醫院制劑銀黃解毒消腫膠囊急性毒性試驗

羅純清，王 興，羅黎霞，賀 燦，陳 可，謝嘉馳，易華平

(湘潭市中醫醫院，湖南 湘潭 411100)

銀黃解毒消腫方為湘潭市中醫醫院的臨床經驗方，由牡丹皮、赤芍、大黃、知母、連翹、山銀花、黃連等藥味組成，功專涼血解毒、散結消腫，多用于熱毒瘀血之急喉痹、疔癰瘡癤等的治療。我院臨床一直以協定處方“外科一號方”中藥湯劑的形式廣泛應用。因中藥湯劑需要臨時煎煮，費時費力、不易保存、不便攜帶，故擬按相關技術原則將其開發成醫院制劑-銀黃解毒消腫膠囊[1]。膠囊劑型具有劑量更準確、方便攜帶、美觀、掩蓋不良氣味等優勢。急性毒性試驗即單次給藥毒性試驗，其對初步闡明藥物的毒性作用和了解其毒性靶器官具有重要意義，并能提供一些與人類藥物過量所致急性中毒相關的信息[2]。本研究根據相關技術指導原則，觀察ICR小鼠經口灌服銀黃解毒消腫膠囊后出現的急性毒性反應和死亡情況，并預測人體用藥過量時可能出現的毒性反應，初步觀察其用藥安全性，為其安全性評價奠定基礎。

1 材料與試劑

1.1 動物

SPF級ICR小鼠40只，雌雄各半，體質量范圍：18.2～22.0 g，購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司，實驗動物生產許可證號：SCXK(湘)2011-0003。每籠5只進行飼養，飼養室溫度：21.4～23.9 ℃，濕度：42.3%～59.8%，換氣次數：15～20次/h，12 h/12 h交替照明，動物檢疫合格、適應環境飼養后進行稱重、分組和給藥。

1.2 試藥

銀黃解毒消腫膠囊(自制，取膠囊內容物，含量：5.34 g生藥量/g，批號：20131110)；羧甲基纖維素鈉(CMC-Na，天津市恒興化學試劑制造有限公司，批號：20121222)。

1.3 儀器

TP-1200C型電子天平(湘儀天平儀器設備有限公司)。

2 方法

2.1 劑量設置

由于藥物濃度的限制，本試驗采用最大濃度0.47 g干膏/mL，按累積劑量200.784 g生藥/kg，當日給藥2次。給藥前禁食12 h以上，6 h后進行第2次給藥，具體見表1。

表1 試驗劑量及分組設計

2.2 藥液的配制

稱取銀黃解毒消腫膠囊內容物14.1 g，加0.5% CMC-Na溶液適量，攪拌混勻，后定容至30 mL，即得0.47 g干膏/mL的藥液。

2.3 急性毒性最大耐受量法試驗

選擇檢疫合格的SPF級ICR小鼠40只，雌雄各半，按性別體重采用區段隨機方法分為兩組，每組20只，分別為溶媒對照組和銀黃解毒消腫膠囊組。給藥前禁食12 h以上，以40 mL/kg的劑量經口灌胃給予相應供試品。銀黃解毒消腫膠囊累積劑量為200.784 g生藥/kg，分兩次給藥，間隔6 h。給藥當天，尤其在給藥后0～4 h內密切觀察并記錄各組動物的中毒表現和特點、毒性反應出現及恢復時間以及死亡情況等。然后每天觀察2次，即上、下午各1次，連續觀察14天。分別于給藥前及給藥后第7天、第14天，使用電子天平對小鼠體質量進行稱量。所有小鼠在試驗結束后腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉處死，并予以大體解剖，肉眼觀察臟器的位置、大小、色澤、粘連等情況，并檢查臟器表面和切面的質地、積液及腫瘤等異常改變。在試驗過程中若有非計劃死亡的動物(包括瀕死動物)，均應進行大體解剖。

2.4 觀察指標

小鼠一般活動狀況；中毒癥狀及死亡情況；體質量變化；大體解剖檢查。

2.5 統計學分析

3 結果

3.1 小鼠一般活動狀況

給藥前和14天觀察期間，溶媒對照組和銀黃解毒消腫膠囊組小鼠自主活動如常，未見異常和死亡現象。

3.2 小鼠中毒癥狀及死亡情況

整個試驗期間未見小鼠異常及死亡現象。

3.3 體質量變化情況

分別于給藥前、給藥后第7天和第14天稱重，結果與溶媒對照組比較，銀黃解毒消腫膠囊組小鼠體重變化無顯著性差異，且體質量增長在正常范圍內，說明經口灌服銀黃解毒消腫膠囊對ICR小鼠體質量增長無明顯影響，具體見表2、表3、表4。

表2 銀黃解毒消腫膠囊對小鼠體質量的影響

表3 銀黃解毒消腫膠囊對雌性小鼠體質量的影響

表表4 銀黃解毒消腫膠囊對雄性小鼠體質量的影響

3.4 大體解剖檢查結果

兩組小鼠各器官表面和切面均未見明顯異常情況。

4 討論

急喉痹即現代醫學所指的急性咽炎，是指咽黏膜、黏膜下及其淋巴組織的急性炎癥，臨床上常表現為咽部的紅腫熱痛和咽部干癢等[3]。風熱痰學說已成為現代急喉痹病因學說的主流，并形成了廣泛的共識[4]。我院醫生在臨床實踐中發現急喉痹多屬實證熱證，其病因病機多為外邪侵襲，上犯咽喉或肺胃熱盛，上攻咽喉。銀黃解毒消腫膠囊處方來源于我院醫生的臨床長期實踐，并以協定處方的形式在院內使用多年，療效肯定。

本課題組在前期已對銀黃解毒消腫膠囊的抗炎鎮痛作用及其對急性咽炎模型大鼠的治療作用進行了研究，顯示其具有較好的治療作用。本試驗在肯定其療效的前提下，對該制劑的安全性進行評價。結果在本試驗條件下，ICR小鼠經口灌胃給予銀黃解毒消腫膠囊(0.47 g干膏/mL)，最大劑量40 mL/kg，每天給藥2次(累積劑量為200.784 g生藥/kg)，對其一般活動狀況和體質量增長無明顯影響，未見明顯急性毒性反應。根據《中藥、天然藥物急性毒性研究技術指導原則》[5]，計算小鼠最大耐受藥物倍數，以耐受人臨床用量的100倍以上為安全，而本試驗中小鼠最大耐受藥量相當于70 kg成人臨床擬用量的627倍，提示銀黃解毒消腫膠囊口服用藥安全性較高。