復方香芍口服液治療動物實驗性胃潰瘍的藥效和安全性研究

韓憲忠 沈正澤（通訊作者） 王柏桉 景良紅 丁家昱

（1 重慶市人民醫院＜中國科學院大學重慶醫院＞藥學部 重慶 400014）

（2 重慶醫科大學附屬永川醫院藥學部 重慶 402160）

（3 重慶涪陵中心醫院藥劑科 重慶 401331）

胃潰瘍是指發生在胃角、胃竇、賁門和裂孔疝等部位的一種常見的消化性潰瘍。以上腹部疼痛為主要癥狀，也可出現在左上腹部或胸骨、劍突后疼痛，嚴重者可出現胃出血、穿孔等并發癥。中醫藥改善患者整體狀態、促進胃潰瘍愈合，以健脾益胃、理氣止痛為根本。目前市場上治療腹痛的中成藥較多，但同時具有健脾益胃、止痛、理氣的藥物不多，如現有的中藥制劑元胡止痛片止痛效果雖好，但理氣活血止痛之功似嫌不足。復方香芍口服液處方由木香、白芍、厚樸、吳茱萸、甘草組成。本文對復方香芍口服液進行了初步的藥效學、安全性的研究[1-3]，結果表明本制劑具有良好地促進動物實驗胃潰瘍的作用，且長期動物實驗主要臟器未出現明顯病理改變。

1.實驗方法與材料

1.1 復方香芍口服液的制備

白芍、甘草切成片，與吳茱萸加12 倍量水煎煮1.5 小時，濾過，藥渣加10 倍量水煎煮1 小時，濾過，合并濾液，備用；厚樸粉碎成粗粉，木香切成片，加10 倍量水蒸餾6 小時，收集揮發油，蒸餾后的水煎液濾過，濾液與以上提取液混合，濾過，濾液減壓濃縮，濃縮液，備用。濃縮液加入吐溫-80 攪拌均勻，加入已溶解羥苯甲酸乙酯的乙醇溶液混合均勻，然后加入亞硫酸氫鈉充分攪拌均勻溶解后，再加入已溶解揮發油的乙醇溶液，加純化水到1000ml，調pH 值至6 ～7，分裝，即得。

1.2 實驗動物

雄性Sprague-Dawley 大鼠，180 ～220 克，購自重慶醫科大學實驗動物中心。動物成對飼養在透明的飼養籠里（47 厘米×32 厘米×21 厘米），籠底鋪有玉米芯制成的墊料，動物可自由飲水和進食。飼養室每天上午8 點開始燈光照明，晚上8 點自動熄燈，保持12 小時晝夜更替。每天實驗從早上9 點開始進行。

1.3 實驗試劑

冰醋酸，分析純，臨用前配成10%使用。法莫替丁來源與本院藥房。復方香芍口服液（批號：181223），由重慶市人民醫院制劑室提供。按“2.1 復方香芍口服液的制備及質量標準研究”方法制備的制劑為臨床劑量組、低劑量組為臨床劑量組1/2 的劑量，用生理鹽水稀釋。

1.4 復方香芍口服液對大鼠實驗性胃潰瘍的治療作用

五十只大鼠隨機分為5 組，即空白對照組、生理鹽水陰性組、復方香芍口服液低劑量組、復方香芍口服液臨床用量組、法莫替丁組，每組10 只。動物術前24 小時起禁食不禁水，手術當天用異氟烷麻醉動物，無菌條件下在劍突下腹中線剖開腹腔，暴露胃，在胃前壁近幽門外用微量注射器由漿膜面注入胃黏膜下層處注入30 微升20%的醋酸（空白對照組注射雙蒸水），分層縫合傷口。術后第2 天開始給藥，空白對照組和生理鹽水陰性組灌胃生理鹽水（3ml/kg），復方香芍口服液低劑量組、復方香芍口服液臨床用量組分別灌胃復方香芍口服液1/2 劑量和原液，法莫替丁組灌胃1mg/kg。術后14 天麻醉處死動物，取胃，用游標卡尺測量出潰瘍的最長徑和最寬徑，相乘算出潰瘍面積，并取潰瘍或相應位置胃黏膜切片送病理檢查。

1.5 復方香芍口服液重復給藥的毒性作用

30 只大鼠隨機分為生理鹽水組、臨床劑量組、高劑量組，動物按“2.2 實驗動物”所描述方式飼養，每天灌胃1 次，灌胃量為3mL/kg，生理鹽水組灌胃生理鹽水，臨床劑量組灌臨床用制劑原濃度，高劑量組灌胃臨床用制劑生藥量5 倍高濃度制劑，連續灌胃30d。末次灌胃24h 后，二氧化碳處死動物，取動物大腦、小腦、胃、心、肝、肺器官組織，送病理檢查。

1.6 統計學分析

所有統計分析采用SPSS22 統計分析完成。計量資料以均數±標準差表示，各組之間的差異采用完全隨機方差分析，各組之差的差異采用Bonferroni 事后檢驗進行分析，P ＜0.05 作用有統計學差異的標準。

2.結果

2.1 復方香芍口服液的制備及質量控制

根據提取、制劑工藝研究制定的制備工藝，制得復方香芍口服液（批號：181223）1 批。其質控指標芍藥苷含量為7.31mg/L。

2.2 復方香芍口服液對大鼠實驗性胃潰瘍的治療作用

完全隨機方差分析表明各組間具有顯著差異（F（4，45）=37.138，P ＜0.001，n=10），Bonferroni 事后檢驗表明生理鹽水組的胃潰瘍面積較空白組顯著增加（P ＜0.001），復方香芍口服液臨床用量組和法莫替丁組能顯著縮小胃潰瘍面積（P ＜0.001），幾乎接近空白組動物（見表1）。病理圖片顯示，醋酸可以致典型胃潰瘍結構，表現為黏膜表面見炎性滲出及壞死碎屑，其下見纖維素樣壞死及肉芽組織形成，纖維化取代肌層達漿膜層，胃壁全層見大量急慢性炎細胞浸潤（圖1B）。復方香芍口服液低劑量組動物表現類似的病理結構（圖1C），而復方香芍口服液臨床用量組動物及法莫替丁組動物胃黏膜結構基本正常，黏膜層、肌層及漿膜層排列正常，未見明顯糜爛及潰瘍（圖1D 和E）。本實驗結果顯示，高劑量復方香芍口服液組對潰瘍的修復作用明顯，低劑量組對潰瘍無修復作用。

表1 復方香芍口服液顯著減少胃潰瘍面積

2.3 復方香芍口服液重復給藥的毒性作用

動物在反復給藥過程中無死亡。病理切片顯示，生理鹽水組及臨床劑量組動物大腦、小腦、胃、心、肝、肺器官組織均未見異常結構；高劑量組動物有1 只動物肝臟有水腫變性表現，其余動物及臟器未見異常病理結構。表明復方香芍口服液臨床使用劑量長期使用安全，5 倍生藥量的高劑量長期的反復給藥有可能導致肝臟水腫變性（圖2）。

3.討論

本文研究初步發現，復方香芍口服液對于動物實驗性胃潰瘍具有明顯的治療作用，臨床使用劑量長期使用安全，超大劑量長期使用有可能會導致肝臟水腫變性。

我們擬研制的復方香芍口服液經臨床驗證表明，該研究組方合理，肝胃并治，氣血同調。對胃痛、腹痛、脅痛都有較好的止痛作用，并能消除脹滿、增進食欲，且無明顯副作用。本制劑處方組成為木香、白芍、厚樸、吳茱萸、甘草。木香始載于《神農本草經》，列為上品，為菊科植物木香的干燥根。具有行氣止痛、溫中和胃、利尿通淋等功效。其主要有效成分為揮發油、木香內酯、生物堿等，臨床主要用于胃腸氣脹、消化性潰瘍，臨床上常與吳茱萸合用，治療消化道潰瘍及胃腸脹氣 。白芍始載于《神農本草經》，列為中品，為毛茛科植物芍藥的根。具有解痙、肌松、抗菌、保護消化道潰瘍等作用[4]，其主要有效成分為芍藥苷，用于頭痛眩暈，脅痛，腹痛，四肢攣痛，血虛萎黃，月經不調，自汗，盜汗等，臨床上常與甘草合用，用于治療面肌抽搐、偏頭痛、止痛、解痙、消化性潰瘍等[5]。如白芍甘草湯，加味芍藥甘草湯。甘草始載于《神農本草經》，列為上品，為豆科植物甘草的干燥根或根莖。具有清熱解毒，潤肺止咳，補脾益氣，緩急止痛，調和諸藥之功效。其主要有效成分為甘草酸，甘草次酸，甘草甜素等，用于脾胃虛弱，倦怠乏力，脘腹、四肢攣急疼痛等。臨床常與白芍合用，用于消化道潰瘍和胃腸道解痙等，如白芍甘草合劑。厚樸始載于《神農本草經》，列為中品，為本蘭科植物厚樸或凹葉厚樸的干燥皮。具有燥熱散滿、消食散痞，脘腹止痛之功效。其主要有效成分為揮發油、生物堿、厚樸酚、和厚樸酚等。用于濕滯傷中，脘痞吐瀉，食積氣滯，腹脹便秘，痰飲喘咳。臨床常與木香、半夏合用，用于胃腹脹氣，行氣散結等。如半夏厚樸湯、厚樸排氣口服液。吳茱萸始載于《神農本草經》，列為中品，為靶香科植物吳茱萸的未成熟果實。具有散寒止痛，疏肝理氣，溫脾利濕之功效。其主要有效成分為生物堿類，毒性成分為揮發油，用于厥陰頭痛，寒疝腹痛，塞濕腳氣，行經腹痛，脘腹脹痛等。常與木香合用，用于治療消化道潰瘍及胃腸脹氣，如香連丸。

目前，探索一種治療胃痛、腹痛、脅痛的新型復方中藥制劑已日趨成為醫療市場發展的需要。本文研究表明，復方香芍口服液的組方合理，質量穩定，能明顯促進胃潰瘍的愈合，臨床劑量使用安全，超大劑量長期反復使用有可能導致肝臟水腫樣變性，其機制需進一步研究。