血清PDGF-D表達水平與老年出血性腦卒中患者顱內血腫擴大的相關性

韓非 王穎竹 楊鵬 顧俊怡

(蘇州大學附屬第一醫院 1急診科，江蘇 蘇州 215006；2老年科；3神經外科)

出血性腦卒中(HS)又稱腦出血，是臨床常見的非外傷性腦實質出血，可形成顱內血腫，其在老年人中多有發生，具有較高致殘率及死亡率〔1，2〕。血腫擴大在HS后較為常見，是腦持續性出血或再出血，促使血腫不斷擴大的過程及現象，可增加HS患者死亡率〔3，4〕。既往研究資料顯示，血小板源性生長因子(PDGF)-D是PDGF家族成員之一，其可能參與血管生成、血管重塑、炎癥反應和損傷修復等過程〔5〕。方顕文等〔6〕研究發現PDGF在腦出血患者血清中表達水平明顯上調，PDGF有助于評估腦出血患者神經功能受損情況，其有望成為早期診斷腦出血的生物學標志物。但PDGF-D在老年HS患者血清中的表達水平與顱內血腫擴大的相關性尚未見到相關報道。本研究觀察PDGF-D在HS血腫擴大/未擴大患者中的表達，分析PDGF-D與顱內血腫擴大的關系。

1 資料與方法

1.1臨床資料 2016年6月至2019年8月蘇州大學附屬第一醫院診治的老年HS患者189例，診斷標準：依據中華醫學會神經病學分會制定的《中國腦出血診治指南(2014)》〔7〕進行HS判定。納入標準：①所有患者符合HS診斷標準，經腦CT證實；②腦CT復查前未接受過手術治療；③所有患者研究相關資料齊全。排除標準：①患有腦出血史者；②合并顱內腫瘤、外傷性出血、腦梗死者；③合并長期使用外科治療者；④合并血液系統、免疫系統、多器官疾病者。血腫擴大判定標準：依據Brott標準〔8〕，比較先后兩次腦CT血腫體積，當復查CT血腫體積比前次CT血腫體積超過33%為血腫擴大。按照顱內血腫是否擴大分為血腫擴大組62例及血腫未擴大組127例。其中血腫擴大組：男35例，女27例；年齡61～82歲，平均(69.92±7.15)歲；體重指數(BMI)為18.01～26.27 kg/m2，平均(22.80±2.22)kg/m2。血腫未擴大組：男71例，女56例；年齡60～81歲，平均(70.87±7.94)歲；BMI為17.96～26.20 kg/m2，平均(22.93±2.35)kg/m2。兩組性別、年齡、BMI方面差異無統計學意義(P>0.05)。本研究符合倫理學要求，經醫院倫理委員會審核、批準，并獲得患者家屬知情同意，簽署知情同意書。

1.2主要試劑與儀器 人PDGF-D酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒(貨號：DG10421H)購自北京冬歌博業生物科技有限公司上海將來實業股份有限公司；人腫瘤壞死因子(TNF)-α ELISA試劑盒(貨號：BMH051)購自上海冠東生物科技有限公司；AMR-100酶標儀(型號：AS-16050-00)購自杭州奧盛儀器有限公司。

1.3臨床相關資料收集 所有HS患者發病3 h內就診，并行CT檢查，均符合保守治療條件。臨床觀察到HS患者病情發生變化，立即進行頭顱CT復查，而病情相對穩定患者于發病24 h時進行頭顱CT復查，并于入院時收集患者年齡、BMI、血壓、基礎病史、白細胞(WBC)計數、凝血酶原時間(PT)、格拉斯哥昏迷評分(GCS)等臨床資料。

1.4樣本采集與預處理 收集兩組肘靜脈血3～4 ml于5 ml EP管中，室溫下自然凝集，1 750 r/min離心12 min，收集上層血清，分裝，于-20℃冰箱中凍存，待檢。

1.5ELISA檢測血清PDGF-D、TNF-α水平 取出兩組受試者凍存血清樣本，解凍，嚴格按照PDGF-D、TNF-α ELISA試劑盒說明書進行檢測。

1.6統計學方法 采用SPSS24.0軟件行t檢驗、χ2檢驗、Pearson相關分析、Logistic回歸分析。

2 結 果

2.1兩組臨床資料比較 與血腫未擴大組比較，血腫擴大組HS患者收縮壓、舒張壓及GCS評分均明顯升高(P<0.05)。見表1。

表1 兩組臨床資料比較

2.2兩組PDGF-D、TNF-α水平、不同時間血腫量及比值比較 與血腫未擴大組相比，血腫擴大組血清PDGF-D、TNF-α水平、復查血腫量(V2)及V2/入院時血腫量(V1)值均明顯升高(P<0.05)。見表2。

表2 兩組PDGF-D、TNF-α水平、不同時間血腫量及比值比較

2.3血腫擴大患者血清PDGF-D、V2與收縮壓、舒張壓、GCS評分、TNF-α關系 血腫擴大患者血清PDGF-D水平與GCS評分、TNF-α水平均呈正相關(P<0.01；P<0.001)；V2與入院收縮壓、GCS評分、TNF-α水平均呈顯著正相關(P<0.01；P<0.001)。見表3。

表3 血腫擴大患者血清PDGF-D、V2與收縮壓、舒張壓、GCS評分、TNF-α關系

2.4Logistic回歸分析顱內血腫擴大的影響因素 以血腫是否擴大為應變量，以收縮壓、舒張壓、GCS評分、PDGF-D、TNF-α為因變量，行多因素Logistic回歸分析，結果顯示，收縮壓、GCS評分、PDGF-D、TNF-α均為血腫擴大的危險因素(P<0.05)。見表4。

表4 影響顱內血腫擴大的Logistic回歸分析

3 討 論

HS是多發于老年人的腦血管疾病，易發生顱內血腫擴大現象，且血腫擴大可增加患者死亡風險，影響患者生存質量〔9，10〕。因此，尋找顱內血腫擴大的相關因素，及時監測有關指標，對改善大腦炎癥、神經功能及患者生活質量具有積極意義。

PDGF可促進膠質細胞、成纖維細胞、血管平滑肌等多種細胞分裂、增殖，在個體神經系統發育、細胞分化、信號傳導等生物學過程中具有重要調節作用〔11，12〕。研究表明，PDGF-D作為PDGF的重要成員，其可能與非高血壓性腦出血有關，可能參與并影響腦出血發展過程〔13〕。研究顯示，PDGF-D在腦出血后表達水平升高，可增強細胞浸潤，誘導促炎因子TNF-α產生，進而增強小膠質細胞活性及中性粒細胞浸潤，從而在腦出血炎癥過程中發揮促進作用，其具有診治腦出血的潛在價值〔14〕。研究表明，PDGF-D表達異常與炎癥性腦血管疾病相關。本研究提示PDGF-D可能在HS患者發生血腫擴大過程中起重要作用。推測HS可引發腦缺血缺氧、顱內壓升高、腦水腫，進而引起大量星形膠質細胞增生，促使PDGF-D分泌，PDGF-D通過血腦屏障進入血液循環；此外，腦水腫可激活血小板、受損內皮細胞，并誘導炎癥反應，均會促進PDGF-D表達，PDGF-D與其受體結合后可能影響HS的炎癥損傷及血氧供給環節，從而在血腫擴大進展中發揮重要作用。

機體在腦出血后處于應激狀態，T細胞、單核巨噬細胞、NK細胞等血清免疫細胞及血管內皮細胞等被激活，合成并分泌炎性因子，炎性因子在調節介導炎癥反應中具有重要作用，其也可影響繼發性顱腦損傷〔15，16〕。有關研究顯示，TNF-α是腦損傷重要的炎性因子，其在腦出血患者中呈高表達，其水平隨著腦出血量增加及病情進展呈上升趨勢，其可能參與并影響腦出血過程，TNF-α水平有利于病情評估〔17，18〕。此外，鐘建斌等〔19〕研究發現TNF-α在急性高血壓腦出血患者中表達上調，經破血逐瘀法聯合依達拉奉治療后，其表達水平明顯下調，TNF-α可能在急性高血壓腦出血的發展過程中發揮促炎作用。以上研究表明，TNF-α表達異常可能與腦出血發病進程密切相關。本研究提示TNF-α可能在血腫擴大進程中發揮作用。推測TNF-α在腦出血后過度釋放，其可促進IL-6等炎癥因子釋放，影響繼發性顱腦損傷；此外，TNF-α可通過直接調控膠質細胞、神經元壞死及血管新生等生物過程〔15〕，從而在顱腦血腫擴大中發揮促進作用。

有研究表明，血腫擴大在HS患者發病首日發生率較高，在發病后6 h內發生率最高〔20〕。目前，臨床應用CT判定腦出血血腫擴大尚無統一標準，Brott〔8〕標準受到廣泛認可。本研究提示在臨床工作中，HS患者在入院后當日病情發生變化時，應立即復查CT，檢查血腫變化情況，及時采取相應治療手段。

本研究提示血清PDGF-D水平與GCS評分、TNF-α水平，V2與收縮壓、GCS評分、TNF-α水平相互影響，從而協調HS患者發生血腫擴大過程。收縮壓、GCS評分、PDGF-D、TNF-α水平升高，均可能使血腫擴大發生風險增加，及時監測上述指標有助于早期評估并控制HS患者病情。