小青龍湯聯合肺腸同治法對支氣管哮喘小鼠IL-4、IFN-γ水平的影響

陳英妹

支氣管哮喘是臨床常見的呼吸系統疾病，患者多表現為咳嗽、喘息、胸悶等癥狀，部分患者由于病情延長、反復發作，會對呼吸系統造成嚴重損傷。中醫治療能夠在針對致病機制進行治療的同時，還能夠對患者的機體運行進行調節，加強患者自身的免疫能力，加強治療效果[1]。支氣管哮喘的病理機制是由多種細胞參與的氣道慢性炎癥。支氣管哮喘小鼠模型的建立能夠對小青龍湯和肺腸同治法的藥效作用機制進行研究。因此，本研究以支氣管哮喘小鼠作為研究對象，探討小青龍湯聯合肺腸同治法對支氣管哮喘小鼠IL-4、IFN-γ水平的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2018年12月—2019年12月滿6周齡的健康BALB/c小鼠60只，采用致敏和霧化激發的方法建立支氣管哮喘小鼠模型，通過隨機數字表法分為對照組和觀察組各30只。對照組中雌鼠16只，雄鼠14只；周齡6～8周，平均周齡(7.42±0.28)周；體質量20～22 g，平均體質量(20.17±0.57) g。觀察組中雌鼠15只，雄鼠15只；平均周齡6～8周，平均周齡(7.69±0.13)周；體質量20～22 g，平均體質量(20.28±0.49) g。2組小鼠的性別、周齡和體質量資料比較，差異不具有統計學意義(P>0.05)。

1.2 診斷標準通過卵清蛋白(OVA)誘導建立支氣管哮喘小鼠模型，首先將氫氧化鋁1mg、OVA20 μg、生理鹽水0.2 ml混合ip抗原液，于第0、7和14天對所有小鼠進行致敏注射；其次將4 ml的1%OVA霧化液對5L透明玻璃容器內的所有小鼠持續激發30 min，于第21～27天持續進行7 d。

1.3 方法

1.3.1 治療方法對照組接受小青龍湯治療。方藥組成：麻黃5 g，桂枝5 g，細辛3 g，干姜5 g，甘草10 g，白芍10 g，五味子5 g，姜半夏5 g。顆粒劑，5劑，每天1劑，早晚各服用一次。觀察組接受小青龍湯聯合肺腸同治療法治療，小青龍湯治療同對照組。用宣肺通絡平喘湯加減治療。方藥組成：炙麻黃6 g，苦杏仁 9 g，炙紫蘇子10 g，蟬蛻6 g，姜半夏10 g，黃芩6 g，麻黃根10 g，枳實10 g，炒萊菔子10 g，連翹10 g，瓜蔞仁6 g，甘草5 g。顆粒劑，5劑，每天1劑，早晚各服用1次。

1.3.2 觀察指標①比較2組小鼠治療前后的細胞學水平。2組小鼠于最后一次霧化激發24 h內采用乙醚麻醉處死，抽取肺泡灌洗液離心處理后去除上清液的沉渣進行推片和染色處理，采用100×10油鏡計算細胞總數、淋巴細胞、巨噬細胞和中性粒細胞個數。②比較2組小鼠治療前后的IL-4和IFN-γ水平。取肺泡灌洗液離心處理后的上清液，采用小鼠IL-4和IFN-γ試劑盒對2組小鼠的IL-4和IFN-γ水平進行檢測。

2 結果

2.1 2組小鼠治療前后的細胞學水平比較治療前2組小鼠的細胞總數、淋巴細胞、巨噬細胞和中性粒細胞水平比較，差異均不具有統計學意義(P>0.05)；治療后觀察組小鼠的細胞總數、淋巴細胞、巨噬細胞和中性粒細胞水平均低于對照組小鼠(P<0.05)。見表1。

表1 2組小鼠治療前后的細胞學水平比較 (只，

2.2 2組小鼠治療前后的IL-4和IFN-γ水平比較治療前2組小鼠的IL-4、IFN-γ和IL-4/IFN-γ水平比較，差異均不具有統計學意義(P>0.05)；治療后觀察組小鼠的IL-4和IL-4/IFN-γ水平低于對照組小鼠(P<0.05)，觀察組小鼠的IFN-γ水平高于對照組小鼠(P<0.05)。見表2。

表2 2組小鼠治療前后的IL-4和IFN-γ水平比較 (只，

3 討論

支氣管哮喘由于多種細胞、介質等相互作用的參與機制，會使氣道結構發生氣道壁增厚等結構的異常變化，產生氣道的高反應性，產生對氣道平滑肌收縮性的刺激，導致氣道狹窄加重，出現咳嗽、氣促、胸悶等支氣管哮喘癥狀。在臨床治療中，常使用糖皮質激素吸入治療，雖然能夠起到改善臨床癥狀的治療作用，但缺乏對多細胞、介質等參與的致病機制的抑制，無法有效治愈病情[2]。所以支氣管哮喘常會表現為病情遷延、反復發作等特性，導致患者持續性氣道損傷，嚴重影響呼吸功能，影響患者的日常工作和生活。早在《黃帝內經》中就已出現對于支氣管哮喘之證的相關記載，至《傷寒雜病論》中對于支氣管哮喘的證候記載更為明確，也已具有成熟的治療組方記載，直至《諸病源候論》中已經詳細記載了對病因機制的論述。經過多年對于支氣管哮喘的研究與治療，中醫具有獨特的辨證理論基礎與多種施治組方實踐[3]。中醫治療能夠從患者自身的免疫機制進行調節，改善患者的氣道反應以及細胞、介質等水平，達到既能夠改善臨床癥狀又能夠抑制致病機制的良好治療效果。本研究中，治療前2組小鼠的細胞總數、淋巴細胞、巨噬細胞和中性粒細胞水平比較，差異均不具有統計學意義(P>0.05)；治療后觀察組小鼠的細胞總數、淋巴細胞、巨噬細胞和中性粒細胞水平均低于對照組小鼠(P<0.05)，說明小青龍湯聯合肺腸同治法能夠有效降低支氣管哮喘小鼠的細胞學水平。在中醫理論中，針對支氣管哮喘的致病機制有著詳實的理論研究，明確到“哮”與“喘”時氣息與聲音的區別等[4]。所以在進行辨證施治之時，能夠對支氣管哮喘的病聲、病態、病機等證候進行針對性的組方治療。小青龍湯組方源自于《傷寒雜病論》，組方中以麻黃和桂枝作為君藥，干姜和細辛作為臣藥，白芍和五味子作為佐藥等，具有止咳平喘、解表散寒、斂肺養津、燥濕化痰等作用。其藥效作用機制在于對氣道異常分泌進行抑制，同時刺激氣道平滑肌的擴張，減輕毛細血管通透性，達到止咳平喘的治療效果。肺腸同治法是基于對肺與腸互為表里的氣機運行機制在支氣管哮喘致病機制中的影響作用，促進腸道運行、加強腸道營養等，能夠維護腸道微生態環境的平衡，加強機體代謝功能和免疫功能的運行，達到整體運行機制的有效改善，達到肺與腸的氧化與抗氧化機制平衡，達到對支氣管哮喘的有效治療[5]。所以在對2組小鼠治療后的細胞學水平的檢測中，接受小青龍湯聯合肺腸同治法治療的觀察組小鼠的細胞學水平得到了更有效降低。本研究中，治療前2組小鼠的IL-4、IFN-γ和IL-4/IFN-γ水平比較，差異均不具有統計學意義(P>0.05)；治療后觀察組小鼠的IL-4和IL-4/IFN-γ水平低于對照組小鼠(P<0.05)，觀察組小鼠的IFN-γ水平高于對照組小鼠(P<0.05)，小青龍湯聯合肺腸同治法能夠有效降低支氣管哮喘小鼠的IL-4水平，提高IFN-γ水平。支氣管哮喘由于氣道炎癥的致病機制，活躍的炎癥細胞會對肺組織的結構和功能進行破壞，導致呼吸功能的損傷。IL-4因子由小鼠的h2亞群分泌產生，能夠引發氣道組織的過敏性反應和氣道組織的損傷，對于巨噬細胞、T細胞等免疫細胞具有較大影響[6]。IFN-γ原名為巨噬細胞活化因子，是由h1細胞分泌產生，加強巨噬細胞的活化補體等，對于免疫調節系統具有重要參與作用，有助于對細胞內病原體進行清除[7]。小青龍湯能夠針對小鼠的呼吸系統病理機制進行改善和調節，肺腸同治法能夠針對小鼠的肺腸相互作用機制進行改善和調節，聯合治療能夠將2種治療方法的不同藥效機制進行聯合發揮，達到相輔相成的雙重效果，通過對2組小鼠進行組方治療研究，在IL-4和IFN-γ水平的檢測中，2組小鼠治療后的水平表現均好于治療前[8]。IL-4水平有所降低，IFN-γ水平有所升高，說明組方治療具有良好的治療效果；而觀察組小鼠治療后的IL-4和IFN-γ水平表現更優于對照組小鼠，更低的IL-4水平能夠減少小鼠的氣道炎癥反應，緩解支氣管哮喘的臨床癥狀，更高的IFN-γ水平維持細胞學水平的平衡，抑制氣道局部的炎癥細胞浸潤，說明小青龍湯聯合肺腸同治法2種治療機制的共同作用能夠針對支氣管哮喘小鼠達到更好的治療效果。

綜上所述，小青龍湯聯合肺腸同治法能夠有效降低支氣管哮喘小鼠的細胞學和IL-4水平，提高IFN-γ水平。