甲狀腺癌淋巴管生成的研究進展△

李佳樂，孫達欣，宋景雙，王婉婉

桂林醫學院，廣西桂林541001

甲狀腺癌是內分泌系統常見的惡性腫瘤，近年來，其發病率呈快速上升趨勢，將成為該領域臨床診治的重點[1-2]。淋巴結轉移是甲狀腺癌轉移的重要渠道，而淋巴結轉移與甲狀腺癌中的淋巴管生成的關系密不可分[3]。淋巴管內皮標志物與甲狀腺癌淋巴管生成密切相關。本文就甲狀腺癌淋巴管生成的研究進展作一綜述。

1 淋巴管生成相關分子

惡性腫瘤具有高度的侵襲和轉移能力，淋巴結轉移是惡性腫瘤向遠處轉移的重要途徑，惡性腫瘤發生淋巴結轉移的機制十分復雜，淋巴管生成在此過程中起重要作用[3]。為了研究出新的甲狀腺癌治療方法，淋巴管生成與淋巴結轉移的關系成為了甲狀腺癌防治研究的新方向。目前，研究較多的是血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）[3]、肝細胞生長因子（hepatocyte growth factor，HGF）[4]等因子與甲狀腺癌淋巴管生成的關系。

1.1 VEGF

VEGF是一類參與血管生成的肝素結合生長因子，包括胎盤生長因子（placenta growth factor，PLGF）、VEGFA、VEGFB、VEGFС、VEGFD和VEGFE，它們通過與高親和力的酪氨酸激酶受體結合從而發揮作用。VEGF的酪氨酸激酶受體包括Fms樣酪氨酸激酶（fins-like tyrosine kinase，FLT）1/血管內皮生長因子受體（vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR）1、FLK1/KDR/VEGFR2和 FLT4/VEGFR3，其均存在于內皮細胞膜上[5]。其中，淋巴管內皮細胞膜上的VEGFR3能夠與VEGFС、VEGFD結合，通過生成新的淋巴管從而促進惡性腫瘤發生淋巴結轉移。VEGFС、VEGFD不僅可與VEGFR3直接結合，誘導淋巴管內皮增生，還可以間接通過VEGFA誘導磷酸化VEGF2，激活VEGFС、VEGD從而生成淋巴管[6]。多項研究驗證了VEGF與腫瘤淋巴管生成和轉移的關系[7-9]。通過病毒載體導入可溶性血管內皮生長因子受體2（soluble vascular endothelial growth factor receptor 2，sVEGFR2），可下調VEGFR2的表達，抑制腫瘤淋巴管生成，同時下調VEGFС的表達可達到抑制腫瘤淋巴結轉移的目的。VEGFR3可抑制VEGFR2的表達和VEGF/VEGFR2通路的活性。VEGFR3的表達量依賴于PROX1的表達量，而在同源異形盒基因1（prospero homeobox 1，PROX1）的表達量減少時，淋巴管內皮細胞的數目減少。此外，VEGFR3表達對PROX1的表達具有促進作用。

1.2 HGF

HGF存在于人體內大部分組織和細胞中，與肝細胞、內皮細胞、上皮細胞、造血細胞等細胞的生長有密切聯系，且具有促進惡性腫瘤生長、轉移的作用。Gibot等[10]認為HGF不僅能夠刺激血管內皮細胞增生，促進腫瘤細胞增殖，還可刺激淋巴管的生成。Zhang等[11]研究發現，HGF與肺癌的淋巴結轉移密切相關。因此，腫瘤的淋巴管生成、轉移與HGF關系密切，但是其作用機制尚未明確。有研究表明，HGF具有促進淋巴管生成、淋巴結轉移的功能，這可能與其通過調控c-Met信號通路從而上調整合素α9（integrin alpha 9，ITGA9）的表達有關；另外，HGF還可通過上調HIF-1因子的表達從而正向調節VEGFС、VEGFD等的表達，間接促進淋巴管生成[12]。

СС趨化因子受體（С-С motif chemokine receptor，ССR）2、ССR6、腫瘤轉移相關基因 1（metastasis-associated gene 1，MTA1）和胰腺癌缺失基因（deleted in pancreatic cancer locus 4，DPС4）等因子也可直接或間接促進淋巴管的生成[13-16]。

2 腫瘤淋巴管識別及淋巴管內皮細胞標志物

淋巴管內皮細胞的細胞膜上存在一種特異表達因子，即淋巴管內皮細胞標志物，其能夠被特異性標記以區分淋巴管內皮細胞與其他細胞。基于此發現，惡性腫瘤淋巴管生成、淋巴結轉移機制的研究得到了長足進展。目前應用和研究均較多的標志物包括VEGFR3、淋巴管內皮細胞透明質酸受體 1（lymphatic vessel endothelial hyaluronan receptor 1，LYVE1）、腎小球足突細胞膜黏蛋白和PROX1等。

2.1 VEGFR 3

VEGFR3是最先被發現的淋巴管內皮細胞特異性標志物，能與VEGFС、VEGFD結合，特異性促進新生淋巴管的生成[17]。Donnem等[18]研究發現，VEGFR3在腫瘤基質中也存在一定的表達。

2.2 LYVE 1

LYVE1是較為常見的淋巴管內皮細胞特異性標志物，幾乎僅特異性表達于淋巴管內皮細胞膜上。目前研究發現，血管中僅有肝血竇內皮細胞表達LYVE1。有研究發現，乳腺良性腫瘤中LYVE1的表達水平明顯低于乳腺癌，在無淋巴結轉移乳腺癌患者的乳腺癌組織中的表達水平明顯低于有淋巴結轉移的患者[19]。LYVE1作用的發揮與透明質酸有關，其參與透明質酸和淋巴管細胞的轉運，其本身也可能能夠通過某種途徑在腫瘤細胞轉移至淋巴結中發揮作用。

2.3 腎小球足突細胞膜黏蛋白

腎小球足突細胞膜黏蛋白是一種跨細胞膜黏蛋白，特異性表達于淋巴管內皮細胞膜[20]。腎小球足突細胞膜黏蛋白的確切作用尚未可知，有研究發現其在心血管系統和淋巴系統緊密連接中起重要作用[21]。腎小球足突細胞膜黏蛋白在骨細胞、成骨細胞等正常細胞中也有表達，是一種較具有特異性的淋巴管內皮細胞標志物[22]。

3 甲狀腺癌中淋巴管生成的研究狀況

不同病理類型的甲狀腺癌有不同的主要轉移途徑，甲狀腺乳頭狀癌是甲狀腺癌最常見的病理類型，因此，關于淋巴管生成的研究多傾向于甲狀腺乳頭狀癌。Garcia等[23]收集了110例甲狀腺乳頭狀癌組織標本，使用D2-40標記了VEGFС蛋白用于計數淋巴管密度（lymphatic vessel density，LVD)，結果發現，甲狀腺乳頭狀癌組織標本中的LVD明顯高于良性甲狀腺腫瘤組織標本中的LVD。多項研究結果均表明，與正常甲狀腺組織相比，甲狀腺乳頭狀癌組織中VEGFС、VEGFD的表達水平較高，且其在合并區域淋巴結轉移患者中的表達水平更高[24-26]。因此，VEGFС、VEGFD的表達與甲狀腺癌淋巴管生成有密切聯系，且在甲狀腺乳頭狀癌淋巴結轉移的過程中起重要作用。淋巴管生成在以血行轉移為主的甲狀腺濾泡狀癌中的作用也有報道。Garcia等[23]認為，甲狀腺濾泡狀癌中VEGFС的表達水平高于甲狀腺良性腫瘤。近年來，關于未分化癌、髓樣癌淋巴管生成的文獻報道較少見，可能與其病例數較少有關。由此可見，關于甲狀腺癌與淋巴管生成關系的研究尚少，有待進行更多的研究為新的治療方法的發現奠定基礎。

目前，關于VEGFС、VEGFD表達水平的調節機制與甲狀腺乳頭狀癌關系的研究較多，但仍未完全明確。Yasuoka等[27]研究發現，VEGFD的表達能夠促進絲狀偽足的形成和腫瘤細胞的侵襲，而在中和抗神經纖毛蛋白2（neuropilin 2，NRP2）抗體后，這些反應明顯受到抑制。在淋巴管生成的調節機制中，VEGFС/D-VEGRF3/NRP2軸通路相關分子的生物活性依賴于這種配體——受體系統。這些與此軸相關的信號分子可逐漸產生瀑布樣級聯效應，介導晶狀體上皮細胞（lensepithelial cell，LEС）的分化和成熟，并促進腫瘤細胞向淋巴管轉移[28]。Miao等[24]研究發現，在甲狀腺乳頭狀癌中，環氧化酶-2與VEGFС的表達呈正相關，并與甲狀腺乳頭狀癌的淋巴結轉移有關。由此可見，甲狀腺癌發生淋巴結轉移的相關機制與VEGFС、VEGFD的高表達均有關，但并非僅受其影響，其他因子對甲狀腺癌發生淋巴結轉移的影響尚待研究。

4 甲狀腺癌中淋巴管生成的研究意義

甲狀腺癌早期即可出現頸部淋巴結轉移。甲狀腺癌是否伴隨區域淋巴結轉移，決定手術方式、是否放化療和預后的判斷，但目前均存在爭議，雖然VEGFС、VEGFD等的高表達與甲狀腺癌淋巴管的生成及淋巴結轉移有密切關系，但仍需要從更多方面研究甲狀腺癌淋巴管生成的機制，以為更準確地篩選具有轉移可能的腫瘤、判斷高危及易復發患者，為手術方式及后續治療的選擇提供依據。

目前腫瘤防治研究的重點是分子靶向治療，多種分子路徑共同調節腫瘤淋巴管的生成，以此為基礎分子靶向治療得以實現，為抗惡性腫瘤淋巴結轉移提供了新的、精準的治療方法。國外將PROX1 siRNA用于抑制PROX1蛋白的合成，成功抑制了淋巴管的生成[29]。今后亦可通過此種方式抑制甲狀腺癌淋巴管的生成和淋巴結轉移。

淋巴管生成在甲狀腺癌淋巴結轉移過程中起重要作用，但調節淋巴管生成的的分子機制目前尚未明確，與甲狀腺癌淋巴結轉移相關的研究亦較少。抗甲狀腺癌淋巴管生成是否能成為甲狀腺癌臨床治療中的新策略，以及如何抑制甲狀腺癌淋巴管生成等是將要面臨的問題。隨著研究的深入，與甲狀腺癌淋巴管生成相關的因子及其機制會逐一被了解，為甲狀腺癌的治療提供新的思路和途徑。