酶聯(lián)免疫法篩查HIV抗體在艾滋病診斷中的應(yīng)用效果探討

馮育英，趙利娟，黃瑋，燕學(xué)強(qiáng)

（長(zhǎng)治醫(yī)學(xué)院附屬和平醫(yī)院 檢驗(yàn)科，山西 長(zhǎng)治）

0 引言

艾滋病（AIDS）是臨床醫(yī)學(xué)高危疾病，又稱獲得性免疫缺陷綜合征，主要因感染HIV所致；患者病癥表現(xiàn)為持續(xù)發(fā)燒、虛弱、盜汗、全身淋巴結(jié)腫大等，AIDS可通過(guò)性接觸、血液、母嬰傳播等途徑傳播，具有極高的危害性，是威脅人類健康的主要疾病之一[1]。目前，臨床中尚無(wú)可治愈AIDS的方法，其致死率高達(dá)100%；大量研究顯示，盡早發(fā)現(xiàn)AIDS，并予以積極治療，有助于提高患者生存質(zhì)量與生活質(zhì)量[2]。因此，在AIDS防治工作中，如何有效、準(zhǔn)確、快速的篩查，成為醫(yī)學(xué)界亟需解決的問(wèn)題。本文對(duì)我院收治的16760例患者進(jìn)行抽血檢驗(yàn)，分析ELISA法對(duì)篩查HIV抗體的價(jià)值，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

篩選2018年1月至2019年12月我院住院部術(shù)前及門(mén)診的輸血前感染檢測(cè)16760例患者，采用ELISA法對(duì)所有患者進(jìn)行初篩檢測(cè)，抽取患者3～5 mL肘靜脈血液檢測(cè)，初篩陽(yáng)性結(jié)果共計(jì)28例，其中男性18例、女10例，年齡18～60歲，平均（37.8±6.6）歲，所有患者對(duì)研究知情，并自愿參與。排除合并有心理障礙、腦器質(zhì)性疾病、嚴(yán)重癲癇等患者；排除存在惡性腫瘤、嚴(yán)重機(jī)體感染、肝腎功能不全患者；排除中途退出研究者。

1.2 方法

對(duì)16760例患者采集清晨空腹血液3～5 mL作為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，由專業(yè)人員對(duì)血液標(biāo)本進(jìn)行離心處理，留取上清液保存于低溫環(huán)境，待檢。對(duì)HIV抗體采用ELISA法進(jìn)行篩查。相關(guān)設(shè)備：奧地利TICAN公司提供的（sunrise型號(hào)）酶標(biāo)儀、鄭州安圖生物工程有限公司提供的（安圖iwo-960型號(hào)）洗板機(jī)、煙臺(tái)澳斯邦股份有限公司提供的瑞士HAMILTON公司生產(chǎn)的（ML.STAR.CH.8型號(hào)）前處理器加樣工作站、微量加樣器（上海求精生化試劑公司）、山東天愛(ài)醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)的真空采血管、Autoblot System 20全自動(dòng)蛋白印跡儀（MP生物醫(yī)學(xué)亞太私人有限公司）、上海英旻泰生物技術(shù)有限公司提供HIV（1+2）型抗體免疫印跡試劑盒、HIV-1/2 ELISA試劑2（珠海麗珠試劑公司提供）、HIV-1/2 ELISA試劑1（北京萬(wàn)泰試劑公司提供），由專業(yè)檢測(cè)人員依照設(shè)備說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

采用ELISA方法進(jìn)行HIV抗體初篩，對(duì)檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果，進(jìn)行2次ELISA復(fù)核，并用ELISA1、ELISA2表示，對(duì)初篩陽(yáng)性患者用免疫印跡試驗(yàn)進(jìn)行證實(shí)，根據(jù)“全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范（2009年）”[3]中相關(guān)操作流程進(jìn)行。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

確證標(biāo)準(zhǔn)：①不確定：進(jìn)行二次檢測(cè)時(shí)，無(wú)法確診為陽(yáng)性，但患者存在病毒特異性條帶；②陰性：p17抗體無(wú)病毒特異性條帶或無(wú)其他條帶；③陽(yáng)性：經(jīng)證實(shí)存在pol帶或兩條gag帶（p55、p24、p17）與env帶（gp40/gp160和gp120）。

復(fù)核標(biāo)準(zhǔn)：對(duì)初篩HIV抗體陽(yáng)性者，經(jīng)2次ELISA復(fù)核顯示，ELISA1、與ELISA2任何一個(gè)陽(yáng)性，或兩個(gè)均陽(yáng)性，都需進(jìn)行免疫印跡試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.0分析，計(jì)量資料以（±s）表示，經(jīng)t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料經(jīng)χ2檢驗(yàn)，以（%）表示，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)于初篩HIV陽(yáng)性患者確證與復(fù)核結(jié)果

統(tǒng)計(jì)顯示，本組16760例檢測(cè)標(biāo)本中，28例復(fù)核雙陽(yáng)性，確證結(jié)果雙陽(yáng)性26例，復(fù)核結(jié)果與確證結(jié)果符合率92.86%，其中1例陰性，1例ELISA1（+）/ELISA2（-）復(fù)核結(jié)果中，經(jīng)免疫印跡試驗(yàn)確證，為不確定，見(jiàn)表1。

表1 統(tǒng)計(jì)初篩陽(yáng)性標(biāo)本確證與復(fù)核結(jié)果（%）

2.2 ELISA法初篩HIV陽(yáng)性標(biāo)本比較確證結(jié)果與復(fù)核ELISA1（S/CO值）

研究顯示，ELISA法初篩檢車HIV陽(yáng)性標(biāo)本28例中，確證結(jié)果不確定S/CO值平均（7.92±2.33）、區(qū)間6～9.9，陰 性S/CO值 平 均（5.17±0.45）、區(qū) 間1～5.8，陽(yáng) 性S/CO值平均（17.03±3.17）、區(qū)間9.9～38。根據(jù)確證 結(jié)果顯示，S/CO值＞9.9陽(yáng) 性100.00%符合、6＜S/CO值＜9.9陽(yáng)性50.00%符合，1＜S/CO值＜5.9陽(yáng)性不符合。本研究ELISA法初篩28例HIV陽(yáng)性標(biāo)本中，確證結(jié)果符合率為92.86%，詳見(jiàn)表2。

表2 對(duì)比確證結(jié)果與復(fù)核ELISA1（S/CO值）結(jié)果（%）

3 討論

AIDS是臨床常見(jiàn)傳染性疾病，目前醫(yī)學(xué)無(wú)法治愈該疾病，其死亡率極高，屬于全球性衛(wèi)生問(wèn)題，對(duì)人類生命安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅。大量流行病學(xué)調(diào)查顯示，我國(guó)AIDS發(fā)病率在近年來(lái)呈現(xiàn)明顯增高趨勢(shì)，且大多感染者為青壯年人群。一般來(lái)說(shuō)，AIDS具有潛伏期長(zhǎng)，多發(fā)于患者性生活活躍階段[4]。患者一旦感染AIDS可造成自身免疫系統(tǒng)的明顯下降，進(jìn)而誘發(fā)多種并發(fā)疾病，如口腔霉菌、肺結(jié)核、腸炎、肺炎、腦炎、念球菌、肺孢子蟲(chóng)、帶狀皰疹等多種感染性疾病，隨著病情進(jìn)展，不僅對(duì)患者生活質(zhì)量、心理健康等造成嚴(yán)重影響，同時(shí)極易誘發(fā)各種惡性腫瘤疾病，威脅患者生命[5]。

目前，世界范圍內(nèi)醫(yī)學(xué)界對(duì)AIDS尚無(wú)統(tǒng)一治療標(biāo)準(zhǔn)，受病毒突變率影響，極大阻礙相關(guān)治療措施的研發(fā)，導(dǎo)致其治愈率幾乎為零[6]。加之，我國(guó)AIDS感染率的不斷升高，如何有效防控AIDS，早期準(zhǔn)確、有效、快速地檢出HIV病毒顯得至關(guān)重要。目前，臨床對(duì)于AIDS篩查方法較多，如斑點(diǎn)免疫膠體金法、放射免疫沉淀試驗(yàn)、免疫印跡試驗(yàn)、免疫熒光試驗(yàn)、明膠顆粒聚集試驗(yàn)、ELISA法等，選擇一種簡(jiǎn)單、快捷、有效的篩查方法，成為臨床研究重點(diǎn)[7]。

鑒于此，本研究對(duì)16760例患者血液標(biāo)本采用ELISA法檢測(cè)，結(jié)果顯示，初篩HIV陽(yáng)性患者28例；ELISA法在HIV抗體檢測(cè)中雖然具有良好的診斷準(zhǔn)確率，但仍然無(wú)法排除假陽(yáng)性的問(wèn)題[8]；對(duì)此，本研究對(duì)初篩陽(yáng)性患者進(jìn)行復(fù)核試驗(yàn)與免疫印跡試驗(yàn)檢測(cè)。結(jié)果顯示，28例篩查陽(yáng)性，27例復(fù)核結(jié)果雙陽(yáng)性，確證結(jié)果陽(yáng)性26例，復(fù)核結(jié)果與確證結(jié)果符合率96.30%。其中1例復(fù)核結(jié)果雙陽(yáng)性，經(jīng)免疫印跡試驗(yàn)確證為陰性；1例ELISA1（+）/ELISA2（-）復(fù)核結(jié)果中，經(jīng)免疫印跡試驗(yàn)確證，為不確定。根據(jù)確證結(jié)果顯示，S/CO值＞9.9陽(yáng)性100.00%符合、6＜S/CO值＜9.9陽(yáng)性50.00%符合，1＜S/CO值＜5.9陽(yáng)性不符合。本研究ELISA法初篩28例HIV陽(yáng)性標(biāo)本中，確證結(jié)果符合率為92.86%；提示，對(duì)AIDS患者利用ELISA法進(jìn)行初篩，診斷準(zhǔn)確率較高，可作為AIDS疾病防控中的重要措施。

綜上所述，在艾滋病診斷中，對(duì)HIV抗體利用ELISA法進(jìn)行篩查，具備較高準(zhǔn)確率，可作為初篩首選方法；對(duì)于初篩陽(yáng)性患者，則需要進(jìn)行復(fù)核與確證，避免出現(xiàn)假陽(yáng)性。