軟顆粒飼料對(duì)擬穴青蟹成活、生長(zhǎng)和肌肉氨基酸組分的影響

黃偉卿 ，林小金，鐘傳明，陳云月，張藝，王永貴，臧蔓，施蕾，周振平

（1.寧德市鼎誠水產(chǎn)有限公司，福建 寧德 352100；2.寧德師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，福建 寧德 352100；3.福建省閩東水產(chǎn)研究所，福建寧德 352100；4.福建省水產(chǎn)技術(shù)推廣總站，福建 福州 350000；5.寧德市水產(chǎn)技術(shù)推廣站，福建 寧德 352100）

青蟹肉味鮮美，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,適應(yīng)性強(qiáng)、個(gè)體大、生長(zhǎng)速度快，已成為許多國(guó)家人工養(yǎng)殖的主要海洋蟹類[1]。隨著人工繁育、苗種培育和養(yǎng)成技術(shù)[2-4]及養(yǎng)殖設(shè)施設(shè)備的不斷改進(jìn)優(yōu)化[5-7]，青蟹養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大，產(chǎn)量不斷提高。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2018 年全國(guó)青蟹面積23 129 hm2，產(chǎn)量達(dá)15.8 萬t，福建省青蟹養(yǎng)殖面積4 159 hm2、位居全國(guó)第三，產(chǎn)量36 320 t、位居全國(guó)第二。隨著青蟹產(chǎn)業(yè)蓬勃的發(fā)展，艾春香等[8-11]、莫兆莉等[12]、蘇以鵬[13]和董蘭芳等[14]已研出幼蟹、成蟹、親蟹系列配合飼料，為青蟹人工配合飼料的研發(fā)提供了理論基礎(chǔ)。

軟顆粒飼料采用冰鮮雜魚與具有特定營(yíng)養(yǎng)成分或功能的粉料制成，綜合了鮮雜魚等生物餌料和膨化飼料等硬飼料的長(zhǎng)處，適口性好,易于吞食消化，還可根據(jù)營(yíng)養(yǎng)需求進(jìn)行調(diào)整，提高飼料效率，減少殘餌對(duì)海區(qū)水質(zhì)的污染和各種疾病的發(fā)生，目前已在魚類[15-17]中廣泛應(yīng)用。何爾榮等[18]在三疣梭子蟹Portunus trituberculatus 中也開展了相關(guān)研究，認(rèn)為軟顆粒飼料有助于提高養(yǎng)殖成活率和生長(zhǎng)速度，降低成本；黃偉卿等[19]在培育鋸緣青蟹Scylla serrata“紅膏蟹”時(shí)開展過探索，發(fā)現(xiàn)能有效提高成活率和生長(zhǎng)速度（P＜0.05），可顯著加快了育成膏蟹所需時(shí)間（P＜0.05），且投喂后肌肉中蛋白質(zhì)含量提高高，氨基酸種類齊全而均衡。

擬穴青蟹Scylla paramamosain 是我國(guó)青蟹屬中最為常見、產(chǎn)量最高的種。本研究在寧德市鼎誠水產(chǎn)有限公司養(yǎng)殖基地室內(nèi)循環(huán)水工廠擬穴青蟹育肥養(yǎng)殖中應(yīng)用軟顆粒飼料，通過分析擬穴青蟹育養(yǎng)殖過程中的成活率、生長(zhǎng)速度和肌肉營(yíng)養(yǎng)成分，以期為開展陸基集約化養(yǎng)殖擬穴青蟹技術(shù)提供參考。

1 材料與方法

1.1 軟顆粒飼料配方及制備

軟顆粒飼料原料由37%鳀、37%魚粉、10%水、7%復(fù)合多維、5%脫殼素和4%石花粉及余下的鹽、鈣、磷等組成。配置時(shí)，先將鳀攪成魚糜后按比例加入其他原材料，攪拌均勻后，擠壓成軟顆粒飼料，再經(jīng)100℃水蒸汽蒸煮15 min，放置-20 ℃冰箱中冷凍保存、備用。制成后的軟顆粒飼料的營(yíng)養(yǎng)成分由福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)研究所檢測(cè)，成分詳見表1。

表1 實(shí)驗(yàn)用軟顆粒飼料的營(yíng)養(yǎng)成分（濕物質(zhì)基礎(chǔ)）Tab.1 Approximate nutritional composition of soft pelleted diet used in the experiment（wet material basis）

1.2 擬穴青蟹來源及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

從三都灣海域采購，挑選體表完整、活力強(qiáng)的海捕野生擬穴青蟹180 只。試驗(yàn)組與對(duì)照組各90只，試驗(yàn)組平均體質(zhì)量（34.9±15.50）g、殼長(zhǎng)（5.32±0.94）cm，對(duì)照組平均體質(zhì)量（38.65±16.31）g、殼長(zhǎng)（6.01±1.24）cm。

試驗(yàn)在寧德市鼎誠水產(chǎn)有限公司養(yǎng)殖基地青蟹循環(huán)水養(yǎng)殖車間進(jìn)行；采用“蟹公寓”進(jìn)行一蟹一盒養(yǎng)殖，每組設(shè)3 個(gè)平行，每組30 只。試驗(yàn)組投喂軟顆粒飼料，對(duì)照組投喂縊蟶縊蟶Sinonovacula constricta，日投喂量為青蟹體質(zhì)量的2%～5%，具體投喂量視青蟹攝食調(diào)整。

1.3 養(yǎng)殖管理

水溫控制在24～28 ℃之間，日變化量不超過2℃，氨氮控制在0.2 mg/L 以下，溶解氧在4 mg/L 以上，鹽度在18～23 之間，日變化量不超過5，pH 維持在7.9～8.2 范圍內(nèi)。

每天清除殘餌、糞便和死亡擬穴青蟹，日換水量為總水體的10%左右。

1.4 數(shù)據(jù)采集和分析

養(yǎng)殖70 d 后，統(tǒng)計(jì)每組擬穴青蟹成活數(shù)量，將蟹體表的水分擦干，用電子天平（上海上天精密儀器有限公司生產(chǎn)，型號(hào)YP6102，精確度0.1 g）逐一稱重，用直尺（精確度0.1 cm）測(cè)量甲殼長(zhǎng)。

數(shù)量性狀測(cè)量結(jié)束后，每組解剖擬穴青蟹肌肉200 g，委托福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)研究所采用國(guó)標(biāo)GB/T 5009.5-2010、GB/T 5009.6-2003、GB/T 5009.3-2010、GB/T 5009.4-2003 和GB/T 5009.124-2003，檢測(cè)粗蛋白、脂肪、水分、灰分和氨基酸含量。

各數(shù)量性狀的計(jì)算公式如下：

SR=N/n×100%。

式中，SR 為成活率，%；N 為試驗(yàn)終擬穴青蟹存活數(shù)；n 為試驗(yàn)初擬穴青蟹數(shù)量。

SGR=[（LnWf-LnWi）/t]×100%。

式中：SGR 為特定增長(zhǎng)率，%/d；Wf為試驗(yàn)終擬穴青蟹的體質(zhì)量（g）和甲殼長(zhǎng)（cm）；Wi為試驗(yàn)初擬穴青蟹的體質(zhì)量（g）和甲殼長(zhǎng)（cm）；t 為試驗(yàn)天數(shù)（d）。

根據(jù)氨基酸的分類，統(tǒng)計(jì)相關(guān)氨基酸組份的含量。

根據(jù)聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織/ 世界衛(wèi)生組織（FAO/WHO）建議的氨基酸評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)模式[20]和中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生研究所提出的全雞蛋蛋白質(zhì)的氨基酸模式[21]：以氨基酸評(píng)分（AAS）、化學(xué)評(píng)分（CS）和必需氨基酸指數(shù)（EAAI）來評(píng)定擬穴青蟹肌肉蛋白質(zhì)的氨基酸營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，其計(jì)算公式如下：

式（3）中：n 為比較必需氨基酸數(shù)；t 為待測(cè)樣品蛋白質(zhì)必需氨基酸的含量；s 為全雞蛋蛋白質(zhì)的必需氨基酸含量；Lys 為賴氨酸，Val 為纈氨酸。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用（平均值±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，采用SPSS 17.0 軟件處理，用獨(dú)立樣本T 檢驗(yàn)對(duì)結(jié)果進(jìn)行顯著性水平檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 軟顆粒飼料對(duì)擬穴青蟹成活率和生長(zhǎng)的影響

投喂軟顆粒飼料的試驗(yàn)組中，擬穴青蟹成活率為（82.4±6.72）%，極顯著高于對(duì)照組（73.9±2.57）%（P＜0.01）；甲殼長(zhǎng)和體質(zhì)量的特定增長(zhǎng)率顯著大于對(duì)照組（P＜0.05）；脫殼間隔時(shí)間為（28.5±6.36）d，顯著低于對(duì)照組（33.0±7.07）d（P＜0.05）（表2）。

2.2 軟顆粒飼料對(duì)擬穴青蟹肌肉氨基酸組分的影響

擬穴青蟹攝食軟顆粒飼料時(shí)，肌肉中氨基酸總量（13.06±5.23）%，極顯著高于對(duì)照組（9.95±3.45）%（P＜0.01）；必需氨基酸（4.33±1.64）%和呈味氨基酸（5.35±2.02）%的含量顯著高于對(duì)照組（3.36±1.06）%和（3.99±1.25）%（P＜0.05）（表3）。

2.3 軟顆粒飼料對(duì)擬穴青蟹肌肉營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)的影響

投喂軟顆粒飼料的擬穴青蟹肌肉中蛋白質(zhì)和脂肪顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），而水分和灰分則低于對(duì)照組（表4）。

擬穴青蟹肌肉必需氨基酸含量，以及AAS、CS和EAAI 指數(shù)見表4。根據(jù)AAS 評(píng)價(jià)模式，投喂軟顆粒飼料與對(duì)照組的擬穴青蟹肌肉的必需氨基酸中，不存在限制性氨基酸；根據(jù)CS 評(píng)價(jià)模式，投喂軟顆粒飼料與投喂對(duì)照餌料的擬穴青蟹肌肉的必需氨基酸中，亮氨酸、甲硫氨酸＋半胱氨酸、纈氨酸和苯丙氨酸＋酪氨酸為限制性氨基酸。對(duì)比發(fā)現(xiàn)，投喂軟顆粒飼料的擬穴青蟹肌肉必需氨基酸指數(shù)（EAAI）為70.44，小于對(duì)照組（表5）。

表2 軟顆粒飼料對(duì)擬穴青蟹養(yǎng)殖成活率和特定增長(zhǎng)率的影響Tab.2 Effect of soft pellet feed on survival rate and specific growth rate of crab culture

表3 軟顆粒飼料對(duì)擬穴青蟹肌肉氨基酸含量的影響Tab.3 Effect of soft pelleted diet on amino acid content in muscle of mud crab

3 討論

3.1 用軟顆粒飼料養(yǎng)殖擬穴青蟹采的可行性

為了解決擬穴青蟹脫殼中互相殘殺導(dǎo)致低成活率等問題，目前擬穴青蟹養(yǎng)殖正逐步形成“一蟹一盒”的陸基工廠化立體養(yǎng)殖模式[7]。該養(yǎng)殖模式的興起，除了考慮養(yǎng)殖盒的設(shè)計(jì)參數(shù)，還應(yīng)解決養(yǎng)殖中投喂鮮雜魚、縊蟶等魚貝類帶來殘餌清除不便利，污染養(yǎng)殖水體及影響擬穴青蟹攝食效果等問題。王興春等[15]、林建斌[22]和林旋[23]的研究結(jié)果證實(shí)，投喂軟顆粒飼料的殘餌較鮮雜魚少，排放的總氮、總磷和化學(xué)需氧量（COD）等對(duì)環(huán)境污染物也顯著小于投喂鮮雜魚，起到了保護(hù)水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境的作用。黃明堅(jiān)[16]、全漢鋒等[24]和林建斌等[25]用軟顆粒飼料養(yǎng)殖軍曹魚Rachycentron canadum、大黃魚Pseudosciaena crocea 和點(diǎn)帶石斑魚Epinephelus coioides，提高了魚類的生長(zhǎng)和成活率。也有研究證實(shí)，軟顆粒飼料在應(yīng)對(duì)病蟲害的感染時(shí)，能取到緩解的作用[26]。用軟顆粒飼料培育三疣梭子蟹[18]和鋸緣青蟹“紅膏蟹”[19]，驗(yàn)證了軟顆粒飼料同樣適用于甲殼類養(yǎng)殖中，具有促進(jìn)生長(zhǎng)和提高成活率和經(jīng)濟(jì)效益的作用。本研究中，用軟顆粒飼料在室內(nèi)循環(huán)水中育肥擬穴青蟹，成活率和生長(zhǎng)速度均高于投喂生物餌料；肌肉營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)也比對(duì)照組佳。該結(jié)果為工廠化擬穴青蟹養(yǎng)殖投喂軟顆粒飼料的可行性提供了實(shí)踐依據(jù)。

表4 軟顆粒飼料對(duì)擬穴青蟹肌肉基礎(chǔ)成分的影響Tab.4 Effect of soft pelleted diet on proximate components in muscle of mud crab

表5 軟顆粒飼料對(duì)擬穴青蟹肌肉AAS、CS 和EAAI 評(píng)價(jià)的影響Tab.5 Evaluation of AAS,CS and EAAI in muscle of mud crab fed soft pelleted diet

3.2 軟顆粒飼料對(duì)擬穴青蟹存活和生長(zhǎng)的影響分析

擬穴青蟹養(yǎng)殖過程中，餌料不新鮮或用量不當(dāng)，容易造成水質(zhì)惡化，為相應(yīng)的病原菌的滋生提供環(huán)境，引起包括弧菌病、絲狀細(xì)菌病、甲殼潰瘍病和霉菌病等細(xì)菌和霉菌性疾病的發(fā)生，造成擬穴青蟹的大面積死亡[27,28]。本試驗(yàn)投喂軟顆粒飼料的擬穴青蟹的成活率為（82.4±6.72）%，極顯著高于對(duì)照組的（73.9±2.57）%（P＜0.01），主要是軟顆粒飼料制備工藝中，增加了100℃水蒸汽蒸熟，一定程度上抑制了病原菌的攜帶；軟顆粒飼料的殘留物粒徑小，容易隨糞便一同被排出，對(duì)水環(huán)境的污染小。

蛻殼不遂病是擬穴青蟹養(yǎng)成期中危害最嚴(yán)重的病害之一，在養(yǎng)殖后期嚴(yán)重影響?zhàn)B殖的成活率和生長(zhǎng)速度。該病的原因至今尚未完全弄清楚，但其中缺乏鈣質(zhì)、甲殼素、蛻殼素等擬穴青蟹蛻殼所必需的物質(zhì)是導(dǎo)致久不蛻殼、蛻不了殼的主要原因之一[29]。本次試驗(yàn)的軟顆粒飼料中鈣質(zhì)達(dá)3.16%，可有效加快擬穴青蟹脫殼周期，促進(jìn)擬穴青蟹的生長(zhǎng)發(fā)育，提高了擬穴青蟹的成活率。

3.3 軟顆粒飼料對(duì)擬穴青蟹肌肉蛋白質(zhì)和氨基酸組分的影響

有研究表明，配合飼料中蛋白質(zhì)含量為38.0%～45.9%能滿足成蟹的蛋白質(zhì)需求[8,9]。本次制備的軟顆粒飼料（濕物質(zhì)基礎(chǔ)）中蛋白質(zhì)的含量為26.6%比較低，這也導(dǎo)致投喂后擬穴青蟹肌肉中蛋白質(zhì)的含量為（14.05±4.31）%，低于黃偉卿等[19]（19.9%～20.2%）、王雪鋒等[30]的15.57%～17.42%和檀東飛等[31]的結(jié)果（15.33%）。但投喂后，仍極顯著高于投喂生物餌料的擬穴青蟹肌肉蛋白質(zhì)含量（11.11±3.10）%（P＜0.05）。這一現(xiàn)象與黃偉卿等[19]研究發(fā)現(xiàn)投喂軟顆粒飼料可以提高擬穴青蟹肌肉中粗蛋白質(zhì)的含量一致。

食物蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高低主要取決于其所含必需氨基酸的種類、數(shù)量和組成比例；呈味氨基酸的高低，也直接決定了食物的鮮美程度和被消費(fèi)者的接受程度[32]。本研究發(fā)現(xiàn)，投喂軟顆粒飼料組肌肉EAA 的含量為（4.33±1.64）%，顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），必需氨基酸的種類除Met 外均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），且肌肉呈味氨基酸的含量為（5.35±2.02）%，顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。認(rèn)為，產(chǎn)生這一結(jié)果的主要原因是軟顆粒飼料適口性好，飼料中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被擬穴青蟹所吸收、利用和轉(zhuǎn)化的效果較好。