氣相色譜法測定尿塞通片中有機氯類農藥殘留量

程似錦，李 恒，喻 悅*

(1.長江職業學院 醫藥護理學院，湖北 武漢 430064；2.武漢藥品醫療器械檢驗所，湖北 武漢 430075)

尿塞通片由丹參、澤蘭、紅花、赤芍、陳皮、澤瀉、敗醬等藥味制成，具有理氣活血、通淋散結的功效，臨床用于氣滯血瘀、下焦濕熱所致的輕、中度“癃閉”，癥見排尿不暢、尿流變細、尿頻、尿急，前列腺增生見上述癥狀者[1-3]。丹參、赤芍為尿塞通片主藥之一，市面上流通的丹參、赤芍藥材商品絕大多數為人工種植品[4-6]。有機氯類農藥是廣泛應用的殺蟲劑，由于其化學性質穩定，難于分解，殘留期長，對環境污染嚴重；其通過食物進入人體，在肝、腎、心臟等組織內蓄積，在人體內累積造成慢性中毒[7-10]。有關中成藥中有機氯類農藥殘留量檢測的報道不多[11-12]，準確測定中成藥中有機氯類農藥殘留量，對安全用藥具有重要意義。根據總局要求，筆者參照文獻[13-15]，結合《中國藥典》2015版四部通則“農藥殘留量測定法”[16]，對抽檢8個廠家生產的尿塞通片進行有機氯類農藥限量檢測，現報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 7890A氣相色譜儀，梅特勒XS105DU型電子天平，HY-5回旋振蕩器，SK250LHC超聲清洗器。

1.2 試藥

尿塞通片，國家評價性抽驗的樣品，來自8個廠家98批次，見表1。有機氯農藥混合對照品溶液(中國食品藥品檢定研究院，批號：610005-201501，規格：10 μg/mL)；定位用有機氯農藥對照品溶液由農業部環境保護科研監測所提供。本次共測定16種有機氯類農藥，有機氯農藥混合對照品名稱、濃度及批號見表2。正己烷為色譜純，丙酮、二氯甲烷為分析純。水為娃哈哈純凈水。

表1 98批次樣品來源

續表1

續表1

2 方法與結果

2.1 色譜條件與系統適用性試驗

分析柱：鍵合交聯14%氰丙基苯基二甲基硅氧烷為固定液(DB-1701)的毛細管柱 J&W 122-0732(30 m×0.25 mm，0.25 μm)；驗證柱：鍵合交聯5%苯基甲基硅氧烷為固定液(DB-5)的毛細管柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)，63Ni-ECD電子捕獲檢測器。進樣口溫度：230 ℃；ECD檢測器溫度：300 ℃；柱溫：55 ℃，保持0.5 min，60 ℃/min至160 ℃，5 ℃/min至210 ℃，保持3 min，10 ℃/min至240 ℃，保持3 min，10 ℃/min至280 ℃，保持5 min；脈沖不分流進樣；進樣量：1 μL；載氣流速：1.5 mL/min，恒壓模式。理論塔板數按α-六六六計算應不低于1×106，兩個相鄰色譜峰的分離度應大于1.5[16]。

2.2 溶液制備

2.2.1 混合對照品儲備液制備 精密量取有機氯農藥混合對照品溶液1 mL，置10 mL量瓶中，用正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得(每1 mL含農藥1 μg)。

2.2.2 混合對照品溶液制備 精密量取上述對照品儲備液，用正己烷稀釋成每1 mL含0 ng、1 ng(線性1)、2 ng(線性2)、5 ng(線性3)、10 ng(線性4)、20 ng(線性5)、50 ng(線性6)、100 ng(線性7)的系列濃度溶液。

2.2.3 供試品溶液制備 取尿塞通片10片，研細，精密稱取粉末約5 g，置具塞錐形瓶中，加水30 mL，振搖10 min，精密加入丙酮50 mL，稱定重量，超聲處理30 min，放冷，再稱定重量，用丙酮補足減失的重量，再加氯化鈉約8 g，精密加入二氯甲烷25 mL，稱定重量，超聲處理15 min，放冷，再稱定重量，用二氯甲烷補足減失的重量，振搖使氯化鈉充分溶解，靜置，離心(3 000 r·min-1)3 min，使完全分層，將有機相移入裝有適量無水硫酸鈉的具塞錐形瓶中，放置30 min。

表2 有機氯類農藥混合對照品名稱、濃度及批號

精密量取15 mL，于40 ℃水浴上減壓濃縮至約1 mL，加正己烷約5 mL，減壓濃縮至近干，用正己烷溶解并轉移至5 mL量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，小心加入硫酸1mL，振搖1 min，離心(3 000 r·min-1)10 min，分取上清液，加水1 mL，振搖，取上清液，即得。

2.3 線性及范圍

分別精密吸取系列濃度混合對照品溶液(配制方法見“2.2.2 ”混合對照品溶液制備)，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，計算，即得。各待測成分線性關系良好，見表3。

表3 16種農藥線性試驗結果

2.4 精密度試驗

吸取線性5 ( 20 ng/mL)的有機氯農藥混合對照品溶液，連續進樣6次，計算對照品峰面積RSD為0.31%～1.72%，結果表明儀器精密度良好。

2.5 準確度試驗

取君碧莎樣品(批號：20150901)1批，取本品10片，研細，取粉末約5 g，精密稱定，并精密加入對照品儲備液(1 μg/mL)0.5 mL，置具塞錐形瓶中，自“加水30 mL”起，同供試品溶液制備操作，并計算隨行回收率，結果回收率在61%～112%。結果見表4。

表4 16種對照品加樣回收率試驗結果

2.6 產品檢測結果

采用本方法共測定了8個廠家98批次尿塞通片樣品，結果16種待測農藥均未檢出，有機氯農藥殘留量合格率為100%。有機氯農殘檢查典型色譜見圖1。

3 討論

我國是中藥材使用大國，野生中藥材已不能滿足市場需要，絕大多數中藥材為人工種植。中藥材在栽培種植過程中常常遭受病蟲害的侵蝕，施用農藥成為了提高產量的一項栽培措施。但是施用農藥后的殘留不僅直接降低了藥材本身的質量，而且間接影響了用藥安全性。本次試驗測定了8個廠家共98批次尿塞通片樣品，結果16種待測農藥均未檢出，有機氯農藥殘留量合格率為100%。本試驗采用的前處理方法為磺化法，此方法對復雜制劑的基質凈化效果好，色譜圖干擾較少，適合有機氯農藥殘留量的測定；且采用了對鹵代烴選擇性好、靈敏度高的電化學檢測器，所建立的檢測方法準確、可行，可用于尿塞通片中有機氯類農藥殘留量的測定。

1.六氯苯；2.α-BHC；3.PCNB；4.γ-BHC；5.七氯；6.艾氏劑；7.β-BHC；8.δ-BHC；9.氧化氯丹；10.反式環氧七氯；11.反式氯丹；12.順式氯丹；13. p,p′-DDE；14.O,P′-DDT；15. p,p′-DDD；16. p,p′-DDT