杭州蕭山地區新生兒聽力及耳聾基因篩查結果分析

盛迎濤，張 偉，薛建秀

(杭州市蕭山區第一人民醫院耳鼻喉科,杭州 311200)

聽力障礙是影響人類兒童最常見的疾病之一，在全世界的發病率為1‰～3‰[1]。有研究[2]統計，中國每年2000萬名新生兒中有3萬人是先天性聽力障礙的患兒，大約60%的患兒與遺傳因素有關。遺傳性耳聾分為綜合征型耳聾(SHL)和非綜合征型耳聾(NSHL)，與聽力障礙相關的基因多達100個，其中大部分與NSHL相關，占遺傳性耳聾的70%[3]。在非綜合征型耳聾中，有常染色體隱性遺傳、常染色體顯性遺傳、X-連鎖遺傳、線粒體基因遺傳。本研究采用聽力篩查與常見耳聾基因檢測相結合的方法，對本地區2005例新生兒進行篩查，并對聽力障礙兒童進行及早干預。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年7月至2020年4月于杭州市蕭山區第一人民醫院出生并進行聽力及耳聾基因篩查的新生兒2005例，其中男1064例，女941例。本研究經醫院倫理委員會批準，所有家長簽署知情同意書，并同意對其臨床資料進行分析與評估。

1.2 方法

1.2.1 聽力篩查

新生兒在出生后48 h內，行瞬態誘發耳聲發射(TEOAE)篩查，初次篩查未通過者在出生后42 d左右再次進行復篩。復篩前至本院耳鼻喉科門診檢查，常規清潔外耳道，檢查是否有耳部畸形，復篩采用自動判別聽性腦干誘發電位(AABR)進行聽力學評估。

1.2.2 耳聾基因篩查

新生兒在出生后3 d內，采集足跟血，提取DNA，采用博奧生物有限公司生產的晶芯?十五項遺傳性耳聾相關基因檢測試劑盒。運用PCR技術予以檢測，檢測4個耳聾基因的15個突變位點，包括GJB 2基因的35del G、235del C、176-191del 16和299-300del AT，GJB3基因的538C>T，SLC26A4基因的IVS7-2A>G、1229C>T、2168A>G、IVS15+5G>A、1174A>T、1975G>C、1226G>A和2027T>A，以及mt DNA 12S rRNA基因的1494C>T和1555A>G。

2 結果

2.1 聽力篩查

2005例新生兒中，1997例通過聽力初篩，初篩通過率99.6%；8例(0.4%)未通過初篩。未通過者均進行復篩，復篩仍有3例未通過(0.15%)。

2.2 常見耳聾基因篩查

2005例新生兒中，檢出常見耳聾基因陽性85例，攜帶率4.24%，未檢出率達95.76%。見表1。

表1 2005例新生兒常見耳聾基因檢測

2.3 聽力及耳聾基因聯合篩查

2005例新生兒中，聽力復篩未通過者3例，其中2例GJB2基因235del C位點雜合突變均為左耳重度感音神經性耳聾，1例SLC26A4基因IVS7-2A>G位點雜合突變為右耳極重度感音神經性耳聾，均已指導其后續治療。雙雜合突變1例，235del C位點及IVS7-2A>G位點突變,但聽力篩查通過，建議定期隨訪。2例有家族史，為176-191del 16雜合突變和IVS7-2A>G位點雜合突變，聽力篩查均通過。

3 討論

聽力障礙是最常見的感覺障礙之一，嚴重影響生活質量。先天性雙耳中度或重度聽力障礙的患病率為1/900～1/2500[4]。有研究[5-6]顯示，連接蛋白基因突變是人類不同人群中最常見的先天性聽力障礙的遺傳因素。連接蛋白是構成間隙連接通道的蛋白質亞基，是介導相鄰細胞間離子和代謝耦合的最重要的細胞通路之一。有研究[6]報道在哺乳動物中存在20多種不同的連接蛋白，它們都有一個共同的結構，但都有各自的組織分布特異性、電生理特性和調控特性。

GJB2編碼Cx26蛋白，位于13號染色體q11-12。DENOYELLE等[7]于1997年首次報道該基因，引起廣泛關注，因為這些突變占先天性耳聾的50%。目前為止，全球已經報道了20多種由GJB2突變引起的疾病[3]。有研究[8]顯示，與非攜帶者相比，GJB2突變者在遺傳或環境因素的影響下更易發生聽力損失。235del C突變為最常見突變基因，占我國聽力障礙患者的11.8%，占GJB 2突變的67.7%[9]。另有研究[10]指出，235del C位點突變可導致Cx26發生位移并提前終止，從而引發疾病。一項回顧性分析[5]指出，全球不同地區均有GJB 2突變引發的聽力障礙，但分布突變率不同。且基因型與地理位置密切相關。本研究篩查結果顯示，235del C雜合突變是先天性耳聾最常見的突變位點，占1.9%(38/2005)，與李曉澤等[11]研究結果一致，為本地區最常見突變熱點基因。2例235del C位點雜合突變，聽力復篩未通過，已指導其后續治療。1例176-191del 16雜合突變有家族史，其外公因耳毒性藥物導致耳聾，已告知其家長該新生兒需定期復查。

Pendred綜合征(PDS)和大前庭導水管綜合征(EVA)，主要由7q31號染色體SLC26A4基因突變引起。Pendrin是人體內由SLC26A4基因編碼的陰離子交換轉運蛋白。我國EVA患者SLC26A4基因的突變率高達97%[12]。在日本，EVA患者SLC26A4突變率則達82%[13]。經研究[14]證實，90%的Pendred家族和78.1%的與EVA相關的耳聾家族中均檢測出了該突變基因。在中國EVA患者中，合并或未合并有Mondini畸形都常常發現該基因突變。但無明確證據證實孤立的Mondini畸形與SLC26A4基因有關。因此，Mondini畸形患者的聽力障礙可能是由其他因素導致[15]。SLC26A4基因已知單等位基因突變的中國嬰兒出現次要等位基因變異的頻率，對于任何類型的變體，頻率為3.50%，2.96%為致病突變[16]。本研究篩查結果顯示SLC26A4基因突變為28例，占1.40%(28/2005)。21例IVS7-2A>G位點發生雜合突變，占總人數的1.04%，僅次于235del C突變，其中1例聽力篩查未通過，已指導其后續治療。IVS7-2A>G位點雜合突變有1例家族史，其聽力篩查通過，且父母聽力均正常，影像學無異常，但是，該新生兒姐姐檢測到SLC26A4 2168A>G雜合突變，且外院已確診為EVA，已建議對受檢者父母行耳聾基因相關檢測，告知避免頭部碰撞、外傷，予以觀察，若發現有聽力下降，立即治療。所以SLC26A4基因突變，其父母再次懷孕后新生兒仍有突變可能，且可能突變位點不同。雙雜合突變1例，GJB2基因235del C和SLC26A4基因IVS7-2A>G突變,聽力篩查通過，建議其定期隨訪。

線粒體DNA被認為在遺傳性和獲得性聽力損傷中起著重要作用，而線粒體DNA的一些突變被證明與氨基糖苷類藥物引起的耳聾有關[17]。線粒體12SrRNA基因遺傳自母系，攜帶者對于氨基糖苷類藥物耳毒性作用極其敏感，我國每年大約有20 000名新生兒攜帶有1555A>G，因此線粒體DNA突變應引起重視[18]。1555A>G、1494C>T均可作為氨基糖苷類藥物致聾的靶點。本研究中有5例線粒體12S rRNA基因突變，分別對其父母進行有效溝通與宣教，已建議對新生兒禁用氨基糖苷類藥物，并攜帶有用藥提示卡，以避免該藥物使用。

目前GJB3研究報道較少，GJB3編碼縫隙連接蛋白連接蛋白CX31，但致病機制尚不明確。本研究僅檢測到1例GJB3基因突變，突變攜帶率約為0.05%，遠低于既往研究[11]報道的0.295%～0.32%。

我國是人口大國，地域遼闊，各地區耳聾突變基因分布存在一定差別。聽力障礙會嚴重影響生活質量，尤其是先天性聽力障礙患兒，對身心均不利，雖然近年來人工耳蝸技術進步與普及。但術后個體間聽力言語康復仍存在差異。本著及早發現，及早干預的原則，盡可能有效減少患兒行為方面、溝通和心理社會等問題。聽力及耳聾基因聯合篩查是有效工具，目前新生兒聽力篩查已普遍開展，但地區間仍因條件限制有所不同，本地區對新生兒長期進行聯合篩查，技術已趨于成熟，對于研究新生兒先天性聽力障礙有指導作用。聽力篩查和耳聾基因篩查可互為補充。

綜上所述，對新生兒進行聯合篩查，可早期發現先天性聽力障礙患兒，檢測出耳聾基因位點，對于其提供個性化遺傳學分析，可有效指導后續治療。今后應繼續擴大檢測人數及范圍，為新生兒耳聾的積極干預和治療提供指導，為準確估計耳聾相關基因突變頻率提供依據。