HBV-DNA熒光定量PCR檢測的臨床意義分析

王修梅，蘭興翠，朱浩

（貴州省黔西南布依族苗族自治州人民醫院，貴州 黔西南 562400）

乙型肝炎病毒（HBV-DNA）定量檢測有利于對于肝臟內乙肝病毒復制程度進行反映，也可體現抗病毒藥物治療的臨床效果。熒光定量PCR檢測逐漸成為乙肝病毒復制進行檢測的常見措施，可最大程度體現慢性乙肝患者病理學分級效能以及肝組織病理情況[1]。本文主要闡述了2017年7月-2018年7月期間收治的25例乙型肝炎病毒（HBVDNA）患者，分析熒光定量PCR檢測的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 基礎資料 回顧性分析2017年7月-2018年7月期間收治的25例乙型肝炎病毒（HBV-DNA）患者的基礎信息，女性樣本13例，男性樣本12例，最大年齡36歲，最小年齡12歲，中位年齡（22.32±2.32）歲。

1.2 方法 實驗儀器主要涵蓋實驗儀器與參比儀器，參比儀器即為Cobas z 480熒光定量PCR檢測儀器，該儀器獲得的臨床檢驗結果即為參比值，實驗儀器即為DA7600熒光定量PCR檢測儀器，依據儀器使用說明書對兩種儀器進行操作，確保存在有效且可靠的實驗數據。選取達安公司研發且提供的HBT核酸定量檢測試劑盒進行處理，采集患者5 mL清晨空腹狀態下靜脈血液進行檢查，溶血標本以及含脂肪標本最高濃度即為1.0×108U/mL，最低濃度即為5.0×102U/mL，遵守試劑相關說明書對HBV-DNA核酸進行提取開展定量檢測，同時在且分別在Roche Light Cycler 480熒光定量PCR檢測儀器以及ABI7500熒光定量PCR檢測儀器實施雙孔平行檢測，依據循序對25例乙型肝炎病毒（HBVDNA）患者實施測量，完成第一次檢查之后間隔2 h實施定第二次檢查，取兩次平均值。

1.3 觀察指標 相對偏倚即為實驗值和參比值之差比上參比值×100%，基于ISO15189規范中要求臨床基因擴增檢驗內檢測系統和要求時系統誤差之比的絕對值低于7.5%。

1.4 統計學方法 本次通過SPSS 19.0統計學軟件對本院參與診治的25例乙型肝炎病毒（HBV-DNA）患者所有數據進行統計分析，X值即為參比儀器檢測結果，Y值即為實驗儀器檢驗結果，予以回歸方程分析，Y=rX+b，開展t檢驗，P＜0.05，統計學有顯著差異。

2 結果

2.1 分析對25例乙型肝炎病毒（HBV-DNA）患者實施兩種儀器檢測的情況 分析兩種儀器兩次平均檢測結果相關性，均＞0.976，表示儀器、儀器濃度范圍比較適合，不同濃度存在不同的回歸方程，表示兩臺儀器熒光定量PCR檢測均符合線性要求符合。檢測濃度為5.0×102-1×104U/mL，顯性方程即為0.997X-0.0055，r2=0.995；檢測濃度為1×105-1×106U/mL，顯性方程即為0.993X-0.0063，r2=0.991；檢測濃度為1×107-1×108U/mL，顯性方程即為0.995X-0.0084，r2=0.991。

2.2 分析兩臺儀器檢測25例乙型肝炎病毒（HBV-DNA）患者的相對偏倚 本文涉及的ABI7500熒光定量PCR檢測儀器和Roche Light Cycler 480熒光定量PCR檢測儀器檢測結果偏倚百分比即為3.21，均小于7.5%，表示兩儀器存在一致性的較好定量檢測結果，存在處于臨床能接受范圍內的系統誤差。

3 討論

如不能對乙型肝炎病毒（HBV-DNA）患者進行正規治療，十分容易產生肝硬化、肝炎，嚴重的可能發生肝癌[2]，針對乙型肝炎病毒（HBV-DNA）患者需要定量檢查HBVDNA，有利于準確診斷和評估病情，對于提升治療效果十分有利。臨床上HBV-DNA檢查方法主要即為熒光定量PCR檢測[3-4]，隨著近年來醫學技術的不斷進步，熒光定量PCR檢測技術逐漸完善，出現多種多樣的儀器設備[5]。

綜合以上結論，HBV-DNA中Roche Light Cycler 480熒光定量PCR檢測儀器和ABI7500熒光定量PCR檢測儀器的一致性較好，適合進行聯合使用。