細胞形態學在急性白血病患者診斷中的應用價值分析

河南省平頂山市第一人民醫院（467000）楊海

急性白血病（AL）是一種臨床常見的惡性血液學疾病，其發病率位居所有惡性血液系統疾病首位。隨著現代醫學的不斷發展，AL的診斷、治療亦取得了極大進步，準確了解患者分型對后續治療具有重要作用。MICM分型是目前被國際醫生廣泛認可的一種分型方法，但該分型方法對醫療條件要求較高，許多單位并不具備檢測條件。細胞形態學檢測是一種通過了解細胞比例、數量、結構來判斷患者是否存在病變的檢測方式，其具有操作簡便的有點[1][2]。此次研究分析了細胞形態學分型檢測在AL診斷中的應用價值，已期為臨床診斷提供參考，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 此次研究納入對象為2016年6月～2019年6月在我院就診的92例AL患者，其中男性患者49例，女性患者43例，年齡4～72歲，平均年齡（38.15±4.31）歲。

納入及排除標準：符合AL臨床診斷標準，無其他類型血液系統疾病；無嚴重免疫功能缺陷；無嚴重精神障礙；所有患者均了解研究內容且簽署知情同意書。該研究已獲得院倫理委員會許可。

1.2 研究方法

1.2.1 細胞形態學檢查 選取合適的骨髓涂片進行瑞氏-姬姆薩染色，100倍油鏡下計數200個均勻分布的有核細胞，同時氧化物酶染色（POX）、過碘酸-雪夫反應染色（PAS）、醋酸萘酚酯酶+氟化鈉抑制實驗（NAE+NaF），計數陽性率并觀察酶型，并按FAB標準分型。

1.2.2 免疫學檢查 采集1～2mL骨髓液（加入肝素抗凝），使用流式細胞儀進行測定（24h內完成），按CD45/SSC設門分出幼稚細胞群和成熟細胞群，并選擇合適的單克隆抗體進行免疫表型檢測和抗原表達情況，根據歐洲白血病免疫分類協作組（EGIL）積分標準確定類型。

1.2.3 染色體核型檢查 采集2～5mL骨髓液（加入肝素抗凝），按2×106/ml的密度將細胞接種于培養液中，過夜培養，于培養結束前1h加入秋水仙胺（終濃度為0.05ul/ml），離心收獲細胞，用固定液（甲醇和冰醋酸以3∶1的比例配置）固定3次，滴片，采用R顯帶法進行分析，參照《人類細胞遺傳學國際命名體制（ISCN2013）》進行核型描述。

1.2.4 分子生物學檢查 采集2～3mL骨髓液（加入肝素抗凝），加入等體積0.9%的NaCl溶液進行稀釋，用淋巴細胞分離液分離單個核細胞，裂解細胞后提取總RNA，測定RNA濃度。并使用試劑盒獲取cDNA，然后進行多重巢式PCR反應，凝膠電泳后進行結果分析。

1.3 統計學分析 用統計學軟件Excel和SPSS22.0進行數據分析，定性資料以n%表示，組間比較行χ2檢驗，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果

細胞形態學檢查共有71例患者確定為白血病亞型，確診率為77.17%；免疫學檢查共有73例患者確定白血病亞型，確診率為79.35%；細胞遺傳學診斷共有20例患者確診白血病亞型，確診率為21.74%；分子生物學診斷共有21例確定白血病亞型，確診率為22.83%。MICM聯合診斷則有90例患者確診，診斷準確率為97.83%。MICM聯合診斷的準確率顯著高于單獨細胞形態學、免疫學、細胞遺傳學和分子生物學診斷（P＜0.05），單獨細胞形態學、免疫學診斷準確率均高于細胞遺傳學和分子生物學診斷（P＜0.05），但細胞形態學和免疫學診斷準確率之間無統計學差異（P＞0.05），細胞遺傳學和分子生物學診斷準確率之間也沒有統計學差異（P＞0.05）。

3 討論

了解AL患者亞型是臨床治療的基礎，而隨著檢驗醫學的不斷發展，形態學、免疫學、分子生物學、細胞遺傳學等手段在AL分型診斷中發揮了重要作用，但受到試劑、儀器等因素影響，分子生物學、細胞遺傳學檢測在醫院普及較為困難，目前許多三甲醫院仍不具備該種檢測手段。此次研究結果顯示，MICM聯合診斷仍是目前最為準確的AL分型檢測方法，但細胞形態學檢測和單純免疫學檢測并無顯著差異，而相較于免疫學檢測，形態學檢測亦具有一些獨特優勢：首先形態學檢測具有經濟、方便快捷、操作簡單等優勢；對于存在典型形態學變化的AL患者，通過形態學檢測可直接診斷，如AML-M3，可為患者及時搶救提供基礎[3]；形態學檢測和化學染色在單核細胞白血病分型診斷中具有一定優勢；有利于盡早判斷淋巴瘤患者病理分期；通過形態學檢測可為后續免疫學檢測的單克隆抗體選擇提供幫助[4]。

細胞形態學檢查在AL患者分型診斷中具有不可替代的價值，臨床檢驗人員應給予高度重視。