外周血淋巴細胞免疫表型檢驗評價惡性腫瘤患者細胞免疫功能的價值分析

孫 翔， 拓紅曉

(1. 河南理工大學第一附屬醫院(焦作市第二人民醫院)檢驗科， 河南 焦作 454100； 2. 焦作煤業集團有限責任公司中央醫院檢驗科， 河南 焦作 454100)

機體免疫功能與惡性腫瘤發生發展間具有密切聯系，惡性腫瘤患者往往存在免疫功能不全現象。細胞免疫在抗腫瘤免疫中具有重要作用，故對細胞免疫功能狀態進行評估，能夠為患者病情、治療方案的制定提供依據[1]。T淋巴細胞亞群在惡性腫瘤發生發展中發揮的作用已獲諸多研究證實，但目前關于其他淋巴細胞亞型與惡性腫瘤間的關系尚無諸多研究報道[2-3]。鑒于此，本研究將分析外周血淋巴細胞免疫表型檢驗評價惡性腫瘤患者細胞免疫功能的價值。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年1月至2019年12月本院治療的86例惡性腫瘤患者作為觀察組，并選取同期到本院體檢健康者90例作為對照組。觀察組患者均經病理檢查明確診斷，且無肝、腎功能不全或嚴重感染。觀察組：男54例，女32例；年齡46～78歲，平均(59.83±3.40)歲；腫瘤類型：生殖系統腫瘤15例，胃腸腫瘤28例，呼吸系統腫瘤43例；腫瘤未轉移49例，轉移37例。對照組：男57例，女33例；年齡44～78歲，平均(59.91±3.45)歲。簽署知情同意書，獲醫學倫理委員會批準。兩組性別、年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

采集入選者空腹靜脈血2 ml，保存于EDTA-K2抗凝管，向外周血標本中分別加入20 μl熒光標記的CD3、CD4、CD8、CD56、CD19單克隆抗體，孵育后將細胞裂解液加入，溶解紅細胞，通過磷酸緩沖鹽溶液沖洗，采用流式細胞儀(BD FACS Calibur)測定淋巴細胞群，包括B淋巴細胞、T淋巴細胞亞群、自然殺傷細胞，于直方圖中將淋巴細胞群框出，并選取5 000個淋巴細胞，對其中各標記細胞數量與其所占百分比進行計算。

1.3 評價指標

分析兩組、觀察組中不同化療周期及腫瘤轉移與否患者的淋巴細胞免疫表型檢測結果。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 兩組淋巴細胞免疫表型檢測結果比較

觀察組CD3+CD4+、總T淋巴細胞低于對照組，CD3+CD8+、CD3+CD56+高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。詳見表1。

表1 兩組淋巴細胞免疫表型檢測結果比較

2.2 觀察組中不同化療周期患者淋巴細胞免疫表型檢測結果比較

未化療、化療1～6周期患者CD3+CD4+低于對照組，化療>6周期患者CD3+CD4+高于未化療患者；未化療、化療1～6周期患者CD3+CD8+高于對照組，化療>6周期患者CD3+CD8+低于未化療患者；未化療、化療不同周期患者CD3+CD56+高于對照組；未化療患者總T淋巴細胞低于對照組，不同化療周期患者CD3+CD56+、總T淋巴細胞高于未化療者，差異有統計學意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 觀察組中不同化療周期患者淋巴細胞免疫表型檢測結果比較

2.3 觀察組中腫瘤未轉移、轉移患者淋巴細胞免疫表型檢測結果

腫瘤轉移患者CD3+CD4+低于腫瘤未轉移患者，CD3+CD8+、CD3+CD56+高于腫瘤未轉移患者，差異有統計學意義(P<0.05)；腫瘤轉移、未轉移患者總T淋巴細胞比較差異無統計學意義(P>0.05)。詳見表3。

表3 觀察組中腫瘤未轉移、轉移患者淋巴細胞免疫表型檢測結果比較

3 討論

惡性腫瘤發生是腫瘤細胞逃避機體免疫監視的結果，細胞免疫功能在腫瘤發生、發展及預后評估中發揮著重要作用，目前依據腫瘤與細胞免疫功能狀態相關性的抗腫瘤細胞免疫治療措施在臨床逐漸推廣，故對患者細胞免疫功能進行準確評估有利于指導臨床治療[4-5]。細胞免疫應答主要由T淋巴細胞介導，目前T淋巴細胞亞群檢測已被廣泛用于自身免疫性疾病、心血管疾病及肝臟疾病等診治中[6]。

CD3+是細胞免疫主要活性細胞，CD3+CD4+、CD3+CD8+細胞分別為輔助性、抑制性T淋巴細胞代表，前者能夠達到正向調節細胞免疫功能的作用，增強吞噬細胞抗感染能力，達到抗腫瘤效果，而后者主要發揮負向調節作用，抑制機體免疫應答反應[7-8]。CD3+CD56+屬于NKT細胞，由多種細胞因子誘導產生，能夠發揮細胞溶解效應，參與腫瘤、自身免疫疾病及感染疾病的發生[9]。蘇麗等[10]研究中指出，惡性腫瘤患者CD3+CD4+低于健康組，CD3+CD8+高于健康組，患者伴有不同程度的免疫功能紊亂現象。本研究結果顯示，觀察組CD3+CD4+、總T淋巴細胞低于對照組，CD3+CD8+、CD3+CD56+高于對照組，腫瘤轉移患者CD3+CD4+低于腫瘤未轉移患者，CD3+CD8+、CD3+CD56+高于腫瘤未轉移患者，由此可見，惡性腫瘤患者處于免疫失衡狀態，機體內免疫抑制作用較免疫輔助作用強，且隨著患者病情的進展，腫瘤細胞擴散嚴重，加重機體免疫抑制現象。此外，患者機體內細胞免疫功能將促進NKT細胞增殖，腫瘤細胞轉移促使NKT細胞抗腫瘤作用增強。化療已成為惡性腫瘤治療中重要手段，有利于延長患者生存期，改善預后。經研究發現，惡性腫瘤患者接受化療治療時雖能夠將腫瘤細胞殺滅，但也將殺滅部分健康免疫細胞，產生雙重免疫調節作用[11-12]。本研究中；未化療、化療1～6周期患者CD3+CD4+低于對照組，化療>6周期患者CD3+CD4+高于未化療患者；未化療、化療1～6周期患者CD3+CD8+高于對照組，化療>6周期患者CD3+CD8+低于未化療患者；未化療、化療不同周期患者CD3+CD56+高于對照組；未化療患者總T淋巴細胞低于對照組，不同化療周期患者CD3+CD56+、總T淋巴細胞高于未化療者。提示化療對腫瘤細胞殺傷能力較強，持續的化療能夠調節患者免疫抑制狀態，改善機體免疫功能，有利于恢復機體免疫平衡狀態。

綜上所述，惡性腫瘤的發生發展與細胞免疫功能有著密切關系，患者可能出現CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD56+等細胞比例的改變，故對上述指標進行檢測有利于監視腫瘤免疫狀態，評估細胞免疫功能。