淋巴結病理組織免疫組化技術標準化操作的效果分析

陳玉英 郭慧 曹秋霞

（韶關市第一人民醫院 廣東 韶關 512000）

淋巴結的活檢是比較復雜的活檢，H E 的診斷是對形態學的分析，主要是判斷淋巴結有沒有病變，若是產生病變則需要確認是炎癥的病變還是腫瘤性的病變，淋巴結的腫瘤非常復雜，有60 多種類型，包括良性和惡性。淋巴瘤的分類，要借助免疫組織化學技術來完成。通過鑒定淋巴瘤存在的某種抗體來進行初步分類，比如分霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤[1]。隨著科技和循證醫學的發展以及人類經驗積累，每一個淋巴瘤的分類都認為是一種疾病，必須用免疫組織化學的方法來鑒定淋巴瘤的確切分類，以便臨床醫生更精準的治療疾病[2]。本文對免疫組化技術與標準化操作方法進行比較，現將結果匯報如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年1月—2018年1月我院收治的40例淋巴結患者，隨機均分為給予免疫組化技術與標準化操作方法的實驗組和僅采用免疫組化技術但不進行標準化操作方法的對照組，各20 例。對照組中男性與女性比例為11 ∶9，患者年齡21 ～78 歲，平均年齡（49.5±6.4）歲，其中10 例頸部淋巴結，6 例鎖骨下淋巴結，4 例腹膜后淋巴結；實驗組中男性與女性比例為12 ∶8，患者年齡22 ～76 歲，平均年齡（48.4±6.8）歲，其中9 例頸部淋巴結，7 例鎖骨下淋巴結，4 例腹膜后淋巴結。兩組患者在一般資料上對比差異無統計學意義，所有患者及其家屬均知情同意，通過了倫理委員會審批[3]。

1.2 方法

實驗組采用免疫組化技術標準化操作方法，對照組采用免疫組化技術但不進行標準化操作方法。

標準化淋巴結組織HE 片方法如下：取材時根據要求的標準控制組織的厚度（0.18cm 適宜）。在4%中性甲醛放置淋巴結組織并進行固定，當使用1 例較多穿刺組織的標本時，應該通過過濾紙包裹每條組織，并在確認組織處于同一平面后放置在脫水盒中。切片厚度2.5μm 較為適宜，將蠟片切成7 片，并隨機選擇其中一片進行染色，作為HE 切片放置于載玻片上[4]。

免疫組化技術的具體方式如下：采用常規脫蠟后的切片放置于水中，保持室溫條件下使用3%甲醇液作用一定時間后，將切片使用蒸餾水和清水進行清洗。在高壓鍋中放置pH6.0 的1.1L 的檸檬酸，加熱2min 后讓其自然冷卻，再取出使用PBS沖洗2 次，每次2min，添加二抗直至DAB 顯色，并比較抗體的陰陽性[5]。

1.3 觀察指標

統計記錄實驗組和對照組的染色切片的優良率，主要評價標準如下：組織結構無破壞，背景清晰、干凈，陽性物質定位準確，無特殊著色、脫色情況，此為優；組織結構幾乎無破損，背景存在雜質，陽性物質定位稍微偏移，特殊著色、脫色情況不明顯，此為良；組織結構破壞嚴重無法對陽性物質進行定位，存在特殊著色、脫色，此為差[6]。

1.4 統計學處理

采用SPSS20.00 軟件處理應用免疫組化技術與標準化操作方法在淋巴結病理組織的相關數據，P ＜0.05 表示差異顯著，具有統計學意義。

2.結果

實驗組和對照組患者的優良率見表1 所示，實驗組的優良率為95.0%，顯著高于對照組的60.0%，差異顯著（P ＜0.05）。

表1 實驗組和對照組優良率比較 [n(%)]

3.討論

免疫組化即為免疫組織化學，是應用免疫學的基礎，是根據抗原和抗體特異結合的原理從而確定細胞內多肽或蛋白質的位置，并對其進行定量以及定性的研究，從而診斷患者的病癥。因此，稱之為免疫組織化學技術，簡稱免疫組化，是病理學檢查的常用技術[7]。雖然在免疫組化技術最初發展階段由于技術的限制造成無法充分發揮其作用，但是近幾年隨著社會的發展、醫療技術的進步，免疫組化技術也取得了極大的進步，對疾病判斷具有較高的敏感性。對比發展初期，抗體的稀釋程度較低僅僅只有幾十倍，但是隨著相關技術的突破目前抗體稀釋程度大大提升，最大可達到10000 多倍，抗體敏感性提升也極為巨大。但是由于現在缺乏相應統一、確定的標準導致免疫組化技術結果差距較大，造成醫生診斷存在偏差。因此統一操作方式尤為重要，特別是利用高壓鍋加熱修復抗原，能夠排除多種方式的干擾，時間控制更加準確，染色效果更佳，遠遠優于微波加熱修復抗原的方法，通過逐步完善免疫組化技術能夠充分發揮其作用，為醫生的診斷提供更加準確的數據。

本文實驗組的優良率為95.0%，顯著高于對照組的60.0%），差異顯著（P ＜0.05）。與王雅萍[1]的結果基本一致，觀察組患者的免疫組化染色切片優良率為95.2%，對照組的免疫組化染色切片優良率為56.1%，兩組患者之間對比差異顯著，差異具有統計學意義（P ＜0.05）。根據本文結果表明通過標準化操作方法能夠有效提高免疫組化技術的檢測結果，充分發揮免疫組化技術的優勢，有利于臨床醫生進一步掌握患者的病情，

綜上所述，應用免疫組化技術標準化操作方法能明顯提高切片的優良率，便于臨床準確診斷患者的病情，值得在淋巴結病理組織的切片檢測中應用。