防城港地區(qū)臍血血細(xì)胞參數(shù)參考范圍的建立及其在珠蛋白生成障礙性貧血早期篩查中的應(yīng)用*

唐金華，何嘉凝，李培顏，嚴(yán)芝光

廣西壯族自治區(qū)防城港市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西防城港 538001

珠蛋白生成障礙性貧血是我國(guó)南方地區(qū)常見的遺傳性血液疾病[1-2]。早期篩查對(duì)于珠蛋白生成障礙性貧血患者的治療和預(yù)后有重要的作用，但目前確診該病的費(fèi)用高，耗時(shí)長(zhǎng)[3]。血液學(xué)的改變是珠蛋白生成障礙性貧血患者的臨床特征之一，血細(xì)胞參數(shù)分析為珠蛋白生成障礙性貧血的早期診斷提供了一個(gè)簡(jiǎn)便、快捷、經(jīng)濟(jì)的篩查方法[3-5]。臍血血細(xì)胞分析是新生兒常規(guī)檢查項(xiàng)目，對(duì)于新生兒的疾病診斷有重要的參考價(jià)值，可用于珠蛋白生成障礙性貧血患兒的早期篩查[6]。但目前臍血血細(xì)胞參數(shù)的參考范圍的相關(guān)研究較少，臍血血細(xì)胞分析結(jié)果的合理性值得探討。本研究旨在建立防城港地區(qū)臍血血細(xì)胞參數(shù)參考范圍，同時(shí)探討其在珠蛋白生成障礙性貧血新生兒中的最佳臨界值，為珠蛋白生成障礙性貧血新生兒的早期篩查提供一個(gè)簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)的方法。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院2017-2019年3 030例新生兒為研究對(duì)象，其中男1 625例、女1 405例。所有研究對(duì)象均獲得監(jiān)護(hù)人的知情同意且已簽署知情同意書。所選的新生兒均無心、肺、肝、腎、腦、耳、鼻、喉、眼等疾??；無惡性腫瘤及感染性疾病。

1.2儀器與試劑 BC-6800全自動(dòng)五分類血液細(xì)胞分析儀及配套M-68LD血細(xì)胞分析用溶血?jiǎng)┵?gòu)自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司；HYDRASYS LC全自動(dòng)電泳分析儀及配套血紅蛋白測(cè)定試劑盒購(gòu)自法國(guó)Sebia公司。

1.3方法 新生兒臍血血細(xì)胞參數(shù)檢測(cè)，采集2管1.8 mL新生兒臍血，迅速置于含有乙二胺四乙酸的抗凝試管中，充分混合均勻，使標(biāo)本無凝塊及微小凝集，同時(shí)避免用力過猛導(dǎo)致溶血及氣泡產(chǎn)生。其中1管用全自動(dòng)電泳分析儀進(jìn)行血紅蛋白電泳分析，血紅蛋白(Hb)Bart′s陽性可視為珠蛋白生成障礙性貧血新生兒，設(shè)置為試驗(yàn)組，Hb Bart′s陰性視為健康新生兒，設(shè)置為對(duì)照組；另1管用全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀檢測(cè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、Hb、紅細(xì)胞比容(HCT)、平均紅細(xì)胞容積(MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量(MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)、血小板計(jì)數(shù)(PLT)。

2 結(jié) 果

2.1珠蛋白生成障礙性貧血新生兒的篩選 對(duì)本院2017-2019年3 030例新生兒進(jìn)行血紅蛋白電泳分析，篩選出308例Hb Bart′s陽性新生兒，視為珠蛋白生成障礙性貧血陽性，設(shè)置為試驗(yàn)組，其中男164例、女144例；其余2 722例健康新生兒作為對(duì)照組，其中男1 461例、女1 261例。

2.2健康新生兒臍血血細(xì)胞參數(shù)的參考范圍 與行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(WS/T 405-2012)[7]比較，男、女新生兒的RBC、Hb、HCT、MCH、MCHC的參考范圍無明顯改變，WBC、MCV、PLT的參考范圍的上限和下限有所上升。見表1。

表1 健康新生兒臍血血細(xì)胞參數(shù)的參考范圍

2.3健康和珠蛋白生成障礙性貧血新生兒臍血血細(xì)胞參數(shù)的參考范圍比較 與健康新生兒比較，珠蛋白生成障礙性貧血的男、女新生兒的MCV、MCH、MCHC的參考范圍均下降(P<0.05)，RBC、PLT的參考范圍上升(P<0.05)，WBC、Hb、HCT的參考范圍則無明顯改變(P>0.05)。珠蛋白生成障礙性貧血新生兒MCV、MCH的參考范圍均低于健康新生兒參考范圍的下限。男新生兒的各項(xiàng)參數(shù)的參考范圍與女新生兒比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

2.4珠蛋白生成障礙性貧血新生兒臍血血細(xì)胞參數(shù)的診斷效能評(píng)價(jià) 珠蛋白生成障礙性貧血新生兒各項(xiàng)參數(shù)的最佳臨界值分別為：男MCH<32.05 pg，MCV<100.15 fL，MCHC<321.50 g/L，RBC>4.73×1012/L，PLT>322.50×109/L；女MCV<100.15 fL，MCH<32.85 pg，RBC>4.61×1012/L，MCHC<322.50 g/L，PLT>320.50×109/L。珠蛋白生成障礙性貧血男新生兒的各項(xiàng)參數(shù)的約登指數(shù)MCH(88.18%)>MCV(87.82%)>MCHC(46.89%)>RBC(45.99%)>PLT(19.65%)，珠蛋白生成障礙性貧血女新生兒的各項(xiàng)參數(shù)的約登指數(shù)MCV(94.57%)> MCH(91.65%)>RBC(48.73%)>MCHC(35.72%)>PLT(24.31%)。MCH和MCV的最佳臨界值對(duì)診斷新生兒珠蛋白生成障礙性貧血的準(zhǔn)確性最高，RBC和MCHC的最佳臨界值也有一定的參考價(jià)值，PLT的最佳臨界值準(zhǔn)確性最低。

表2 健康和珠蛋白生成障礙性貧血新生兒臍血血細(xì)胞參數(shù)的參考范圍比較

表3 珠蛋白生成障礙性貧血新生兒臍血血細(xì)胞參數(shù)診斷效能評(píng)價(jià)

2.5MCV、MCH聯(lián)合診斷效能 將男新生兒以MCH<32.05 pg，MCV<100.15 fL作為新生兒珠蛋白生成障礙性貧血診斷的陽性標(biāo)準(zhǔn)，其并聯(lián)和串聯(lián)診斷的約登指數(shù)分別為88.01%，87.98%，兩種診斷方法的準(zhǔn)確性差別不大；女新生兒以MCV<100.15 fL，MCH<32.85 pg作為新生兒珠蛋白生成障礙性貧血診斷的陽性標(biāo)準(zhǔn)，其并聯(lián)和串聯(lián)診斷的約登指數(shù)分別為94.61%，91.61%，并聯(lián)診斷的準(zhǔn)確性略高于串聯(lián)診斷。

表4 MCV、MCH聯(lián)合診斷效能(%)

3 討 論

由于地域、環(huán)境、年齡、性別、遺傳等因素的影響，WS/T 405-2012制訂的血細(xì)胞分析的參考范圍可能并不完全適用于每個(gè)地區(qū)，各個(gè)地區(qū)的臍血血細(xì)胞參數(shù)的參考范圍往往也會(huì)有不同程度的差異[7]。高原等[8]發(fā)現(xiàn)，上海、長(zhǎng)沙、昆明兒童的臍血血細(xì)胞參數(shù)Hb、MCV、HCT、PLT的參考范圍均呈現(xiàn)不同程度的差異。根據(jù)各個(gè)地區(qū)情況的不同制訂適合當(dāng)?shù)氐膶?shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，將更加有助于對(duì)當(dāng)?shù)厝巳旱慕】登闆r進(jìn)行評(píng)估。本研究顯示，防城港地區(qū)新生兒WBC、MCV、PLT的參考范圍與WS/T405-2012成人參考范圍比較，上限與下限均上升，套用成人的參考范圍是不合適的。研究發(fā)現(xiàn)，新生兒WBC水平的升高，可能與產(chǎn)婦分娩時(shí)的壓力及環(huán)境改變等刺激，致使外周血中性粒細(xì)胞增多有關(guān)[9]。MCV和PLT的參考范圍在新生兒中同樣偏高，并隨著年齡的增加而逐漸趨向于成年人[10-11]。本研究表明，建立符合當(dāng)?shù)氐哪氀?xì)胞參數(shù)參考范圍，更適用于當(dāng)?shù)厝巳旱哪氀?xì)胞分析，更加有助于臨床診斷。

MCV、MCH、MCHC的檢測(cè)對(duì)于珠蛋白生成障礙性貧血的早期篩查有重要的作用[12]。在臨床診斷中，β-珠蛋白生成障礙性貧血往往以外周血MCV<80 fL，MCH<28 pg，MCHC<320 g/L為診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]。但是若沿用這種經(jīng)驗(yàn)性的診斷界值，并沒有考慮到當(dāng)?shù)氐哪氀?xì)胞參數(shù)參考的實(shí)際范圍，診斷的準(zhǔn)確性尚未明確。李冬等[13]應(yīng)用MCV、MCH兩項(xiàng)指標(biāo)在篩查云南省騰沖市常見珠蛋白生成障礙性貧血的研究中發(fā)現(xiàn)，MCV、MCH用于α-珠蛋白生成障礙性貧血的最佳臨界值分別為88.5 fL、27.95 pg。因此，本研究采集防城港地區(qū)健康新生兒和珠蛋白生成障礙性貧血新生兒的臍血血細(xì)胞參數(shù)并統(tǒng)計(jì)參考范圍，優(yōu)點(diǎn)在于更加符合當(dāng)?shù)氐膶?shí)際情況，提高珠蛋白生成障礙性貧血診斷的準(zhǔn)確性。本研究結(jié)果顯示男新生兒MCH<32.05 pg，MCV<100.15 fL時(shí)，約登指數(shù)分別為88.18%，87.82%；女新生兒MCV<100.15 fL，MCH<32.85 pg時(shí)，約登指數(shù)分別為94.57%，91.65%。男新生兒MCH、MCV并聯(lián)和串聯(lián)診斷的約登指數(shù)分別為88.01%，87.98%；女新生兒MCH、MCV并聯(lián)和串聯(lián)診斷的約登指數(shù)分別為94.61%，91.61%。說明該參考范圍對(duì)于絕大多數(shù)進(jìn)行臍血血細(xì)胞分析的新生兒，能正確診斷出其是否是珠蛋白生成障礙性貧血的患者或潛在無癥狀患者。此外，MCHC和RBC也具有一定的診斷價(jià)值，其約登指數(shù)接近50.00%。值得注意的是，MCV、MCH、MCHC、RBC參考范圍的改變，在缺鐵性貧血及珠蛋白生成障礙性貧血中有很高的相似度，對(duì)二者的鑒別需要進(jìn)一步檢測(cè)，如紅細(xì)胞形態(tài)和骨髓涂片檢查[14]。因此，在實(shí)際臨床工作中，對(duì)于臍血血細(xì)胞參數(shù)的參考范圍符合珠蛋白生成障礙性貧血的患者，才有進(jìn)一步檢測(cè)的必要，這樣做不僅減輕了患者的負(fù)擔(dān)，也大大避免了醫(yī)療資源的浪費(fèi)。

綜上所述，本研究建立了防城港地區(qū)臍血血細(xì)胞參數(shù)的參考范圍和珠蛋白生成障礙性貧血臍血血細(xì)胞參數(shù)的最佳臨界值。男新生兒MCH<32.05 pg，MCV<100.15 fL；女新生兒MCV<100.15 fL，MCH<32.85 pg作為診斷防城港地區(qū)新生兒珠蛋白生成障礙性貧血的標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)確性高。本研究為本地區(qū)新生兒臍血血細(xì)胞檢測(cè)分析提供了理論依據(jù)，同時(shí)為臨床提供了一個(gè)準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)、便捷、快速的珠蛋白生成障礙性貧血早期篩查的方法，值得臨床推廣。