抗感染類藥物國家藥品標準物質的發展與展望

姚尚辰，馮艷春，許明哲

中國食品藥品檢定研究院，北京 102629

國家藥品標準物質系指供國家藥品標準中藥品的物理、化學及生物學等測試用，具有確定的特性或量值，用于校準設備、評價測量方法、給供試藥品賦值或鑒別用的物質［1,2］。標準物質是藥品標準實施的物質基礎，是藥品質量檢驗中使用的實物標準。標準物質分為標準品與對照品，系指用于鑒別、檢查、含量測定的標準物質。標準品系指用于生物檢定或效價測定的標準物質，其特性量值一般按效價單位（或μg）計；對照品系指采用理化方法進行鑒別、檢查或含量測定時所用的標準物質，其特性量值一般按純度（%）計［1］。結合當前藥品質量標準的發展、藥品質量監管的需要以及標準物質質量管理的要求，抗感染類藥物國家藥品標準物質在研制品種的確定、分析標定、質量監測等方面不斷調整，以保證抗感染類藥物國家藥品標準物質的質量和使用。中國藥典2020 年版實施在即，本文結合近年來抗感染類藥物國家藥品標準物質的變化情況，對該類標準物質在新版藥典和國家藥品質量標準中的概況、現狀以及發展方向進行介紹。

1 抗感染類藥物國家藥品標準物質概況

抗感染類藥物標準物質既有標準品也有對照品。中國藥典2020 年版二部各論新增抗感染類藥物2 個品種4 個制劑，涉及新增標準物質5 個品種，其中供含量測定用2 個品種，供檢查用3 個品種。中國藥典2020 年版四部通則8062 中，抗感染類藥物標準物質共收載193 個品種，包括標準品21個品種，對照品172 個品種。對照品中含量測定用114 個品種，鑒別用4 個品種，檢查用45 個品種，系統適用性試驗用混合雜質對照品9 個品種。抗感染類藥物國家藥品標準物質除中國藥典收載的品種以外，還包括國家藥品標準收載的標準物質，目前共343 個品種，其中標準品41 個品種，對照品302個品種。在對照品中含量測定用105 個品種，檢查用177 個品種，鑒別用10 個品種，系統適用性試驗用混合雜質對照品10 個品種。隨著當前藥品質量標準的發展和藥品質量監管形勢的需要，抗感染類藥物國家藥品標準物質的品種逐年增加，每年新增標準物質的品種約為10%。

2 品種和用途的發展與豐富

中國藥典“國家藥品標準物質制備指導原則”中規定，國家藥品標準物質是根據國家藥品標準制定及修訂的要求，確定藥品標準物質的品種。近年來，在標準物質品種的建立計劃中，除了以國家藥品質量標準為基本依據以外，隨著仿制藥質量和療效一致性評價和藥品注冊申報工作的要求，對已知雜質或混合雜質對照品的需求日益強烈。抗感染類藥物標準物質作為藥品質量監督工作開展的重要支撐，持續開展對相關品種單獨雜質和系統適用性試驗用混合雜質對照品的研究和建立。

2.1 系統適用性試驗用混合雜質對照品從中國藥典2015 年版開始，對色譜系統較為復雜，特定雜質的單品不易獲得或不穩定的一些抗感染類藥物品種，采用系統適用性試驗混合雜質對照品的方式，考察色譜系統的適應性，并對相關的已知雜質進行定位。到目前為止，共有10 個抗感染類藥物品種在有關物質或含量測定項下使用系統適用性試驗混合雜質對照品，如阿莫西林系統適用性對照品用于阿莫西林原料及其制劑含量測定和有關物質系統的考察；環孢素原料及其制劑在有關物質系統中采用環孢素系統適用性對照品評價系統。另有5 個標準物質在說明書中提供了標準圖譜，供藥品檢驗時使用，如硫酸慶大霉素組分檢查項下規定需與慶大霉素標準品的標準圖譜一致；麥白霉素組分測定時，根據麥白霉素標準品組分標準圖譜判斷組分峰位。

按質量標準的規定，在使用系統適用性對照品時，要求當次實驗所得到的對照品液相圖譜應用標準圖譜一致。在系統適用性對照品的說明書中會提供相應的標準圖譜，其中標注的色譜柱信息，為獲得該對照品標準圖譜時所使用的色譜柱，并非要求使用單位必須采用與此相同的色譜柱牌號和型號，僅為給使用實驗室提供相關可借鑒的信息，在實際實驗中可以采用其他色譜柱或通過優化色譜條件等達到理想狀況。在與標準圖譜比較時，使用實驗室需主要關注色譜峰的出峰個數、分離定位等情況與標準圖譜是否一致，對色譜峰出峰時間等信息僅作為參考即可。

使用單位以混合雜質作為系統適用性試驗用對照品，可以降低實驗操作的復雜性，降低溶液配置的難度，只需要配置一份對照品溶液，即可得到相關雜質的分離情況等系統參數，并可對多個已知雜質進行定位。同時，采用混合雜質對照品也可降低使用單位的實驗成本，尤其對于藥品生產企業和研發單位，可以降低其藥品研發和質量控制的成本。以阿奇霉素系統適用性對照品為例，其對照品的組成是以阿奇霉素為主成分，并混合有阿奇霉素雜質Q、阿奇霉素雜質R 等8 個已知特定雜質的混合物，含各雜質的相對純度約為2%。可見，采用上述系統適用性對照品，即可一次性獲得多個雜質的定位，同時完成系統考察工作，給實驗提供極大的便利。故系統適用性試驗用或峰定位用混合雜質對照品品種的研制是近年來的工作重點之一。

2.2 單個已知雜質對照品隨著對藥品中雜質的深入研究和質量標準提高的需求，對單個已知雜質對照品的需求日益強烈。抗感染類藥物雜質對照品建立了按品種類別研制系列單個雜質對照品的工作方式，在確立研究品種后與該品種的雜質譜研究相關聯，最終對接該品種的質量標準提高和增修訂工作，為藥品審評審批和質量監管服務。如對當前臨床大量使用的咪唑類抗真菌藥物，酮康唑、伊曲康唑等4個主要品種，共建立了27個單個雜質對照品。同時，對這些雜質對照品采用合理的方法進行賦值，由定性用對照品上升為定量用對照品，增強其使用目的，從而為藥品質量研究提供更為科學有力的支撐。

3 標定系統的發展與完善

標準物質的標定包括定性鑒別、結構鑒定、理化性質、純度分析、均勻性檢驗、定值等符合標準物質預期用途的實驗。根據中國藥典“國家藥品標準物質制備指導原則”以及ISO 17034“標準物質/標準樣品生產者能力的通用要求”［3］，近年來不斷調整抗感染類藥物國家藥品標準物質的標定方式，主要體現在定值方式的逐步轉變、均勻性檢驗和穩定性檢驗的完善等方面。

3.1 賦值方式對照品的定值原則遵循質量平衡原則，即：在測定一個對照品含量時，水分、有機溶劑、無機雜質和有機成分測定結果的總和應為100%。由上述原則可見，在對一個對照品定值時，只有保證水分、無機雜質等參與質量平衡法計算的各項目的準確測量和溯源性，才能夠減小對照品最終定值的不確定度，保證定值結果的準確性。采用多個實驗室協作定值是抗感染類藥物標準物質常用的定值方式之一。以往，在采用多個實驗室協作定值的方式時，均選擇具備標準物質定值的必備條件和相關資質的實驗室，按規定的測量方法，與上批或國際標準物質進行量值比對傳遞的方式協作定值。近年來，標準品仍采用上述方式協作定值，但對照品由于定值策略由質量平衡法逐步完全替代了量值傳遞的定值手段，因此在多個實驗室協作時，不再以量值比對為主，而主要對質量平衡法中參與計算的參數進行協作測量，比如水分、干燥失重、純度等項目，從而保證質量平衡法定值的準確性。與上批或國際對照品的量值比對，一般作為對照品量值的驗證。

隨著雜質對照品研究品種的增加，發現在此類對照品定值時，出現了新的問題。由于雜質對照品的候選物多為單獨合成制備的物質，與已獲批生產的藥品原料不同，其生產過程沒有統一和規范的生產工藝，也沒有嚴格的質量控制標準，因此其終產品可能含有未知的有機溶劑殘留，且殘留量不確定。以往，多采用干燥失重來表征對照品候選物中的水分和揮發性物質的總和，但對于含有結晶水、高溫不穩定等品種，干燥失重法存在問題，且無法全面了解標準物質的內在質量狀況。另外，在采用質量平衡法對雜質對照品定值時，殘留溶劑測定結果的準確性也直接影響了賦值的準確性。針對上述問題，隨著分析技術的提升，現應用雙柱定性系統對殘留溶劑進行定性和定量分析［4］，提升了雜質對照品定值的準確性。

在抗感染類藥物標準物質定值時，除質量平衡法和量值比對方法互相驗證外，近年來根據各品種的特性，對于首次研究建立的對照品，開始采用核磁定量的方法進行量值確證，并采用定量核磁法測定雜質與主成分的校正因子［5-8］，從而使標準物質量值更為精準，為藥品的相關雜質研究提供支撐。

3.2 均勻性檢驗抗感染類藥物標準物質的均勻性檢驗，包括對制備分裝前的候選標準物質的均勻性初檢以及在制備分裝成最小包裝單元的候選標準物質的均勻性檢驗。在均勻性初檢時，特別關注不易均勻的候選標準物質，如有需要，在制備前和制備過程中采用精制、混合、粉碎等措施，得到均勻性良好的候選物后，再進行制備分裝。對制備分裝成最小包裝單元的候選標準物質均進行均勻性檢驗，以保證其特性量值的變動在可接受范圍。取樣會根據候選物的數量特性等內容，以隨機抽樣或分段抽樣的方式進行，檢驗項目選擇對應對照品標示的特性量值進行均勻性檢驗。只有均勻性檢驗合格后，方開展后續的穩定性檢驗和特性量值等標定實驗。

3.3 穩定性檢驗分裝成最小包裝單元的標準物質候選物在均勻性檢驗合格后，進行穩定性檢驗。穩定性檢驗包括短期穩定性和長期穩定性，短期穩定性是確定標準物質運輸和貯存條件的依據，長期穩定性是在規定的貯存條件下，標準物質/標準樣品特性的穩定性［9］。對于標準物質候選物，現全部進行短期穩定性檢驗，從而科學合理的確定或優化標準物質的運輸和貯存條件，保證標準物質的質量特性。

4 標準物質生命周期的質量監測

近年來，抗感染類藥物國家藥品標準物質開始每年持續開展質量監測工作，也就是對在售的標準物質特性量值進行定期復測，以確認其量值穩定，可以繼續使用［9］。對質量監測的時間間隔一般依據先密后疏的原則，并根據品種特性和標準物質的既定用途，安排監測。質量監測選擇易于變化和具有代表性的特性量值進行監測，比如含量測定用對照品，選擇性狀、水分（干燥失重）、純度等項目，采用不低于定值方法精密度和適宜靈敏度的測量方法，之后采用合理的統計學方法與原標化結果進行對比和評價，確保在售標準物質的質量，同時也積累了抗感染類藥物標準物質各品種的穩定性數據，為后續標準物質原料候選物的選擇提供支持。

5 展望

通過近幾年抗感染類藥物國家藥品標準物質的發展現狀可見，該類國家藥品標準物質持續緊密聯系最新藥品質量標準、藥品審評審批的技術要求以及標準物質的質量規范，不斷調整和完善研究標定的程序和方式，抗感染類藥物國家藥品標準物質從品種數量到質量上逐步提升，以確保對藥品監管提供最有力的保障。當前，隨著藥品一致性評價工作和申報技術要求的細化，對藥品雜質的研究也越來越深入，后續對于混合和單個已知雜質對照品的建立和研究仍是未來發展的重點。此外，對于不穩定或獲得困難且制備成本昂貴的雜質對照品，還應借助各品種雜質研究的海量數據，以數字化表征和構建數字化標準物質庫的方式解決雜質對照品的問題。