犬細小病毒病研究進展

黃雅琴 劉進輝

（湖南農業大學動物醫學院，湖南長沙 410128）

犬細小病毒病（Canine Parvovirus Infection，CP）是由犬細小病毒（Canine Parvovirus，CPV）引起的烈性傳染性疾病，對2～6月齡幼犬危害最大，嘔吐、腹瀉和出血性腸炎為主要臨床表現。該病在流行期間已分離出多株變異病毒，包括CPV-2、CPV-2a/2b、New CPV-2a/2b、CPV-2c（a）、CPV-2c（b） 和 CPV-2c。由于變異率高，該病至今一直在世界各地肆虐，給養犬業造成極大的威脅。

1 犬細小病毒

（1）CPV的形態結構

CPV屬于細小病毒科（Parvoviridae），細小病毒亞科（Parvovirinae），原細小病毒屬（Protoparvovirus），該屬還包括貓細小病毒（FPV），水貂腸炎病毒（MEV）等其他病毒。有研究發現，CPV和FPV、MEV有非常密切的親緣關系[1]，三者的病毒形態結構、核酸DNA、蛋白核衣殼幾乎完全一樣[2]，有學者將這種現象歸納為細小病毒的不同分離株[3]。

CPV為線性負股單鏈DNA病毒，無囊膜，是一種食肉動物原病毒。病毒粒子呈正二十面體對稱，為圓形或六邊形，直徑約25 nm，核衣殼由32個長3 ～ 4 nm的殼粒構成，整個病毒一共由60個VP1和VP2交替的基序構成。蛋白質質量占總質量的60%以上，其余為DNA。病毒粒子的分子質量為5.5×106 ～ 6.2×106 Da，在氯化銫中的浮力密度為1.39 ～ 1.42 g / cm3[4]，沉淀系數為23 S～ 27 S。

（2）CPV的理化性質

穩定性：所有細小病毒在外界環境中都是高度穩定的[5]。在pH 3～9、56℃條件下，CPV可保持1 h以上的活性。長期存放于低溫環境對CPV的感染力基本不會有影響[6]，常溫下可存活至少3個月，并且CPV的感染力只是略有下降，即使在常溫下放置數月甚至數年，仍能從病犬的糞便中檢測到病毒的存在。該病毒對高溫也具有一定的耐受力，65℃條件下可存活至少30 min；80℃條件下也能存活數十分鐘[7]。酒精、乙醚、氯仿等脂質溶劑、胰蛋白酶和大多數消毒劑不能有效殺滅CPV，但一些常規消毒劑，如0.5%福爾馬林、氨水、0.175%次氯酸鈉能起到很好的殺滅作用，另外氧化劑、紫外線也能使CPV失活[8]。

血凝性：因血凝素的存在，CPV能特異性地與豬、馬、恒河猴等多種動物的紅細胞結合，產生凝集現象。但不能與人和牛、羊、家禽等動物的紅細胞結合。CPV的血凝性很強，滅活后血凝性基本不變，4℃環境下仍可凝集豬、恒河猴的紅細胞。這種血凝特性可以作為CPV鑒定的參考指標[9-11]。CPV的血凝活性對pH有一定的要求，當pH ＞ 6.0時，CPV的血凝活性顯著降低，pH5.8～6.0是CPV血凝試驗的最適pH范圍。血凝活性對溫度也有要求，當外界溫度處于37℃時，血凝試驗敏感性顯著降低，效果不佳。并且CPV在不同的溫度和pH條件下，對不同物種紅細胞的血凝性和敏感性都不同。比如，4℃環境下，豬、恒河猴等動物的紅細胞會發生凝集，但禽類、鼠類等紅細胞無凝集現象[12]。所以在進行CPV的血凝試驗時，要合理設置實驗環境，以達到最佳試驗效果。

培養特性：CPV可在犬腎細胞（MDCK）、貓腎細胞（F81、CRFK）、犬腸管細胞等多種宿主細胞上生長，但不能在雞胚中增殖[13]。CPV的復制機制有缺陷，不能單獨進行復制，需在宿主細胞染色體復制開始后，依賴于宿主細胞的聚合酶和其復制體系來進行基因組復制。所以CPV傳代通常采用S期同步接毒或40%～50%貼壁時再接種，此時細胞中富含聚合酶，有利于提高病毒滴度和病毒收集率。若要延遲接毒，則不能超過24 h。接種后一般不會馬上出現細胞病變，通常盲傳到2～5代時可觀察到細胞脫落、崩解和破碎等明顯的細胞病變[14-18]。

（3）致病機理

CPV通過糞口傳播，對有絲分裂活性組織有親嗜性，如淋巴組織、腸隱窩上皮細胞和骨髓，以及新生幼犬的心臟[19]。病毒首先在口咽的淋巴組織、腸系膜淋巴結和胸腺進行復制，隨后在血液循環的帶動下傳播到全身，3 ～ 5 d就會引起病毒血癥，然后傳播至小腸絨毛隱窩，形成嗜酸性核內包涵體[20-21]。因淋巴和骨髓中病毒大量繁殖使白細胞數顯著減少，所以大多數病犬在血常規檢查時會出現白細胞低于正常值的現象[22]。在健康犬的小腸中，從隱窩端遷移出的腸上皮細胞在絨毛頂端分化成熟，然后得到消化吸收的能力進而幫助機體吸收營養[23-24]。但CPV侵入腸隱窩后，正常腸上皮細胞的更新被破壞，而成型的絨毛鈍化、萎縮并逐漸失去吸收能力[25-26]。嚴重的腸炎，可因內源性毒素被吸收而致自體中毒，還增加了病毒易位和大腸桿菌敗血癥的風險，導致感染性休克并最終死亡[27]。研究發現，在2～3周齡血清陰性幼犬中，CPV可在心肌細胞中復制，引起急性心肌炎[28]。

2 犬細小病毒病

（1）臨床癥狀

腸炎型：潛伏期自然感染的為7～14d，人工感染的為4～5d，潛伏期期間患犬和健康犬無區別，潛伏期后，病犬開始出現精神沉郁、拒飲拒食、嘔吐、腹瀉等異常病理癥狀[29]。病初，病犬吐出白色泡沫狀穢物，逐漸變為黃色粘稠狀，極少可見帶有血絲的淡綠色膽汁嘔吐物[30]，隨著病情發展，嘔吐物變為黃綠色粘稠狀的膽汁。由于嘔吐，大量體液散失，病犬可能出現脫水；嘔吐嚴重時還可能造成腸套疊現象。典型臨床表現是腹瀉，病初犬糞便稀軟、不成型[31]，然后很快出現番茄水樣血便，伴有腐臭味；伴隨著犬大量失血，病犬的眼結膜、口腔粘膜呈現發紺，蒼白等病理現象。患病后期則出現黃疽、體溫過低、靜脈凝固等現象[32]。病犬的死因大多是脫水、電解液不平衡、大量的病毒感染等，其中幼犬因抵抗力差死亡率尤其高[33]。

心肌炎型：該類發病急，且無任何征兆，多是因4～6周齡的幼犬體內母源抗體滴度不夠而導致發病。發病突然，且整個病程結束十分迅速，死亡率高達60～100%。病初，病犬精神狀況良好，偶見拉稀、嘔吐和體溫上升；隨后身體機能急劇減退，出現呻吟、可視粘膜蒼白、干咳、呼吸困難等癥狀，聽診時可發現心內雜音、心律不齊等病理現象，最終病犬因急性心力衰竭而死亡[34-35]。

（2）防治

目前，針對犬細小病毒病的防制沒有特別有效的藥物，主要還是考慮免疫接種，一般使用生產成本較低的滅活疫苗和弱毒疫苗。我國主要使用的是CPV-2b型，但已被證實該型疫苗對幼犬無法起到完全免疫作用[36]。考慮到CPV的高突變率、弱毒苗毒力返祖、免疫接種失敗等現象，新型疫苗的研發依舊很急迫，例如基因工程疫苗、核酸疫苗、載體疫苗等都處于研發當中。

主人在購買犬時應仔細觀察犬的表現；對于流浪犬，在決定領養后，務必去正規醫院進行檢查；在飼養過程中，要注意飲食飲水和犬舍的衛生，做好定期消毒；春冬兩季時，應加強保暖，加強營養；在幼犬未適應環境前，應細心照看，避免應激；待犬適應后，應及時帶犬到正規醫院接種疫苗。

3 小結

隨著寵物行業的蓬勃發展，養犬人數一直在激增。近幾年來，犬細小病毒病的肆虐給養犬業和養犬人士帶來了巨大的傷害。高致病率和高致死率讓犬細小病毒病成為威脅犬科動物健康的可怕疾病之一，而現有疫苗的保護能力還有待提高，需要進一步探索新型基因工程疫苗的可能性。