丹參-葛根藥對成分、藥理及臨床應用的研究進展＊

孫小鑫，苗 青，王瑞海，劉麗梅

（中國中醫科學院中醫基礎理論研究所 北京 100700）

丹參-葛根是《施今墨對藥》中收載的常用藥對。丹參活血祛瘀、通經止痛、清心除煩、涼血消癰；葛根解肌退熱、生津止渴、通經活絡，二藥參合，相互促進，活血化瘀、祛瘀生新[1]。丹參-葛根作為藥對在清代以前很少使用，清代以后，葛根疏散經脈的藥理作用開始被證實，其與丹參的配伍也出現于名醫醫案中。近代，葛根擴張血管的作用被充分研究，丹參-葛根自20世紀以后成為現代臨床治療心腦血管病變的常用藥對[2]。目前已經有對丹參、葛根單味藥的化學成分、藥理作用等方面的全面綜述，而丹參-葛根藥對的綜述還較少，本文從化學成分、藥理作用、臨床應用這3個方面對丹參-葛根藥對的研究情況進行系統總結、分析，以期為此藥對治病的科學內涵闡釋及進一步研究應用提供依據。

1 化學成分

丹參和葛根的化學成分差異較大，丹參主要含有菲醌類和酚酸類化合物，葛根主要含有異黃酮類化合物。藥對的藥效物質基礎不是組成其單味藥的化學成分的簡單加和，而是單味藥的化學成分發揮整體作用而形成的，提取工藝、配伍比例、炮制方法等不同會使藥對化學成分的含量或數量發生變化，藥對進入機體后的吸收、代謝、分布、排泄等過程也會使其化學成分發生變化[3]，這些都會對藥對的藥效產生影響。朱海燕等提出，丹參與葛根配伍后可起到協同增效的作用[4]，但其協同增效的藥效物質基礎尚不清楚，因此，深入研究此藥對的化學成分很有必要。

1.1 化學成分定性與定量研究

李燕燕[5]采用萃取法、層析法、柱色譜法等方法從丹參-葛根藥對提取液中分離得到了10 個成分，后通過理化法和波譜法確定了丹參酮Ⅰ、二氫丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA、丹酚酸B、隱丹參酮、葛根素、大豆苷、大豆苷元、刺芒柄花素這9個成分，并篩選出了大孔吸附樹脂純化丹酚酸B 和葛根素的最佳工藝，采用近紅外光譜法，對丹參-葛根提取液中丹參酮ⅡA、丹酚酸B、葛根素進行了定量分析，且建立了這3 個成分的定量分析校正模型，分析快速、準確。Chang等[6]采用HPLC對丹參葛根膠囊（由丹參-葛根藥對研制而成）進行了分析，通過與對照品對比，結果顯示，丹參葛根膠囊含有丹參素、丹酚酸B、原兒茶醛、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA、葛根素、大豆苷元-8-C-芹菜糖基-葡萄糖苷、大豆苷、大豆苷元。趙玉華等[7]分別以水和75%的乙醇作溶劑，對丹參單煎液、葛根單煎液、丹參與葛根單煎后混合液（比例為1:1）以及丹參-葛根藥對提取液進行了薄層色譜研究，結果表明，無論以水還是以75%的乙醇作溶劑，丹參-葛根藥對提取液中化學成分的種類沒有變化，即沒有新成分的產生或原有成分的消失，但某些成分的溶出率會發生改變，提示共煎會對化學成分的含量產生影響。

李燕燕[5]和Chang 等[6]的研究都對丹參-葛根藥對中的丹參酮ⅡA、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ、丹酚酸B、葛根素進行了定性，這5 個成分也是《中國藥典》2015 版[8]規定的丹參、葛根中的指標性成分，故丹參-葛根作為藥對使用，其質量控制至少應該包含丹參酮ⅡA、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ、丹酚酸B、葛根素這5個成分。

1.2 化學成分體內過程研究

唐洪梅等[9]采用HPLC，對糖尿病眼病模型大鼠的空白血漿以及葛根組、丹參-葛根組給藥后不同時間的含藥血漿進行了分析，結果表明，丹參可以促進葛根素在大鼠體內的吸收、分布，并且可以延緩葛根素在大鼠體內的代謝和排泄；黎醒等[10]研究發現，葛根素可促進丹參素在大鼠在體單向腸灌流模型的空腸和十二指腸的吸收，此作用可能是由于葛根素競爭性地結合P-糖蛋白（P-gp），使外排的丹參素減少，被吸收的丹參素增加而導致的。

上述研究提示，丹參-葛根藥對合煎后，某些成分的溶出度會發生變化，進入體內后在吸收、分布、代謝、排泄等環節藥對成分也會發生變化，但是未發現此藥對有新成分的產生或原有成分的消失。目前，對丹參-葛根藥對化學成分的研究還有一些值得探討的內容，如此藥對發揮作用時化學成分間相互作用的機制以及此藥對共煎時化學成分的數量、含量變化。

2 藥理作用

現代研究表明，丹參與葛根都具有防止心肌梗死[11，12]、抗腦缺血[13，14]、防止動脈粥樣硬化[15-16]、抗炎[1718]、抗氧化[19，20]、抑制細胞凋亡[15,21]等藥理作用，丹參-葛根藥對的很多藥理作用與丹參、葛根單味藥的相同，具有保護心肌、防止腦缺血再灌注損傷、抗炎、抗氧化等作用，已有的對丹參、葛根單味藥的藥理作用研究，可以為丹參-葛根藥對及丹參、葛根有效成分配伍的藥理作用研究提供依據與支撐。

2.1 丹參-葛根藥對的藥理作用

2.1.1 丹參-葛根藥對對心臟的作用

有研究表明，丹參-葛根水提物能夠激活心肌細胞 中 蛋 白 激 酶Cε（PKCε）與ATP 敏 感 性 鉀 通 道（KATP），增強線粒體的抗氧化狀態和線粒體膜結構的完整性，減少線粒體內Ca2+的積累，保護大鼠的心肌缺血再灌注損傷[22，23]。丹參-葛根水提物可以提高心肌細胞谷胱甘肽（GSH）的水平，抑制Ca2+誘導的線粒體通透性的轉變，防止缺氧/復氧誘導的H9c2 心肌細胞的凋亡，這種作用可能與PKCε/mKATP 信號通路和細胞外信號調節蛋白激酶/核轉錄因子E2 相關因子2（ERK/Nrf2)信號通路有關[24]。丹參-葛根水提物能夠通過激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號通路和胰島素信號通路，上調胰島素受體底物（IRS）、蛋白激酶B（Akt）和c-Jun 氨基末端激酶（JNK）等蛋白的磷酸活化水平，抑制腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和轉化生長因子-β（TGF-β）等的表達，使心肌細胞增殖[25]。此外，丹參-葛根藥對水提物還可以保護大鼠的心肌免受異丙腎上腺素引起的損傷[26]，機制同樣可能與PKCε/mKATP信號通路有關。

2.1.2 丹參-葛根藥對對腦的作用

Deng 等[27]通過實驗研究表明，丹參、葛根及丹參-葛根藥對水提物都能增加大鼠腦基底動脈血管平滑肌細胞的KATP的電流，阻止Ca2+流入，抑制CaCl2誘導的動脈環的收縮，從而對大鼠腦基底動脈產生血管舒張作用，且丹參-葛根藥對水提物的作用更強。馬和碩等[28]研究表明，丹參、葛根都可以保護大腦中動脈栓塞（MCAO）大鼠的腦缺血再灌注損傷，且丹參-葛根藥對可以使這種保護作用加強，推測丹參-葛根藥對的增效作用可能與蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白/低氧誘導因子-1α（Akt/mTOR/HIF-1α）信號通路有關。

2.1.3 丹參-葛根藥對對血管、血液的作用

Hu 等[29]用丹參-葛根水提物處理斑馬魚腸下血管（SIVs）區域的毛細血管和人微血管內皮細胞（HMEC-1）后，SIVs 出現明顯的出芽新生，HMEC-1 明顯地增殖、遷移、分化，這表明，丹參-葛根水提物可以促進血管生成，推測丹參-葛根藥對在治療冠狀動脈疾病方面具有潛力。羅小文[30]研究發現，丹參葛根水提物和乙酸乙酯部位都可以通過調節動脈粥樣硬化鵪鶉的脂質代謝紊亂、抑制脂質斑塊形成、改善內皮細胞功能，防止鵪鶉動脈粥樣硬化的發展，作用機制涉及總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、丙二醛（MDA）含量的降低，高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、載脂蛋白A1（ApoA1）含量的升高，超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮合酶（NOS）活性的增強等。此外，有研究表明[31]，丹參-葛根水提物可以通過抗炎、抗泡沫細胞形成、防止血管平滑肌細胞增殖等作用防止動脈粥樣硬化的發展。

2.1.4 抗炎

有研究表明[32]，丹參-葛根水提物可以通過抑制白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）等炎性因子的產生，降低IκB 激酶α/β（IKKα/β）的活性，防止IκBα 降解，抑制核因子-κB（NF-κB）發生核轉位，進而抑制脂多糖誘導的RAW 264.7巨噬細胞的炎癥反應。

2.1.5 抗氧化

肖覃等[33]研究發現，丹參-葛根藥對提取物的抗氧化活性主要是通過清除DPPH 自由基實現的，且丹酚酸B、迷迭香酸和葛根素清除自由基的藥理活性強。

2.1.6 改善血液循環

唐洪梅等[9]以糖尿病眼病大鼠為模型，研究發現，模型大鼠給予丹參-葛根提取液灌胃后，脈絡膜局部小血管充血減少，視網膜基本恢復至正常狀態，糖尿病眼病的癥狀改善，效果優于葛根單獨使用。

2.1.7 調節免疫

孟祥博[34]分別以丹參、葛根以及丹參-葛根藥對水提物處理小鼠脾淋巴細胞，并采用微量熱法和CCK-8法對小鼠脾淋巴細胞生長、代謝、增殖過程進行檢測，結果發現，丹參、葛根以及丹參-葛根藥對水提物均能提高小鼠脾淋巴細胞生長代謝的產熱量，提高其生長速率，促進其增殖，并有一定的量效關系，且丹參-葛根藥對效果更優。

2.2 丹參、葛根的有效成分配伍的藥理作用

2.2.1 抗心肌缺血

Gao 等[35]以心肌梗死小鼠為模型，以丹參酮IIA 和葛根素為研究對象，結果發現，丹參酮IIA 和葛根素能夠通過改善心臟功能、減少膠原蛋白的合成、抑制心肌纖維化和心室重構來改善心肌梗死小鼠的血液動力學，起到抗心肌缺血的作用，該實驗比較了丹參酮IIA 和葛根素的配伍比例為1∶1 和1∶2 時的治療效果，結果表明，丹參酮IIA和葛根素的配伍比例為1∶1時的治療效果更佳。

2.2.2 抗氧化、保護血管內皮細胞、改善血流動力學、抗炎、降血糖

楊雪等[36]、李恒華等[37]研究表明，丹參酮ⅡA 與葛根素配伍，可以通過減少氧化應激損傷、保護血管內皮細胞、調節凝血-纖溶系統以及抑制炎癥反應來緩解糖尿病大鼠的血管病變，配伍使用的效果優于丹參酮ⅡA 或葛根素單獨使用。朱海燕等[38]研究表明，丹參酮ⅡA、葛根素或丹參酮ⅡA 與葛根素配伍，都可以使糖尿病腎病大鼠的尿量和尿蛋白減少，血糖的含量及腎組織p27kip1的表達降低，丹參酮ⅡA 與葛根素高、低劑量組改善大鼠糖尿病腎病的效果優于丹參酮ⅡA高、低劑量組和葛根素高、低劑量組，這說明丹參酮ⅡA 與葛根素配伍的效果優于丹參酮ⅡA 或葛根素單獨使用，以丹參酮ⅡA與葛根素高劑量組的效果最顯著。

綜合以上研究結果發現，體內和體外實驗都能證明丹參-葛根藥對良好的藥理活性。Deng 等[27]、馬和碩等[28]、孟祥博[34]的研究結果表明，丹參-葛根藥對在舒張腦血管、保護腦缺血再灌注損傷、調節免疫方面具有協同增效作用，楊雪等[36]、李恒華等[37]、朱海燕等[38]的研究從成分配伍的角度佐證了丹參、葛根配伍的協同增效作用，但對丹參-葛根藥對協同增效作用機制研究較少，對丹參、葛根有效成分配伍的藥理作用研究也較少，這些都需要進一步研究。

3 臨床應用

3.1 丹參-葛根藥對的臨床應用

3.1.1 冠心病心絞痛

廖菽丹等[39]隨機將420 例冠心病心絞痛患者分為對照組（西藥拜阿司匹林腸溶片、阿托伐他汀鈣片等治療）和治療組（在對照組西藥治療的基礎上，每天加用15 g 丹參配方顆粒和15 g 葛根配方顆粒，分3 次沖服），治療后，治療組總有效率為88.5%，高于對照組的68.1%；心電圖改善率為92.6%，高于對照組的62.3%；治療組的TC、低密度脂蛋白（LDL）、TG 等血脂水平的改善程度優于對照組，差異均具有統計學意義，此研究結果表明，丹參葛根配方顆粒治療冠心病心絞痛的效果優于常規西藥治療。另外，續平等[40]通過臨床實驗發現，丹參葛根膠囊能使冠心病患者的血管功能和結構得到改善，此膠囊治療冠心病耐受性良好，可在冠心病的二級預防中應用。

3.1.2 血管病變

甄秉言等[41]將98例外周血管病伴間歇性跛行的患者分為安慰劑組和丹參葛根膠囊組，兩組患者分別口服安慰劑和丹參葛根膠囊，安慰劑與丹參葛根膠囊外觀相同，均500 mg/粒，患者服用方法如下：3粒/次，2次/日，共服用24周，治療后，丹參葛根膠囊組的患者的血管功能及微循環改善，最大行走距離明顯增加，步行能力得到改善，而安慰劑組患者癥狀改善的情況不明顯。

3.1.3 糖尿病周圍神經病變

文燕[42]將72 例糖尿病周圍神經病變（DPN）患者隨機分為對照組（口服甲鈷胺片，1.5 mg/日，每日分3次服用）和觀察組（每日分3次服用15 g丹參配方顆粒和15 g 葛根配方顆粒），兩組DPN 患者服用藥物的同時均采用胰島素控制血糖，治療后，觀察組總有效率為94.4%，高于對照組的69.5%，差異有統計學意義，這表明，丹參葛根配方顆粒在治療DPN 方面取得了較好的效果。

3.1.4 視網膜靜脈阻塞

蔡善安[43]對52 例視網膜靜脈栓塞（RVO）患者的58 只RVO 眼睛進行了研究，患者每日在服用維生素B、C 類藥物的基礎上，加服丹參-葛根水煎液（每日將30 g 丹參、150 g 葛根加適量水煎煮，早晚服用，7 日/療程，共3個療程），治療后，僅6只RVO 眼睛的視力沒有提高、視網膜出血的癥狀沒有改善，治療總有效率達89.7%，這表明，丹參-葛根水煎液治療視網膜靜脈阻塞效果較好。

3.2 丹參、葛根有效成分配伍的臨床應用

白勇濤等[44]將100 例首發急性腦梗死患者分成對照組（葛根素靜脈滴注，葛根素0.5 g/日）和實驗組（對照組治療的基礎上，加用丹參酮注射液，丹參酮0.1 g/日），治療后，實驗組患者不良反應發生率為2%，低于對照組的26%；實驗組有效率為88%，高于對照組的56%；實驗組生存質量得分為（80.42 ± 12.45）分，明顯高于對照組的（20.42±10.34）分，差異均具有統計學意義，此研究結果表明，葛根素與丹參酮注射液合用治療急性腦梗死的效果優于葛根素注射液單獨使用，且不良反應發生率低。另外，曾勝煌等[45]通過臨床研究發現，丹參酮ⅡA 磺酸鈉注射液與葛根素注射液合用，治療慢性充血性心力衰竭療效較好。

可見，丹參-葛根藥對在臨床應用廣泛，治療的疾病涉及冠心病、急性腦梗死、糖尿病周圍神經病變等，以心腦血管疾病居多。研究丹參-葛根藥對的臨床應用，不僅可以指導臨床合理用藥，也可以為新藥的開發提供基礎。目前，臨床應用方面，以丹參-葛根藥對為原料藥的制劑主要是丹參葛根配方顆粒、丹參葛根膠囊，丹參、葛根有效成分的制劑在臨床也常合用，其中，丹參酮注射液聯合葛根素注射液的應用較多，這些制劑主要用于治療心腦血管疾病，療效較好，但是偶爾會發生不良反應。近期，其它含有丹參、葛根有效成分的制劑也已經被研制出來，Guo 等[46]研究制備了丹參酮和葛根素前藥共載固體脂質納米粒，實驗表明，其治療心肌梗塞的效果顯著優于丹參酮或葛根素單獨裝載的固體脂質納米粒，此外，該藥藥效持久，可以作為有前景的治療心肌梗塞的藥物使用。以丹參總丹參酮、總酚酸和葛根總黃酮為有效組分的丹葛酚酮膠囊已獲得國家藥品監督管理局的臨床批件，審批上市后將用于糖尿病周圍神經病變的治療[47]。

4 小結及展望

丹參-葛根藥對包括丹參酮ⅡA、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ、丹酚酸B、葛根素等主要有效成分，具有保護心肌、防止腦缺血再灌注損傷、防止動脈粥樣硬化、抗炎、抗氧化等藥理作用，在臨床多用于心腦血管疾病的治療，并且取得了良好的療效。未來，丹參-葛根藥對還有更大的研究潛力可挖掘，如：①研究丹參-葛根藥對的化學成分時，可以采用HPLC，建立丹參、葛根以及丹參-葛根藥對的指紋圖譜，將藥對與單一藥味相比較，全面分析其化學成分變化，同時測定主要有效成分的含量，考察共煎對某些成分含量的影響，以確定丹參-葛根作為藥對使用后化學成分的含量和數量的變化；此外，借助代謝組學、翻轉腸囊法、Caco-2細胞模型等方法研究此藥對在體內化學成分的變化，也非常必要；②研究丹參-葛根藥對的藥理作用時，應注重此藥對中丹參與葛根的相互作用研究，注意將藥理作用研究與藥效物質研究相結合，在充分了解丹參-葛根藥對的藥效物質的基礎上，探求藥效物質在含量、數量方面的變化對此藥對藥理作用的影響，并探索將丹參、葛根更多的有效成分配伍使用，挖掘它們更多的藥理作用及作用機制；此外，還可以利用網絡藥理學等技術，對丹參-葛根藥對發揮作用可能涉及的藥效物質、靶點及通路進行預測，根據預測的結果開展實驗，進行驗證；③臨床研制丹參-葛根新制劑時，應注意根據疾病的性質、特點以及制劑的藥動學和藥效學的特點，確定丹參、葛根藥材或其有效成分的最佳配伍比例，選擇合適的制備工藝，以使丹參-葛根制劑更好地應用于臨床。