P16 在尖銳濕疣組織中的表達及意義

范婉婷，饒 蘭，馬 虎

（1.湖北省荊門市第一人民醫(yī)院病理科，湖北 荊門 448000；2.湖北省荊門市第一人民醫(yī)院皮膚性病科，湖北 荊門 448000）

尖銳濕疣（Condyloma Acuminatum，CA）是由人乳頭狀瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）感染所致的一種常見的性傳播疾病，具有增生快，治療后易復發(fā)的特點。目前，P16作為替代指標已被廣泛應用于HPV 相關疾病的診斷和鑒別，而其在尖銳濕疣中的應用尚待研究。本研究探討P16在尖銳濕疣皮損中的表達情況，研究其在尖銳濕疣發(fā)生發(fā)展中的作用，為診斷、鑒別診斷提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集我院病理科2017 年9 月～2018 年12 月女性外陰尖銳濕疣活檢標本75 例，年齡（19 ～60）歲，平均45.5 歲；另取30 例成年男性正常包皮組織作為對照組。組織均由10%中性福爾馬林固定，免疫組化采用SP 法，P16鼠抗人單克隆抗體購自邁新公司，免疫顯色試劑盒購自Dako 公司，操作步驟按說明書進行。用PBS 代替一抗作陰性對照，用已知陽性片作陽性對照。

1.2 免疫組化結(jié)果判斷 由兩位高年資病理醫(yī)師在雙盲條件下獨立評定。P16表達于鱗狀上皮細胞的細胞質(zhì)和細胞核，陽性表達呈棕黃色。免疫染色分為陰性、局灶斑片狀弱陽性、彌漫性強陽性。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 24.0 軟件進行數(shù)據(jù)處理，計量資料以（）表示，采用t 檢驗，計數(shù)資料以n、%表示，采用χ2檢驗，當P ＜0.05 時表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

P16在尖銳濕疣中陽性表達率為62.67%（47/75），在正常皮膚組織中均為陰性，兩者間差異有統(tǒng)計學意義（P ＜0.05），見圖1。

3 討論

P16基因，又稱CDKN2A 基因，是近年來發(fā)現(xiàn)的與細胞周期調(diào)控密切相關的抑癌基因。P16基因直接參與了細胞周期的調(diào)控，其產(chǎn)物P16蛋白是細胞周期素依賴性激酶的抑制因子。Serrano M 等[1]首次報告人類P16蛋白，其表達情況與細胞增殖及分裂密切相關。

多項研究表明，P16的表達與HPV 感染有關，可能參與尖銳濕疣的發(fā)生發(fā)展。Yiu ZZ 等[2]研究P16在鱗狀上皮中的表達情況，發(fā)現(xiàn)HPV 病毒基因使腫瘤抑制因子P53和Rb 失活，并且上調(diào)P16的表達。Zhang G 等[3]研究指出彌漫性P16免疫染色與HPV感染導致的上皮內(nèi)病變高度相關。Kazlouskaya V等[4]通過免疫組織化學方法，發(fā)現(xiàn)75%的尖銳濕疣病灶表現(xiàn)為P16蛋白的散發(fā)性和局灶性陽性染色，而正常相鄰皮膚均為陰性。HPV 病毒感染導致視網(wǎng)膜母細胞瘤（Rb）蛋白功能喪失，同時P16的表達與功能性Rb 之間存在反向關系，進而引起P16蛋白失去反饋抑制，出現(xiàn)高表達；另外，P16基因的甲基化突變失活也使得無功能的P16蛋白的表達增加[2]。

另外，有研究表明，P16蛋白可作為尖銳濕疣與相關疾病的鑒別指標。樂桂花[5]研究指出P16在子宮頸良性鱗狀上皮中呈陰性表達，而在HPV 感染導致的不同級別鱗狀上皮內(nèi)病變中，P16的表達有明顯差異，級別越高，P16的表達就越強。郭書萍等[6]對尖銳濕疣、鮑溫樣丘疹病及鮑溫病皮損進行研究，指出P16蛋白在HPV 感染皮損中的表達情況均高于未感染HPV 的正常皮膚黏膜，同時，鮑溫樣丘疹病及鮑溫病中的表達均高于尖銳濕疣。Cheah PL 等[7]研究發(fā)現(xiàn)所有正常的鱗狀上皮不表達P16，P16免疫陽性可作為高危人乳頭狀瘤病毒感染基因組整合的替代標記物，同時用于尖銳濕疣與陰道上皮內(nèi)瘤變（VIN）的鑒別。Maniar KP 等[8]研究指出，P16在尖銳濕疣中為斑片狀/弱染色，但在高度VIN 病變中為彌漫性/強染色，并指出P16可作為尖銳濕疣與高度VIN 區(qū)分開來的方法。

本研究發(fā)現(xiàn)P16蛋白在尖銳濕疣中陽性表達率顯著高于正常皮膚組織，提示HPV 感染人表皮組織后，P16蛋白的過度表達可能是機體對HPV 感染引起細胞異常增殖的一種反饋調(diào)節(jié)，P16蛋白的表達情況可作為尖銳濕疣的輔助診斷指標。另外，多項研究表明，P16蛋白在鱗狀上皮異型增生病變中的表達情況顯著高于在尖銳濕疣中的表達，提示HPV 感染人表皮組織后引起P16蛋白過度表達，P16蛋白又進一步促進了鱗狀上皮的異型轉(zhuǎn)化，進而表明P16蛋白可作為尖銳濕疣與鱗狀上皮異型增生病變的鑒別指標。

綜上所述，P16蛋白參與了尖銳濕疣的發(fā)生發(fā)展，可作為尖銳濕疣診斷及鑒別診斷的有用指標。