冷凝集對血常規(guī)檢測結(jié)果的干擾性與改善對策分析

[摘要]目的：探討冷凝集對血常規(guī)檢驗結(jié)果的干擾性和改善的對策。方法：實驗對象為我院收治的80例接受孕前檢查和婚檢血型鑒定人群，從受檢者的靜脈血血常規(guī)檢驗結(jié)果中挑選出紅細(xì)胞平均血紅蛋白量（MCH）≥35pg且血細(xì)胞分析儀報警信息為紅細(xì)胞（RBC）凝集的標(biāo)本，使用血細(xì)胞分析儀對為經(jīng)過處理的不同效價冷凝集素標(biāo)本進行檢測，并且所有標(biāo)本均采取37°C水浴法、血漿置換法以及預(yù)稀釋法處理，觀察并分析三種檢查的檢驗結(jié)果。結(jié)果：80例冷凝集素標(biāo)本中，直接上機檢查可見患者MCV、MCH、MCHC水平均明顯增高，HCT指標(biāo)降低（P<0.05）;37°C水浴法處理后MCH和MCHC指標(biāo)和預(yù)稀釋法、血漿置換法相比較高（P<0.05）;血漿置換法處理后，PLT指數(shù)下降（P<0.05）;預(yù)稀釋法處理后所用檢查項目均逐漸恢復(fù)正常。結(jié)論：和37°C水浴法、血漿置換法相比，采用預(yù)稀釋法處理冷凝集素標(biāo)本，可保證血常規(guī)檢驗的準(zhǔn)確度和有效性，并且操作簡單，值得臨床推廣。

[關(guān)鍵詞]冷凝集;血常規(guī)檢驗;干擾性;改善對策

[中圖分類號]R446.11

[文獻標(biāo)識碼]A

[文章編號]2096-5249（2021）24-0185-02

血常規(guī)檢驗（blood routine examination）是臨床上常見的檢查方法之一，一般使用自動化血細(xì)胞分析儀進行檢驗，大大提高了血常規(guī)檢測的準(zhǔn)確性與效率[1]。本文采取37°C水浴法、血漿置換法和預(yù)稀釋法處理80例MCH≥35pg且血細(xì)胞分析儀報警信息為紅細(xì)胞凝集的標(biāo)本，觀察三種處理方法的血常規(guī)檢驗結(jié)果，并對結(jié)果和處理措施進行分析，以期選出最優(yōu)的冷凝集標(biāo)本處理措施，確保血常規(guī)檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性匯報如下。

1資料與方法

1.1一般資料實驗對象為我院2019年2月至2020年6月收治的80例接受孕前檢查和婚檢血型鑒定人群。男女人數(shù)比例為42：38，最小23歲，最大33歲，平均年齡（28.4±3.7）歲。所有實驗對象基本信息對比無顯著差別（P>0.05），存在可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：1年齡小于50歲;2紅細(xì)胞平均血紅蛋白量≥35pg;3經(jīng)告知后所有實驗對象均同意參與。排除標(biāo)準(zhǔn)：1患有嚴(yán)重心、腦血管疾病的患者;2患有惡性腫瘤的患者;3患有嚴(yán)重貧血癥的患者;4凝血功能嚴(yán)重障礙的患者;5患有脂血癥、黃疸的患者;6發(fā)生溶血的患者。

1.2方法（1）儀器和試劑選用mindrayBc-5180全自動血細(xì)胞分析儀及配套原裝試劑與質(zhì)控品。血常規(guī)檢測前對儀器進行檢查校準(zhǔn)，保證每日室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果均在設(shè)定的質(zhì)控范圍內(nèi)。健康成人O型2%洗滌RBC和O型臍血2%洗滌RBC為新鮮自制。（2）80例冷凝集素標(biāo)本均按以下方法進行處理：1使用真空抗凝采集管抽取每例患者2份靜脈血，按照實驗室操作規(guī)程正常進行血細(xì)胞分析。2觀察每份冷凝集素標(biāo)本在血細(xì)胞分析儀上的報警信息、RBC直方圖。3在4°C室溫下制作血薄涂片瑞氏染色鏡檢。同時取試管一支加入混勻的標(biāo)本0.2mL和生理鹽水0.6mL混合均勻制作成4倍稀釋標(biāo)本;將稀釋標(biāo)本依次在室溫4°C、37°C條件下平衡5min后分別用肉眼和涂片顯微鏡觀測。4將標(biāo)本置37°C溫箱孵育0.5h后保溫上機測定，然后離心機分離血漿（離心率為3000r/min，持續(xù)時間為5min），采用離心機配套的移液器和吸頭取出上層血漿棄掉，樣本加入等量生理鹽水混合，反復(fù)三次后，上機檢測。5抗體特異性鑒定用健康成人O型2%洗滌RBC和O型臍血2%洗滌RBC分別與血漿等量混合，4°C平衡5min后分別觀測。如有凝集放置37°C溫箱孵育箱中平衡5min后再觀測有無凝集現(xiàn)象。6冷凝集素試驗用血漿按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》要求操作，同時做對照。

1.3觀察指標(biāo)觀察并統(tǒng)計冷凝集素標(biāo)本經(jīng)過37°C水浴法、血漿置換法以及預(yù)稀釋法處理后的血小板（PLT）、紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（Hb）、白細(xì)胞（WBC）、紅細(xì)胞平均體積（MCV）、紅細(xì)胞比容（HCT）、紅細(xì)胞平均體積（MCV）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量（MCH）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）指標(biāo)。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法利用SPSS22.0專業(yè)統(tǒng)計軟件對本次檢查結(jié)果進行分析，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗，P<0.05可認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1觀察3種不同方法處理冷凝集素標(biāo)本的檢測結(jié)果由表1數(shù)據(jù)可知，采用預(yù)稀釋法處理冷凝集素標(biāo)本后，紅細(xì)胞相關(guān)指數(shù)、血小板、白細(xì)胞、血紅蛋白等指標(biāo)均恢復(fù)正常;37°C水浴法處理后紅細(xì)胞在血涂片上少量凝聚，其他兩種方法未見紅細(xì)胞凝聚。

3討論

血常規(guī)是臨床上較為常見的檢測方法之一，可以利用檢測血液中細(xì)胞形態(tài)以及數(shù)量等對疾病進行診斷。當(dāng)人們體內(nèi)某一組織發(fā)生病變時，血液中的某些成分便會發(fā)生病理性變化，對受檢者血液中的細(xì)胞形態(tài)和數(shù)量進行檢查，可以對其身體狀況和部分疾病進行診斷，為臨床診治提供有效依據(jù)。采用血細(xì)胞分析儀雖然提高了血常規(guī)檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確度，但容易受到冷凝集影響。患有衣原體肺炎和自身免疫性疾病患者的外周血中普遍存在冷凝激素。冷凝集素綜合征是指以微循環(huán)血栓、慢性溶血性貧血為主要特征的疾病，外界溫度降低和自身反應(yīng)性紅細(xì)胞凝聚均會造成該癥狀。冷凝激素是一種單克隆或者多克隆自身抗體，大部分淋巴網(wǎng)狀細(xì)胞腫瘤病人均伴有單克隆冷凝激素，支原體肺炎病人普遍存在多克隆冷凝激素。正常人體血清中基本都含有低滴度的冷凝激素，當(dāng)冷凝激素效價小于1：16時不影響血常規(guī)檢查結(jié)果，不具備臨床意義，效價越高對血常規(guī)檢查結(jié)果影響越顯著。

3.1冷凝集表現(xiàn)形式冷凝集容易對血常規(guī)檢驗的準(zhǔn)確性造成干擾，其能對RBC膜抗原的IgM產(chǎn)生作用，當(dāng)溫度低于31°C時，冷凝激素會造成RBC聚集，在進行血常規(guī)檢查時會出現(xiàn)RBC假性降低的情況，且造成MCV、MCH、MCHC水平異常升高，同時對WBC、PLT檢查結(jié)果造成影響，但這些現(xiàn)象具有可逆性。健康人群血液中的抗RBC抗體的效價相對較低，不容易導(dǎo)致RBC產(chǎn)生冷凝集;但當(dāng)人體發(fā)生病理性變化時，如在多發(fā)性骨髓瘤、嚴(yán)重貧血的病人血液中冷凝集素的效價相對較高，容易誘發(fā)嚴(yán)重的冷凝集，從而發(fā)生相應(yīng)的臨床反應(yīng)，其具有可逆性[2]。大部分人認(rèn)為只有在體溫溫度下降的情況下才會發(fā)生冷凝集現(xiàn)象，其實在溫度較高的條件下也容易發(fā)生冷凝集現(xiàn)象，這種患者冷凝集素的效價普遍較高，因此形成冷凝集的溫度范圍比較寬。

3.2冷凝集對血常規(guī)檢驗結(jié)果的影響全自動血細(xì)胞分析儀的原理是細(xì)胞利用一定大小的孔徑產(chǎn)生不同的電阻信號，而儀器收集信號對細(xì)胞進行計數(shù)，但是如果血液中有高效價的冷凝集素，便會導(dǎo)致RBC聚集在一起穿過檢測孔，儀器不能準(zhǔn)確判斷通過的是一個細(xì)胞還是聚集在一起的細(xì)胞，從而將聚集在一起的細(xì)胞當(dāng)做單個細(xì)胞穿過檢測孔，產(chǎn)生電阻脈沖信號也僅有一個，故對紅細(xì)胞計數(shù)造成干擾，降低了紅細(xì)胞計數(shù)結(jié)果，使紅細(xì)胞遠(yuǎn)低于實際濃度，導(dǎo)致紅細(xì)胞假性降低;并且，紅細(xì)胞聚集在一起穿過檢測孔時，極易被儀器當(dāng)做大紅細(xì)胞，造成脈沖振幅提高，進而導(dǎo)致紅細(xì)胞平均體積增加和紅細(xì)胞分布圖異常現(xiàn)象。臨床上主要使用37°C水浴加熱法預(yù)防冷凝激素對血常規(guī)檢驗結(jié)果的影響，在一定程度上能減少RBC聚集，但血液中冷凝集效價較高時，這種方法效果并不理想。血漿置換法主要使用生理鹽水置換血漿，從而消除血液中的冷凝集素，雖然能解決冷凝集問題，但在置換后常常出現(xiàn)WBC和PLT指數(shù)下降的現(xiàn)象[3]。采用預(yù)稀釋法處理血液冷凝集現(xiàn)象，可有效降低冷凝集素效價，使PLT、RBC、WBC、MCV、HCT、MCV等指標(biāo)恢復(fù)正。本文研究結(jié)果可看出，冷凝集現(xiàn)象對臨床血常規(guī)檢驗結(jié)果會產(chǎn)生較大的影響，冷凝集素會導(dǎo)致RBC計數(shù)異常減少，MCHC水平明顯提升，如果在血常規(guī)檢查時處理不當(dāng)，便會影響檢查結(jié)果，不利于醫(yī)生對患者的準(zhǔn)確診斷和治療，因此，在出具血常規(guī)檢驗報告時可結(jié)合三種處理方法進行綜合分析，可提高檢驗準(zhǔn)確性。

綜上所述，37°C水浴法、血漿置換法、預(yù)稀釋法對解決血液中的冷凝集素均有效果，但冷凝集效價較高時37°C水浴法效果欠佳，存在一定局限性;血漿置換法容易導(dǎo)致WBC、PLT指數(shù)下降。預(yù)稀釋法對降低冷凝集素效價具有顯著效果，能有效提高血常規(guī)檢驗的準(zhǔn)確性，并且操作方便，值得進一步推廣。

參考文獻

[1]張艷萍，邵玲俐.紅細(xì)胞冷凝集對血常規(guī)結(jié)果的干擾及處理對策探討[J].中國實用醫(yī)藥，2019，14（16）：82-83.

[2]劉永勝.涼山州布拖縣1890名彝族成人血常規(guī)指標(biāo)參考區(qū)間的研究[J].醫(yī)學(xué)檢驗與臨床，2019，30（8）：48-49.

[3]孫敏，候莉芬.冷凝集素現(xiàn)象對血常規(guī)檢測的影響[J].實用醫(yī)技雜志，2019，26（1）：62-63.

作者簡介：鐘美梅（1986.02-），女，漢族，本科學(xué)歷，主管檢驗師，研究方向：檢驗。