蘭嶼肉桂組織培養技術初探

陳海霞

摘 要 蘭嶼肉桂既是優美的盆栽觀葉植物，也是重要的園林綠化植物。試驗以蘭嶼肉桂的帶芽莖段為外植體，研究了不同外源激素配比對蘭嶼肉桂組織培養的影響。結果表明：帶芽莖段誘導腋芽較適宜的培養基為MS+6-BA 1.5 mg·L-1 +NAA 0.10 mg·L-1，誘導率為87.5%;適宜的增殖培養基為MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA?0.10 mg·L-1，增殖系數為3.15。

關鍵詞 蘭嶼肉桂;組織培養;外植體

中圖分類號：S573.9 文獻標志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2020.30.072蘭嶼肉桂（Cinnamomum kotoense Kanehira et Sasaki）

又名紅頭嶼肉桂、大葉肉桂、臺灣肉桂、平安樹，為樟科樟屬的常綠喬木，主要分布于我國臺灣地區南部（蘭嶼）[1]，在我國南方廣泛栽培。蘭嶼肉桂樹型端莊，葉色亮綠，全株能散發清新香氣，凈化空氣，有益于人身心健康，既是理想的室內盆栽觀葉植物，又是重要的城市綠化景觀植物，具有十分廣闊的市場前景。蘭嶼肉桂傳統的繁殖方法是采用播種育苗[2]，關于其組織培養的研究還未見報道。利用現代植物組織培養技術，可加快種苗繁育速度，實現種苗的工廠化生產，給經營者帶來豐厚的經濟效益。本研究以蘭嶼肉桂的莖段為外植體，探討了不同外源激素配比對其離體培養的影響，填補了蘭嶼肉桂組織培養研究的空白，對蘭嶼肉桂工廠化育苗具有一定意義。

1 材料與方法

1.1 試驗地點與材料

試驗在咸寧市園林科學研究所進行，供試材料來自咸寧職業技術學院園藝實訓基地生長健壯的蘭嶼肉桂植株。從采樣前60 d開始，每7 d對植株噴施噁霉靈的500倍液1次。

1.2 試驗方法

1.2.1 外植體的處理

選取生長健壯、無病蟲害的嫩枝為外植體，去除葉片，先用洗潔凈溶液浸泡10～20 min，再在流水下沖洗

30 min，放置在干凈的燒杯中備用。在超凈工作臺上將預處理好的外植體先用75%的酒精浸泡30 s，無菌水漂洗3次;再用0.1%的升汞浸泡10 min，無菌水漂洗7～8次[3]。然后將外植體放在無菌濾紙上吸干表面水分，切割成1.5 cm左右帶芽的莖段，接種于誘導培養基中。

1.2.2 外植體的誘導

誘導培養基以MS為基本培養基，添加6-BA

（0.5 mg·L-1、1.0 mg·L-1、1.5 mg·L-1）、NAA（0.05 mg·L-1、0.10 mg·L-1、0.15 mg·L-1），共設計9個處理，試驗不同濃度的6-BA和NAA組合對蘭嶼肉桂誘導培養的影響。接種45 d后，統計腋芽誘導率。每個處理的培養基中均添加30 g·L-1的蔗糖、7 g·L-1的瓊脂和2 g·L-1的活性炭。

1.2.2 增殖培養

將初代培養誘導成功的無菌苗切割成2.0 cm左右帶芽的莖段，接種到繼代培養基上進行增殖培養。增殖培養基以MS為基本培養基，添加6-BA（1.0 mg·L-1、1.5 mg·L-1、2.0 mg·L-1）、NAA（0.10 mg·L-1、0.15 mg·L-1、0.20 mg·L-1），共設計9個處理，每個處理的培養基中均添加30 g·L-1的蔗糖、7 g·L-1的瓊脂、2 g·L-1的活性炭。繼代培養45 d后，統計增殖芽數，計算增殖系數。

1.3 培養條件

所有培養基pH值均為5.8。培養溫度（25±2）℃，光照強度1 000～2 000 lx，光照時間13 h·d-1。

2 結果與分析

2.1 不同培養基對蘭嶼肉桂誘導培養的影響

在植物組織培養中，生長素和細胞分裂素對側芽的萌發生長起著非常重要的作用。由表1可知，蘭嶼肉桂莖段誘導培養中，在試驗濃度范圍內，隨著6-BA濃度的增大，外植體誘導率上升。當6-BA濃度為1.5 mg·L-1、NAA濃度為0.10 mg·L-1時效果最好，誘導率達87.5%，明顯高于其他處理。因此，蘭嶼肉桂莖段誘導培養較適宜的培養基為MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1。

2.2 不同培養基對蘭嶼肉桂增殖培養的影響

適宜的外源激素配比可以促進中間繁殖體系的增殖，提高芽的增殖速度。由表2可知，在添加有不同激素配比的培養基中，增殖情況有一定的差異。在試驗濃度范圍內，當NAA濃度不變時，隨著6-BA濃度的增大，增殖系數呈先升高后降低的趨勢。當6-BA濃度為1.5 mg·L-1、NAA濃度為0.10 mg·L-1時，增殖系數最大為3.15，明顯高于其他激素配比。因此，蘭嶼肉桂適宜的增殖培養基為MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1。

3 結論

外源激素是培養基中的關鍵物質，對植物組織培養起著決定性作用。對于不同的培養材料和培養目的，不同種類、濃度和配比的外源激素的效果存在很大差異。本研究以蘭嶼肉桂的莖段為外植體，研究不同濃度的6-BA和NAA配比對其莖段培養的影響。結果表明：腋芽誘導培養、繼代增殖培養均可成功操作;得到較適宜的誘導培養基為MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1，誘導率為87.5%;繼代增殖培養基為MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1，增殖系數為3.15。

參考文獻：

[1] 中國植物志第31卷[M].北京：科學出版社，1982.

[2] 劉文，曾曉輝，鄧美紅，等.蘭嶼肉桂露地種植技術規程[J].安徽農業科學，2016，44（28）：154-156.

[3] 劉穎嘉，韓藝花，叢中笑，等.肉桂組織快繁技術——外植體消毒及褐化控制的研究[J].現代園藝，2014

（11）：15-16.

（責任編輯：趙中正）