狀,屬中型車輪蟲, 蟲體直徑42.9—57.5 μm (49.4±4.1),附著盤直徑34.9—51.7 μm (41.8±4.2), 齒環直徑21.7—32.4 μm (25.7±3.0), 緣膜寬3.0—4.4 μm(3.8±0.4); 齒體之間嵌合緊密, 齒體縱長10.8—15.7 μm (12.9±1.3), 齒長3.4—5.9 μm (4.7±0.6)。齒鉤寬大粗壯, 齒鉤長4.9—7.0 μm (6.1±0.5), 齒鉤外切緣圓滑與緣膜不平行, 骨突鈍圓且低于外切緣,齒鉤前緣平直, 齒鉤凸點超過Y+1軸, 齒鉤后緣平直或稍彎曲與齒鉤凹點形成“L”形, 無明顯后突起,但有的齒體具有鉤突; 齒鉤連接纖細而齒錐發達,齒錐寬1.6—2.3 μm (2.1±0.3), 在X軸上下大小相似;齒棘長3.8—6.8 μm (4.8±0.7), 呈棒狀, 較直略向前傾, 超過Y+1軸, 齒棘頂點鈍圓, 無明顯棘突; 輻射狀排列的中央顆粒呈棒狀或長條狀; 口圍繞度約360° (圖 1和表 2)。

表 1 羅非魚感染刺紋車輪蟲情況表Tab. 1 Infection data of the T. centrostrigata from cultured tilapia

種群2: 刺紋車輪蟲,Trichodina centrostrigata(Q)

感染率: 100% (檢查7條, 7條感染)

感染強度: 輕度感染(+)

采集時間: 2018年7月

圖 1 刺紋車輪蟲銀染標本的顯微照片與齒體定位圖Fig. 1 Photomicrographs of silver stained specimens and diagrams of the denticle location for T. centrostrigata

形態學描述(標本測量數n=15): 中型淡水車輪蟲, 蟲體呈圓盤狀, 齒體與中央顆粒分布明顯。蟲體直徑42.1—54.7 μm (47.4±3.8), 附著盤直徑35.1—46.3 μm (40.3±3.3), 齒環直徑20.5 —30.9 μm(24.9±2.8), 緣膜寬2.5—4.2 μm (3.5±0.4); 齒鉤長4.4—7.1 μm (5.8±0.6), 齒鉤寬大呈長方形, 骨突鈍圓, 齒鉤外切緣圓滑與緣膜平行且高于骨突, 齒鉤前緣平直或稍彎曲, 齒鉤凸點超過Y+1軸, 齒鉤后緣平直光滑, 具明顯鉤突, 無明顯后突起; 齒鉤連接及齒錐發達, 齒錐寬1.1—2.6 μm (1.7±0.4), X軸上錐形與下錐形比例接近; 齒棘長3.6—6.9 μm (5.0±0.7), 齒棘前傾, 超過Y+1軸, 齒棘頂點尖銳且指向長條狀中央顆粒, 無明顯棘突; 口圍繞度約400°(圖 1和表 2)。

2.2 基于SPSS與PCA對刺紋車輪蟲的種群比較研究

以網狀車輪蟲Trichodina reticulataHirschmann& Partsch, 1955的T. reticulata(S)種群[25]作為種間對照, 通過SPSS軟件對刺紋車輪蟲T. centrostrigata(W)和T. centrostrigata(Q)兩種群進行顯著性差異分析, 結果顯示: 網狀車輪蟲T. reticulata(S)與刺紋車輪蟲T. centrostrigata(Q)在蟲體直徑、附著盤直徑、緣膜寬、齒環直徑、齒體縱長、齒長、齒鉤長、齒棘長以及中央顆粒數九方面的形態特征具有極顯著差異(P<0.01), 在齒錐寬具有顯著差異(P=0.019<0.05); 刺紋車輪蟲T. centrostrigata(W)和T. centrostrigata(Q)種群之間僅在齒錐寬上具有極顯著差異(P=0.003<0.01, 表 3)。

同理, 以網狀車輪蟲T. reticulata(S)作為種間對照, 利用Past3對以上三個種群進行主成分分析,刺紋車輪蟲T. centrostrigata(W)與T. centrostrigata(Q)兩種群在形態學上具有高度的重疊, 而網狀車輪蟲T. reticulata(S)在形態學上明顯區別于T. centrostrigata(Q, 圖 2)。

2.3 基于18S rDNA與ITS-5.8S rDNA的分子特征分析

18S rDNA序列的同源性、遺傳距離及變異位點的分析: 將T. centrostrigata(W)與T. centrostrigata(Q)種群的18S rDNA序列在GenBank中進行BLAST比對, 均與現有的刺紋車輪蟲T. centrostrigata(KP295473)最相似(相似度≥99.9%)。以上三個種群之間的序列相似度為99.8%—100%, 遺傳距離為0—0.001。其中,T. centrostrigata(KP295473)與T. centrostrigata(W)種群之間序列相似度為100%, 遺傳距離為0;T. centrostrigata(KP295473)與T. centrostrigata(Q)種群之間序列相度為99.8%—100%, 遺傳距離為0—0.001;T. centrostrigata(W)與T. centrostrigata(Q)種群之間序列相似度為99.9%—100%, 遺傳距離為0—0.001。7條刺紋車輪蟲的18S rDNA序列經多重比對后, 其覆蓋長度為1326 bp, 與T. centrostrigata(KP295473)進行變異位點分析, 結果顯示:T. centrostrigata(Q1)在第2位點處發生顛換;T. centrostrigata(Q4)在第577位點出現gap (圖 3)。

源料Source來 究 究研研8][1 1][1[7]2][1 3][1[9]4][1 5][1 6][1 7][1 7][1 7][1資圍Adoral° °度繞0° 本36 0° 本40 455o450°ciliary spiral 455°402°0°470o450o450o40o—10—0°—420o—o—o—0°—410 40口)4 80 00 80)410°—)400°—)中Granules 40—)—17(14))3—18(14)4)3 number—15(14顆))410°—粒央—16(14 14 14—16(14 10—11 11 12 12—14(13 11—16(14 13—15(13 12—15(14 12—15(13 10—14(13 12數ins線9(8)9(8)10(8)7(7)8(8)—10(9)8(8)8(6)10(8)9(8)10(8)9(8)10(9)輻Radial p per denticle 6—6—8—6—6—8—7—6—8—5—7—7—8—數2(28)9(26)0(28)9(25)9(27)7(25)9(26)9(26)8(25)5(25)9(26)7(25)9(27)m)體齒Denticle er mb 2(29)nu ent unit: μ 27—3 26—3 24—2 26—3 25—2 24—2 23—2 24—2 23—2 24—2 20—2 24—2 22—2 26—2長6.9 7.0 6.0 6.2 6.0棘Ray th 6.8 5.0 3.8—±0.7)leng 7.8 7.0 3.6—±0.7)5.1 0.6)6.7 5.0—±0.4)4.8 6.1(4.8齒(5.0(5.6 3.2—±0.6)(4.5 4.0—±0.7)(5.2 4.5—±0.5)—(5.3 3.5—±0.6)(4.3(3 5..3 3—±1.0)4.0—±0.7)(5.1 3.1—(4.0 ±3.5—±0.7)(5.2 3.1—±0.5)(4.1 2.7—±0.8)(4.5態. centrostrigata (measurem寬4.0 width 2.3 3.0 Central part 3.1 3.0 1.6—±0.3)1.5 6.7(2 1.1—±0.4)3.0 2.6 2.0 3.9 3.2 3.0錐.1.7(1 2.0—±0.3)齒.6(2 1.0.9—±0.3)1.2—±0.4)(1.0(2—(1 1.5.9—±0.4)1.0.1—±0.2)(1(2 2.2.7—±0.9)2.0.6—±0.3)(2 1.5.8—±0.2)(1 1.6.6—±0.5)(2 1.8.4—±0.4)(2 2.0.5—±0.3)(2計 長7.1)8.0)6.4)7.4)8.5)6.0)6.7)7.0)5.6)7.6)6.9)7.4)統 鉤.1±0.5.8±0.6.3±0.7.2±0.7.0±0.7—.5±1.0.5±0.5.6±0.8.2±0.6.6±0.6.3±0.9.5±0.7.9±0.7征 齒Blade length 7.0)(6 4.4—(5 5.0—4.9—(6 2.8—(5 4.7—(6 4.8—(5 5.0—(5 3.3—(4 5.0—(6 3.6—(4 4.5—(6 4.2—(5 5.0—(5特)Denticle)th 5.9.6)))))))))))學 長6.5.6 6.5.5 5.0.6 5.6.7齒leng 3.4—形(4.7±0 5.7.5 3.3—(4.6±0 7.0.5 4.0—(5.6±0 6.2.6 2.0—(4.1±0 4.0—(5.2±0—4.0—(4.9±0 3.0—(4.3±0 3.3—(4.3±0 6.0.5 4.0—(5.1±0 6.1.6 3.6—(4.5±0 6.7.6 4.1—(5.5±0 5.0.4 3.0—(4.3±0 6.5.7 4.1—(5.0±0群種 長.8 14 ns of T縱—15.7 1.3)1.2)1.5)0.1)齒Denticlepulatio—14.0 0.9)—16.5 span 1.8)—13.0 11 1.2)1.5)1.1)—16.0 1.6).8體蟲10(12.2.9±—14.7(12.0.5±—17.0(15.3±—10—.0 13(12.0).0(12.7±11.0.0(11.3±11—8.2—.7.2.2 10 12(14.2±(10.4±—16.7 10(14.1±—14.1 10(12.2±—15.6 10(13.0±4.0.5)5.0.6)3.0—(3.6±0—3.0—(4.1±0 5.1.4)3.1—(3.6±0 3.9.5)1.6—(2.8±0 3.9.4)2.2—(3.2±0 4.0.5)2.6—(3.2±0 2.4)2.1)1.8)2.8)3.5)2.0)3.9)—26.0—38.0.5 18(21.7±.0 18(19.6±—28.0.0 24(25.8±—24.5.3 17(20.9±—35.1.0 21(28.7±—25.8.1 19(22.5±—32.2.4 20(25.9±4.2)3.9)3.6)4.5)4.9)3.8)5.5)30.0—45.0 6.0±(3 30.0—44.0 7.5±(3 35.0—43.0 8.5±(3 28.6—39.8 5.1±(3 35.7—54.0 6.7±(4 33.2—46.8 9.3±(3 35.4—53.3 2.3±(4據數5.1)或1.0 4.4)3.0 7.0 2.3)4.9)1.0 2.6 4.9)3.6)8.7述o description描38.0—5(43.8±47.0—5(50.3±—31.8—4(41.5±41.5—6(52.8±39.1—5(46.0±42.6—5(49.0±. 無鰭); —: N無or data鰭、、 、差條鰓膚條膚條鰓 鰓 鰓 鰓 鰓皮準); —標±SD國北 西亞墨羅中臺 國壩度邦國州國寧國州值美錫洲慶洲加洲西洲西洲西(平洲那 坪皮洲灣重亞孟亞廣亞廣亞廣值ax(M中沙印拉中梧中南中柳均ean±亞臺 南哥亞羅羅羅鮨野、 非 非 吉魚吉魚吉魚最—M大森氏氏頭、魚鮠羅 魚 羅 、非、非、非i x德倫斯窄鲃簾須克 非 克 尼羅尼羅尼羅—安、、、、缺歧比 羅 比 奧列奧列奧列值羅桑、魚魚魚魚、紋桑性系性系性系14單富: 最魚非非非麗鯪獅莫魚 尼式模8 9計10鯽11莫魚單富: 統te: S 13單富tatistic m群小ode: M群12群群群群群種 種種種種種種 注N o

ITS-5.8S rDNA序列的同源性、遺傳距離及變異位點的分析: 將6條ITS-5.8S rDNA序列進行序列同源性與遺傳距離分析, 結果顯示:T. centrostrigata(W)與T. centrostrigata(Q)種群之間的序列相似度為100%, 遺傳距離為0。將ITS-5.8S rDNA序列進行變異位點分析, 結果顯示T. centrostrigata(W)與T.centrostrigata(Q)種群之間無變異位點。

表 3 基于SPSS的車輪蟲種群統計分析結果Tab. 3 Statistical analysis of trichodinid populations based on SPSS

圖 2 刺紋車輪蟲種群的主成分分析(以網狀車輪蟲為參考對象)Fig. 2 Principal component analysis (PCA) of populations for T.centrostrigata (based on T. reticulata)

圖 3 刺紋車輪蟲3種群的18S rDNA序列變異位點比較Fig. 3 The comparison of variation site among three populations of T. centrostrigata

18S rRNA二級結構的分析: 為了進一步評估刺紋車輪蟲種群變異, 本文對其18S rRNA進行二級結構預測, 結果顯示: 7條刺紋車輪蟲序列在V4、V5和V7三個高變區具有一致的二級結構構型, 且在一級結構上也完全一樣(圖 4和圖 5)。

2.4 系統發育分析

基于18S rDNA序列, 通過BI法與ML法構建的系統發育樹顯示: 所有刺紋車輪蟲聚為一支, 具有高靴攀值(1.00BI, 100%ML)支持, 靠近系統發育樹的頂端; 其次, 刺紋車輪蟲支與2種海水魚類和4種海水貝類寄生車輪蟲聚為一支(1.00BI, 96%ML), 之后再與寄生于淡水類寄主的車輪蟲聚支(圖 6)。

3 討論

3.1 刺紋車輪蟲的系統發育與種群分化

刺紋車輪蟲三個種群的形態學比較表明, 本研究所涉刺紋車輪蟲T. centrostrigata(W)與T. centrostrigata(Q)種群在蟲體大小及各形態特征量度上相似, 而王琴等[18]從單性奧尼系列羅非魚Oreochromis aurea♂×Oreochromis nilotica♀鰓表檢獲的T.centrostrigata(KP295473)種群在蟲體各形態特征上則差異略大, 齒鉤呈棒槌狀, 棒狀的中央顆粒略短。PCA與SPSS分析顯示,T. centrostrigata(W)與T. centrostrigata(Q)種群除在齒錐寬上具有極顯著差異(P=0.003<0.01)外, 在其他形態特征上均不具有明顯差異; 而不同物種之間在各形態特征上具有極顯著性差異。18S rDNA與ITS-5.8S rDNA常用作種間、種內鑒定的分子標記[29,30], 刺紋車輪蟲三個種群之間在18S rDNA的序列相似度(99.8%—100%)、遺傳距離(0—0.001)、變異位點(1處顛換)僅存在微小差異, 但均在種內水平; 基于18S rRNA的二級結構預測表明, 三個種群在V4、V5與V7三個高變區不僅具有一致的二級結構構型, 在一級結構堿基序列上也無差異, 從而支持其同種性。在系統發育樹中, 7條刺紋車輪蟲序列并未按種群聚支。綜上, 結合形態學、分子特征及系統發育綜合分析, 刺紋車輪蟲T. centrostrigata(KP295473)、T. centrostrigata(W)和T. centrostrigata(Q)三個種群之間在蟲體及各形態特征的量度上, 齒鉤、齒棘、中央顆粒形態上, 18S rDNA序列上存在微小的種群差異, 但未出現明顯的種群分化, 這可能是由于寄主羅非魚品系不同而導致的。在系統發育樹中, 刺紋車輪蟲支靠近系統樹的頂端且與海水寄主寄生車輪蟲聚支, 表明其與海水寄主寄生車輪蟲的親緣關系較近, 且在系統進化中分化較晚。這可能是由于羅非魚為廣鹽性的經濟養殖魚類, 在世界各地之間進行廣泛地引種養殖中, 或許在引種過程中的檢疫不嚴格等原因將海水環境中的刺紋車輪蟲帶入淡水領域。

圖 4 刺紋車輪蟲3種群的18S rRNA V4區的比較Fig. 4 The V4 region of the 18S rRNA secondary structure for T.centrostrigata

3.2 寄主偏好性

圖 5 刺紋車輪蟲3種群的18S rRNA V5和V7區的比較Fig. 5 V5 and V7 regions of the 18S rRNA secondary structure for T. centrostrigata

圖 6 基于BI法與ML法構建的18S rDNA系統發育樹Fig. 6 Phylogenetic tree based on 18S rDNA sequences by BI and ML analyses

刺紋車輪蟲首次由Basson等[11]發現于南非的鱸形目魚類: 莫桑比克羅非魚Oreochromis mossambicusPeters, 1852、南方褶唇麗魚Pseudocrenilabrus philanderWeber, 1897、斯氏羅非魚Tilapia sparrmaniiSmith, 1840、倫氏羅非魚Tilapia rendalliBoulenger, 1896與鯉形目淡水魚類: 鯉Cyprinus carpioLinnaeus, 1758的鰓表, 偶見于體表和鰭條。1986年, El-Tantawy和Kazubski[12]在埃及尼羅河三角洲從鱸形目魚類: 尼羅羅非魚Oreochromis niloticaLinnaeus, 1758的鰓表檢獲到刺紋車輪蟲。同年, Van As和Basson[7]在中國臺灣從養殖的莫桑比克羅非魚鰓表發現此蟲種。1992年, Van As和Basson[13]在南非地區多次發現此蟲種, 其寄生于鱸形目寄主長體伴麗魚Hemichromis elongatusGuichenot,1861與窄頭鮨麗魚Serranochromis angusticepsBoulenger, 1907的鰓表、南方褶唇麗魚與安德森羅非魚Oreochromis andersoniCastelnau, 1861的鰓表、體表及鰭、倫氏羅非魚的鰓表、斯氏羅非魚體表及鰭; 寄生于鯉形目寄主鲃Barbussp. 與野鯪Labeo cylindricusPeters, 1852的鰓表、缺簾魚Brycinus lateralisBoulenger, 1900的鰓表及體表, 還寄生于鯰形目的獅紋歧須Synodontis leopardinusPellegrin, 1914的鰓表。1994年, Basson和Van As[9]在中國臺灣的莫桑比克羅非魚的鰓表、皮膚及鰭條均獲得該蟲種。2002年, Rodríguez-Santiago[14]在墨西哥錫那羅亞地區的尼羅羅非魚的鰓表和鰭條上檢獲到該蟲種; 2005年, 唐發輝等[15]在中國重慶地區鯉形目魚類: 鯽Carassius auratusLinnaeus,1758的鰓表獲得該蟲種。2006年, Mitra和Bandyopadhyay[16]在印度從莫桑比克羅非魚的鰓表發現該蟲種。之后, 姜艷妍等[17]在廣西地區于養殖魚塘或自然水體中的單性奧尼系列、吉富系列羅非魚的鰓表檢獲到此蟲。王琴等[18]于2014年在中國重慶江津區養殖魚場的單性奧尼系列羅非魚鰓表檢獲此蟲種; 而在本研究中, 兩次不同時期的采樣均從單性吉富系列羅非魚獲得刺紋車輪蟲。上述研究表明: 刺紋車輪蟲主要寄生于鱸形目的羅非魚,故羅非魚對刺紋車輪蟲具有較明顯的易感性。換言之, 該類病原同時也對羅非魚表現出較顯著的寄生特異性或宿主偏好性。

在本研究中, 盡管兩次調查樣本量不同, 感染率均為100% (種群2樣本量相對較少, 有待進一步深入調查), 但其感染強度較低, 均為輕度感染(表 1)。推測這種高感染率、低感染強度的寄生方式, 有助于刺紋車輪蟲在盡量減輕對寄主傷害的同時來尋求更多寄主的庇護, 以維持自身種群的繁衍。雖然本研究調查涉及的寄主羅非魚暫未表現出明顯的病癥, 但刺紋車輪蟲仍然是一類在水產養殖中不可忽視的潛在病原, 故在羅非魚養殖業中仍值得漁民高度關注。