壯藥龍珠果不同藥用部位揮發性成分研究△

譚勇，黃鼎，杜沛霖*，黃榮韶，黃國林，姚紹嫦，趙立春，俞鵬

1.廣西中醫藥大學 藥學院，廣西 南寧 530200；2.廣西壯瑤藥重點實驗室，廣西 南寧 530200

龍珠果PassiflorafoetidaL.為西番蓮科西番蓮屬多年生草質藤本植物。該植物多生長于海拔60～150 m的荒山草坡或灌叢中，分布在我國的福建、臺灣、廣東、海南、廣西、云南等省[1]。其果實甘甜可食，以地上部分入藥，具有清熱解毒、清肺止咳之功效，臨床多用于治療肺熱咳嗽、小便混濁、癰瘡腫毒、外傷性眼角膜炎、淋巴結炎等癥[2]。龍珠果中主要含有黃酮類化合物，其中主要成分有牡荊素、異牡荊素、葒草素、異葒草素等[3]。中藥揮發油具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗癌等藥效[4-6]。已有研究表明，同種藥材不同藥用部位揮發油含量存在差異[7]。目前關于龍珠果揮發油的研究尚未見報道。因此，本研究采用氣相色譜-質譜法(GC-MS)分析龍珠果不同部位揮發油含量，為其品質評價和質量標準的制定提供參考。

1 材料

1.1 試藥

龍珠果藥材采于南寧市良慶區，經廣西中醫藥大學中藥鑒定學教研室譚勇教授鑒定為西番蓮科植物龍珠果Passiflorafoetida L.全草，標本保存于廣西中醫藥大學中藥鑒定實驗室(ZJ201903)；乙酸乙酯(分析純，成都市科隆化學品有限公司)。

1.2 儀器

FW177型中藥粉碎機(永康市天祺盛世工貿有限公司)；ALC-210.2型電子天平(北京賽多利斯天平有限公司)；TSQ8000EVO型高靈敏度串接氣質連用儀(賽默飛世爾科技有限公司)。

2 方法

2.1 色譜條件

采用TG-SQC色譜柱(15 m×0.25 mm，0.25 μm)，柱溫采用程序升溫，初始溫度為40 ℃，保持1 min；然后以8 ℃·min-1的速度升至300 ℃，保持10 min；進樣口溫度為280 ℃，采用不分流模式，載氣為氦氣(99.999%)，流量1.0 mL·min-1，進樣量1 μL。

2.2 質譜條件

Trace1300s TSQ8000氣質聯用儀，電子轟擊離子源(EI)；離子源溫度300 ℃；掃描質量為m/z50～450。

2.3 樣品溶液制備

分別取龍珠果的果實、萼片、莖、葉新鮮材料，切碎后分別取5 g樣品置于100 mL錐形瓶中，加乙酸乙酯20 mL浸泡2 h，4000 r·min-1離心5 min(離心半徑為13.5 cm)，精密吸取上清液1 mL，微孔濾膜濾過，續濾液用無水硫酸鈉除水，即得到龍珠果各部位揮發性成分，收率分別為0.17%、0.08%、0.11%、0.05%。

2.4 質譜信息檢索

對樣品進行GC-MS分析后得到總離子流圖，各分離組分利用mainlib質譜庫檢索，結合相對保留時間和相關參考文獻確定化學成分。

3 結果與分析

3.1 龍珠果不同部位揮發性成分GC-MS圖及化合物信息

經數據處理并用峰面積歸一化法，從總離子流色譜圖(見圖1)中計算各組分的相對含量，將各峰的質譜圖經mainlib質譜庫檢索，結合保留時間(tR)和文獻報道[6]，初步鑒定出了31種化合物(見表1)。

注：A.根；B.莖；C.萼片；D.葉。圖1 龍珠果不同部位揮發性成分的GC-MS總離子流圖

表1 龍珠果不同部位揮發性成分比較

續表1

3.2 龍珠果不同部位揮發性成分分析

按表1所列出的化合物信息，龍珠果揮發性成分有6種類型：醛類、醇類、酮類、烯類、烷烴類、苯類。

龍珠果果實中共鑒定出13種化合物，相對含量之和占果實中揮發性成分總量的79.33%。其中相對含量較高的化合物有2-甲基-Z，Z-3，13-二烯醇(36.31%)、正二十一烷(20.53%)、二十五烷(4.17%)、6-壬基-5，6-二氫-2氫-吡喃-2-酮(4.14%)、角鯊烯(4.03%)。

龍珠果萼片中共鑒定出15種化合物，相對含量之和占萼片中揮發性成分總量的88.03%。其中相對含量較高的化合物有2-甲基-Z，Z-3，13-二烯醇(21.38%)、6-壬基-5，6-二氫-2氫-吡喃-2-酮(19.71%)、正二十一烷(12.76%)、乙酸銨(12.76%)、二十五烷(9.54%)。

龍珠果莖中共鑒定出12種化合物，相對含量之和占莖中揮發性成分總量的94.99%。其中相對含量較高的化合物有2-甲基-Z，Z-3，13-二烯醇(34.83%)、正二十一烷(28.92%)、甲苯(18.98%)、1，3，5-環庚三烯(5.17%)、二十五烷(2.02%)。

龍珠果葉中共鑒定出12種化合物，相對含量之和占葉中揮發性成分總量的84.12%。其中相對含量較高的化合物有2-甲基-Z，Z-3，13-二烯醇(33.73%)、正二十一烷(17.99%)、二十五烷(9.69%)、甲苯(14.79%)。

其中，龍珠果果實、萼片、莖、葉有3個共有成分，分別為二十五烷、2-甲基-Z，Z-3，13-二烯醇、正二十一烷，但是含量存在一定差異。龍珠果的果實、萼片、莖、葉有14個特有成分。特有成分占揮發性成分的45.16%，表明龍珠果的不同部位成分差異較大。

4 討論

已有研究表明，龍珠果干燥葉中牡荊素質量分數(0.073%)是干燥莖中質量分數(0.004 1%)的17.8倍，說明不同部位有效成分含量存在差異[8]。本研究采用GC-MS分析龍珠果果實、萼片、莖、葉4個不同部位的揮發性成分，共鑒定出31個成分。龍珠果不同部位有3個共有成分，相對含量存在一定差異；有14個成分是龍珠果不同部位所特有的。表明龍珠果不同部位揮發性成分與相對含量差異較大。本研究結果將為龍珠果藥材質量標準制定和臨床用藥提供參考。