李翔教授應用補腎活血中藥保護青光眼視功能的機制研究

崔琳茹，李翔，萬婧雯，王泰，楊鳳姣，田夢瑤，李運帆，杜薇，易文華

（1.成都中醫藥大學，四川 成都；2.成都中醫藥大學附屬醫院，四川 成都）

0 引言

青光眼是一類多因素的視神經損害臨床綜合征，同時也是一種心身疾病，以特異性的視盤凹陷萎縮及特征性的視野缺損[1]為特征。近年來隨著人們對于視覺科學的探索，發現青光眼性在發病機制及特征上與一些中樞退行性神經系統疾病相似[2,3]，視神經病變同時還伴有一定程度上視覺通路的跨突觸的神經元變性。同時人類青光眼尸檢、人類活體神經影像及大量動物實驗學研究進一步證實青光眼是整個視路的群體綜合征[4]。目前除降低眼壓是可證實的，行之有效的視神經保護治療措施之外，尚無可量化的視神經保護治療。但是降低眼壓并不能完全阻斷非眼壓依賴性青光眼患者持續性的視神經損傷[1]。而中醫藥能通過辨證分析，抓住青光眼疾病在不同階段的病性特征，進行有效的方藥配伍，可以靈活改變藥物之間的搭配而發揮中醫藥在治療青光眼疾病上多靶點治療的巨大優勢，因此中醫藥的在青光眼視路損傷及視功能保護中具有重要地位。青光眼類似祖國醫學對“五風內障”及“青盲”的描述，李翔教授通過結合各家所論，結合各醫家論述，認為其主要病機為肝腎虛損、脈絡瘀滯，精血不能上榮，目中玄府自閉，郁遏光明，故治以滋養肝腎、活血化瘀為基本大法[5]。并在此方面花費10 余年時間研究補腎活血中藥對青光眼整個視路的影響。具體如下。

1 視網膜

李翔教授團隊[6-12]通過采用烙閉大鼠上鞏膜靜脈方法制作慢性高眼壓（EIOP）模型，觀察補腎活血中藥對視網膜神經節細胞凋亡相關基因Bcl-2、Bax、Bad、P-AKT、NF-κB、Caspase-9 表達的影響。結果提示補腎活血中藥可通過PI3K/AKT 信號通路調節RGCs細胞的凋亡，通過上調P-AKT、抗凋亡基因Bcl-2 以及多向轉錄調節蛋白NF-κB 表達，抑制凋亡促進基因 Bax 及 Bad 表達，下調 Caspase-9 的表達，以提高RGCs 數量，增加視網膜厚度，改善RGCs 超微結構，從而發揮保護視功能的作用。

同時在補腎活血中藥對EIOP 大鼠多焦視網膜電流圖（mfERG）的影響的研究中[13,14]，發現此類中藥可以恢復EIOP 大鼠總波反應密度及波峰潛時，改善模型大鼠視覺電生理，從而發揮保護視功能的作用。

2 視神經

在補腎活血中藥對視神經髓鞘、腦源性神經生長因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）及視神經PI3K/AKT 通路影響[15-18]的研究中，揭示了：補腎活血中藥可恢復BDNF 表達，上調視神經PI3K/AKT 通路MDM2 的表達，下調p53 的表達，輕度降低眼壓，增加視神經髓鞘含量，從而有助于視神經損傷的修復。

3 外側膝狀體

通過觀察補腎活血中藥對EIOP 大鼠眼壓，有髓神經密度，BDNF、尼氏小體的含量及神經元細胞超微結構影響[19-21]，發現補腎活血中藥能降低慢性EIOP 模型大鼠眼壓，增加LGN 神經元數目、尼氏小體含量、有髓神經纖維密度，可以促進BDNF 表達增多，提高LGN細胞存活能力，改善神經元細胞超微結構，有助于LGN損傷的修復，從而發揮視功能保護作用。

4 初級視皮質

李翔教授團隊[22-25]運用同樣的方法制作EIOP 大鼠模型，以觀察補腎活血中藥對PVC 尼氏小體、BDNF以及 Bax、p-FoxO1、IKK2 及 Bcl-2 等基因的影響，說明補腎活血中藥可促進EIOP 大鼠初級視皮質神經元損傷的修復，提高PVC 尼氏小體含量及BDNF 的表達，可能為通過作用于PI3K/AKT 通路，增強Bcl-2 表達，下調Bax 表達，改善PVC 超微結構，降低PVC 中IKK2及p-FoxO1 的表達。

5 討論

視網膜神經節細胞（RGCs）的軸突在視乳頭處會聚，穿過鞏膜篩板構成視神經。兩側視神經在眶內行向后，穿視神經管入顱窩，在蝶鞍上方匯合形成視交叉，經視束到達外側膝狀體(LGN) ，換神經元后進入視放射，止于枕葉視皮質（PVC）[26]。青光眼的視神經損害不僅僅局限于視網膜，可能通過跨突觸神經元變性而累及視神經、視交叉、視束、外側膝狀體及視放射以及整個枕葉視皮質在內的整個視路，也有可能是上級視路的某部位病變通過逆向跨突觸神經元變性而影響視網膜，因此對于青光眼發病機制的探索，還需廣大研究者的共同努力。研究表明，補腎活血中藥可以通過調節 PI3K/AKT 信號通路上 Bcl-2 家族、Caspase3 家族、細胞轉錄因子等凋亡相關因子來調控神經節細胞的死亡；同時可也以促進內源性神經營養因子的表達，從而提高視路上各級神經元的存活能力；PI3K/AKT 與BDNF 的調節是又雙向的，通過與cAMP 反應元件結合蛋白(CREB)、原肌球蛋白受體激酶B(Trk B)等蛋白一起構成一個閉合回路。AKT 既是BDNF 的上游信號蛋白，也是其下游靶標。一方面，PI3K/AKT 通路能使CREB 磷酸化，磷酸化的CREB 能又能介導BDNF 基因的表達；另一方面，BDNF 激活Trk B 后，Trk B 能進一步激活觸發PI3K/AKT 通路，使用Trk B 抗體則能抑制AKT 的磷酸化。補腎活血中藥通過影響細胞凋亡因子及細胞營養因子的表達，發揮對視網膜神經節細胞的保護作用[27]，這對指導臨床用藥產生了積極的影響，同時也為中醫藥進行青光眼視功能保護方面拓展了新思路。