B族鏈球菌抗原檢測技術(shù)早期診斷圍產(chǎn)期母嬰感染的研究

黃珊珊，蔡雪梅*，郭 翀

（1.云浮市中醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東 云浮 527300；2.云浮市中醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 云浮 527300）

B族鏈球菌（Group B Streptococcus，GBS），又稱B群鏈球菌或無乳鏈球菌，是兼性厭氧的革蘭陽性鏈球菌，因細(xì)胞壁中多糖物質(zhì)屬于抗原構(gòu)造分類中的 B 族而得名。GBS可寄居于婦女的陰道和直腸，健康人群中GBS帶菌率為20%～40%，而孕婦陰道直腸帶菌率10%～35%[1]。目前GBS已被證實(shí)是圍產(chǎn)期嚴(yán)重感染性疾病的主要病原菌，具有發(fā)病率高、病死率高 、致殘率高等特點(diǎn)，可造成嚴(yán)重的母嬰不良妊娠結(jié)局。在孕期，GBS可以從直腸或陰道部位逆行進(jìn)入子宮，導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)、胎膜早破、宮內(nèi)感染、菌血癥以及產(chǎn)褥感染等嚴(yán)重并發(fā)癥。在分娩過程中，新生兒經(jīng)過母體GBS感染的產(chǎn)道時(shí)而受感染，可引起新生兒肺炎、敗血癥、腦膜炎以及嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥甚至死亡。GBS嚴(yán)重危害妊娠婦女及新生兒的健康。因此，對晚孕期孕婦進(jìn)行GBS感染的快速檢測，可以針對性地給予孕婦抗生素治療，減少抗生素不合理使用，減少圍產(chǎn)期母嬰不良結(jié)局。

1 資料與方法

1.1 研究對象與入組標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)即排除標(biāo)準(zhǔn)，納入2018年1月～2019年12月在云浮市中醫(yī)院婦產(chǎn)科住院分娩并進(jìn)行產(chǎn)前GBS篩查的妊娠期婦女共194例，對其臨床資料進(jìn)行回顧性分析。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）孕35～40周：（2）單胎宮內(nèi)妊娠；（3）有產(chǎn)科高危因素的孕婦，包括本次妊娠有GBS菌尿；既往新生兒GBS感染史或分娩孕周小于37周；羊膜破裂≥18小時(shí)；臨產(chǎn)時(shí)體溫超過38.0℃等。排除兩周內(nèi)有性生活及抗生素使用史的孕婦。所有孕產(chǎn)婦對本研究知情同意且簽署知情同意書。

1.2 分組

根據(jù)GBS的檢測結(jié)局方式將患者分為兩組，分別為陽性組和陰性組。納入的194例患者中，所有患者平均年齡為27.32±3.56歲，平均BMI為24.03±1.43 kg/m2，平均分娩孕周為37.33±1.21周，初產(chǎn)婦172例，經(jīng)產(chǎn)婦22例。2組患者的一般資料包括年齡、BMI、孕產(chǎn)次等差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。

1.3 標(biāo)本采集及檢測方法

用無菌拭子在孕婦陰道下1/3處取得分泌物。 GBS抗原檢測法采用膠體金層析技術(shù)，試劑采用廣州市微米生物科技有限公司B族鏈球菌抗原檢測。B族鏈球菌的細(xì)胞壁多糖成分經(jīng)化學(xué)抽提獲取后，加入到樣品孔，流經(jīng)結(jié)合墊時(shí)與膠體金標(biāo)記物結(jié)合；此復(fù)合物流向NC膜時(shí)與包被物反應(yīng)并形成三明治式的復(fù)合物。具體操作方法如下（1）在抽提管中加入1號和2號抽提液各5滴，充分混勻。（2）將拭子放入已加入抽提液的抽提管中，攪動拭子數(shù)秒鐘，在管壁上反復(fù)擠壓，室溫靜置5分鐘。（3）搖動拭子數(shù)秒鐘，在管壁上反復(fù)擠壓，旋轉(zhuǎn)。（4）擠出液體后取出拭子，管內(nèi)的抽提物即為檢測樣本。（5）從鋁箔袋內(nèi)取出鑒定卡，垂直滴入2滴樣本于樣品孔中，10～15分鐘內(nèi)判定結(jié)果；15分鐘后檢測結(jié)果無效。

檢驗(yàn)結(jié)果的解釋如下：（1）陰性：僅在質(zhì)控線（C）出現(xiàn)一條紅色條帶，樣本中無B族鏈球菌。（2）陽性：在檢測線（T）及質(zhì)控線（C）各出現(xiàn)一條紅色條帶，樣本中存在B族鏈球菌，提示為B族鏈球菌感染。（3）無效：在質(zhì)控線（C）未出現(xiàn)紅色條帶，表明試驗(yàn)失敗或試劑無效，則另取試劑重新檢測。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

使用IBM SPSS 24版進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)使用卡方檢驗(yàn)或方差分析，不符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)使用非參數(shù)檢驗(yàn)。P＜0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組孕產(chǎn)婦圍產(chǎn)結(jié)局

見表1，兩組孕產(chǎn)婦的不良圍產(chǎn)結(jié)局均存在差異且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。陰性組的孕產(chǎn)婦不良結(jié)局總體發(fā)生率為2.2%，陽性組的孕產(chǎn)婦不良結(jié)局總體發(fā)生率為42.9%，陰性組孕產(chǎn)婦的不良結(jié)局遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于陽性組。

2.2 兩組新生兒圍生結(jié)局

見表2，兩組新生兒的新生兒窒息、敗血癥、腦炎、肺炎等不良圍生結(jié)局有差異，陰性組的新生兒不良結(jié)局總體發(fā)生率為1.7%，陽性組的新生兒不良結(jié)局總體發(fā)生率為42.9%，陰性組新生兒的不良結(jié)局遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于陽性組。以上相關(guān)性均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

表1 兩組孕產(chǎn)婦圍產(chǎn)結(jié)局[n（%）]

表2 兩組新生兒圍生結(jié)局[n（%）]

3 討 論

GBS是一種條件致病菌，可以通過產(chǎn)道上行擴(kuò)散感染子宮和胎膜，感染的孕婦易發(fā)生流產(chǎn)、早產(chǎn)、胎膜早破、絨毛羊膜炎、產(chǎn)褥感染等并發(fā)癥。孕婦GBS感染是新生兒感染的高危因素。感染的新生兒易發(fā)生等并發(fā)癥。美國疾病控制中心及中華醫(yī)學(xué)會婦產(chǎn)科學(xué)分會均推薦所有孕35～37周的孕婦分別采集陰道下1/3和直腸即通過直腸括約肌進(jìn)行GBS篩查，對于GBS陽性者應(yīng)該進(jìn)行治療[2]。

GBS抗原檢測可以有效減低母嬰圍產(chǎn)不良結(jié)局的發(fā)生。在本研究中，與GBS 快速抗原檢測陰性的孕婦相比，陽性組孕婦不良結(jié)局發(fā)生率為2.2%，顯著高于陰性組的42.9%。在本研究中，對于胎膜早破的臨產(chǎn)孕婦，進(jìn)行GBS快速檢測篩查，GBS陽性則立即進(jìn)行抗生素用藥，無需等到12 h后在進(jìn)行抗生素預(yù)防，可以有效減低新生兒敗血癥、菌血癥的發(fā)生。研究表明，自對孕婦常規(guī)進(jìn)行GBS篩查以來，新生兒早發(fā)型感染從1.7‰下降至0.34‰～0.37‰[3]。

目前GBS檢驗(yàn)方法為微生物學(xué)檢測方法，免疫學(xué)檢測及分子檢測等。細(xì)菌培養(yǎng)方法為傳統(tǒng)的檢測方法，具有檢測時(shí)間長、細(xì)菌營養(yǎng)要求高、假陰性率高等局限性。標(biāo)本培養(yǎng)24 h長出菌落后，至少還需要24 h或更長時(shí)間作分純、鑒定實(shí)驗(yàn)。另外，生長環(huán)境中其他雜菌過多且容易生長，致使B 族鏈球菌被覆蓋或生長受到限制[4]。如果病人在檢測此前使用抗生素，基本培養(yǎng)不出來。而免疫學(xué)檢測快速簡便，包括抗原檢測、乳膠凝集試驗(yàn)、協(xié)同凝集試驗(yàn)，對流免疫電流和酶聯(lián)免疫試驗(yàn)等。其中抗原檢測為最常用的辦法之一。GBS抗原檢測具有以下檢測時(shí)間短、特異性等優(yōu)勢。檢測時(shí)間大大的縮短，操作簡便，20分鐘出結(jié)果，解決了細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間過長，操作復(fù)雜。另外，GBS抗原檢測具有特異性，其他細(xì)菌不會對檢測產(chǎn)生干擾。陽性檢出率顯著高于細(xì)菌培養(yǎng)法，同時(shí)準(zhǔn)確率達(dá)95%以上[5]。另外，病人此前是否使用抗生素對檢測結(jié)果無顯著影響。

本研究仍存在不足與缺陷。首先，本研究為回顧性分析，存在數(shù)據(jù)不全等風(fēng)險(xiǎn)，剔除不齊全的數(shù)據(jù)后剩余供分析的樣本量較少。其次，本研究未對新生兒遠(yuǎn)期結(jié)局如智力等進(jìn)行進(jìn)一步評估。未來仍需要進(jìn)一步大樣本研究GBS抗原檢測的有效性。綜上所述，GBS抗原檢測快速有效，為有產(chǎn)科高危的孕婦提供重要的預(yù)測方法，有助于改善母嬰圍生結(jié)局，值得臨床廣泛推廣。