69例假性血小板減少分析與處理

楊洪彩，閆麗娟

（無棣縣人民醫院檢驗科，山東 無棣 251900）

血小板在生理止血過程中和血栓形成等病理過程中具有重要作用。血小板數量檢測成為臨床最常用項目之一。全自動血細胞分析儀檢測血小板快速、簡便、重復性好，但會有血小板計數偏低而與臨床癥狀不符的情況。鑒于儀器檢測原理及方法學限制，檢測干擾因素復雜，且血小板又易黏附聚集。當遇到血小板計數結果偏低時，甄別出血小板假性減少的情況尤為必要。并采用適合方法，以獲取這部分樣本的實際檢驗結果。現將我們的研究報告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

邁瑞BC-6900全自動血細胞分析儀、Olympus顯微鏡、EDTA-K2抗凝真空管、肝素抗凝真空管、草酸銨血小板稀釋液。參照《全國臨床檢驗操作規程（第3版）》[1]用瑞氏-吉姆薩染液、儀器配套試劑及質控品。

1.2 樣本

資料來自2018年1月～10月年來我院檢查就診的患者（排除血液?。捎萌詣友蚍治鰞x進行分析時，隨機跟蹤33760例。血小板計數值偏低的69例（≤99×109/L）。

1.3 方法

對69例血小板計數值異常偏低標本，取同份血進行涂片，瑞氏-吉姆薩法染色，在油鏡（×100倍）下觀察血小板的分布情況、大小形態、有無聚集等。在涂片中發現21例患者存在大血小板，同一標本用牛-鮑氏計數板手工法計數，復檢。在涂片中發現有血小板聚集現象，分布情況與計數值明顯不符的48例，了解患者癥狀表現，均無皮膚黏膜出血點、紫癜等明顯的出血傾向、肝脾淋巴結不大。征得患者同意，再次抽血，同時采集EDTA-K2抗凝管、肝素鋰抗凝管、草酸銨稀釋液管。全自動血細胞儀對兩份抗凝血進行檢測，同時，對兩份標本進行涂片觀察血小板分布情況。草酸銨稀釋液管用牛-鮑氏計數板來手工計數，復檢。

2 結 果

21例存在大血小板的患者，手工法復檢的血小板計數結果均高于初檢結果。有26例患者的EDTA抗凝標本在血細胞儀復檢的血小板計數結果仍降低，與初次檢驗結果符合；而其肝素鋰抗凝標本、手工法復檢的血小板計數結果均在正常范圍內。同時采集的EDTA-K2抗凝血涂片中，有明顯血小板聚集現象，而肝素抗凝血涂片中，血小板散在多見。22例采集不順的患者，三種方法復檢結果均在正常范圍內。見表1、表2。

表1 血涂片鏡下血小板分布情況

表2 各種方法檢測結果比較（±s，×109）

表2 各種方法檢測結果比較（±s，×109）

注：P1：EDTA組與初檢結果比較 P2：肝素鋰組與初檢結果比較 P0：手工法與初檢結果比較 /：不采用

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3 討 論

除血液病外，血小板真性減少發生在：如特發性的血小板減少性紫癜、繼發于HCV、幽門螺旋桿菌慢性感染等。由同種抗體導致血小板減少，如母體抗體導致的免疫性新生兒血小板減少癥，多次輸血產生自身抗體等。肝腎疾病、藥物副作用[2]等也常見。檢驗工作中，需要綜合考慮導致血小板假性減少的各種因素。

3.1 EDTA抗凝劑對血小板減少的影響

1969年，Gowland等首次報道了人對抗凝劑抵抗而導致血小板檢測值偏低的現象，即EDTA依賴性血小板減少。這種現象在健康、患病時均有出現，一過性的也有出現，其發生率約0.07%～0.20%，而我們的檢測發生率約為0.08%，與文獻報道基本相符。

3.2 大血小板的影響

全血細胞儀電阻抗法以體積大小來歸類血小板和其它細胞。不同體積顆粒通過檢測孔產生不同脈沖，以此歸類計數。通常血小板體積為2～15 fl，血小板體積閾值為2～30 fl。顯而，體積超過30fl的血小板儀器可能被誤記。腫瘤、急性心肌梗死等患者大血小板會增多，導致血小板計數假性減少。

3.3 采血過程對血小板減少的影響

血小板檢測是一個系列操作過程，采集標本是第一步，采血操作不順暢造成組織損傷，皮下水腫、出血等引起組織凝血因子混入血液，產生肉眼不可見的小凝塊，導致血小板假性減少。

3.4 冷凝集對血小板減少的影響

室溫條件下，高滴度的寒冷凝集素可凝集紅細胞、有核細胞和血小板，導致儀器檢測結果異常。凝集素同時也影響其它試驗結果，可造成血型鑒定、交叉配血困難。

3.5 儲存時間過短或過長對血小板減少的影響

采血后30～60 min為血小板最佳檢測時間。因血小板離體后偽足形成，如立即檢測易被誤認為小紅細胞，而不計入血小板范圍；相反，放置時間過長，血小板易發生變形、自溶、黏附、聚集，導致計數減少。

3.6 妊娠對血小板減少的影響

高達5%～10%的孕婦發生血小板減少的血液異常。這可能與血液稀釋有關，或是免疫/非免疫機制造成的血小板破壞增加。

3.7 其他病理因素對血小板減少的影響

異常蛋白血癥、脂類與蛋白的聚集的影響等。如心肌梗死、心絞痛、腦血管病變、心臟瓣膜移植等，可促進血液高凝狀態，血小板聚集性增高；像高血壓、糖尿病患者由于內皮易損，可致血小板聚集，從而導致血小板降低[3]。

對于血小板減低的標本，應該結合儀器的報警提示，觀察血小板直方圖和散色圖。及時做涂片鏡檢，看是否有血小板凝集成堆現象，是否存在大血小板，以便及時發現血小板假性減少，以免給臨床帶來錯誤的指導。對于血小板減低的標本，不僅要及時查找原因，還要進行一些對照試驗。