溫度及酸堿度對中藥代煎包裝袋中DEHP遷移量的影響研究

芮 興，熊 波，沈 偉，董偉偉，彭 娟，曲 虹*

0 引言

鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)，是鄰苯二甲酸酯類增塑劑中使用最廣泛的品種[1]，主要應用在PVC、PE、PET等塑料制品中，包括醫療領域的醫用導管、輸液袋、藥品包裝、中藥代煎包裝袋等。由于DEHP的分子結構與性激素類相似，在人和動物體內會擾亂正常的分泌系統，并有致癌、致畸、致突變的潛在危害[2]。中國、美國、歐盟、日本等均針對DEHP制定了一系列的法律限制[3]。中藥代煎包裝袋作為中藥煎煮液的主要載體，應當盡可能降低DEHP的遷移量，國家也相應地制定了一系列的檢測標準和法律法規[4]。本研究根據GB9685-2016和GB5009.156-2016[5]中對DEHP遷移試驗的要求，采用氣質聯用色譜法(GC-MS)，對不同溫度下中藥代煎包裝袋中DEHP的遷移量進行檢測，揭示中藥代煎包裝袋中塑化劑遷移的影響規律，現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器、試劑與樣品 氣相色譜-質譜聯用儀(Thermo，Trace1310 ISQ)，色譜柱(TG-5MS，30 m×0.25 mm×0.25 μm)，超聲振蕩器(昆山市超聲儀器有限公司，KQ-800DE型)，離心機(Thermo，BR4I)，恒溫水浴鍋(上海雙捷實驗設備有限公司，DRHH-S6)，分析天平(上海舜宇恒平科學儀器有限公司，FA-1004)；標準品DEHP(99.5%，Dr.Ehrenstorfer)，正己烷(上海阿拉丁生化科技股份有限公司)，冰乙酸(國藥集團化學試劑有限公司)；玻璃器皿若干；中藥代煎包裝袋，來源于上海萬仕誠藥業有限公司(BOPA/LDPE，安徽金科藥品包裝材料有限公司，批號20190926048，編號a)、上海同濟堂藥業有限公司(BOPA/LDPE，安徽金科藥品包裝材料有限公司，批號20190101041，編號b)、上海虹橋中藥飲片有限公司(BOPA/LDPE，廣東美士達藥包材料股份有限公司，批號1906003A11，編號c)。

1.2 試驗方法

1.2.1 條件模擬 中藥代煎服務中，對中藥代煎的流程管理尚未形成具有約束效力的規定[6]。通過文獻調查[7-8]和實地走訪上海市提供中藥代煎服務的企業發現，在使用包裝袋對中藥煎煮液進行最后的灌裝時，受煎液容量、操作人員經驗、工作時間等因素影響，中藥煎液在40～100 ℃的溫度下灌裝，稍微放冷后存放待運。在此過程中，塑料袋與藥液的接觸溫度集中在40～90 ℃。灌裝后，根據室內溫度的不同，在0.5～1 h內，藥液溫度降至40 ℃以下。

根據以上條件，本試驗針對灌裝溫度下，中藥煎液與中藥包裝袋接觸時間的長短，設計了包裝袋與模擬液梯度溫度共浴的試驗，檢測包裝袋中遷移到中藥煎液模擬液中的DEHP含量，并分析其隨溫度的變化規律。試驗中設計的共浴條件為30+10×n℃(n=0,1,2,3,4,5,6,7)梯度水浴，時間1 h。根據GB31604.1-2015中對遷移試驗的相關規定，選擇的中藥煎液模擬液為蒸餾水、4%乙酸。

1.2.2 標準溶液 精確稱取DEHP 100 mg，溶于正己烷并定容至50 ml，濃度為2.0 mg/ml，精密量取適量用正己烷稀釋制成0.05、0.10、0.20、0.50、1.00、2.00、3.00、5.00 μg/ml的系列標準溶液。

1.2.3 樣品處理 分別稱取10 g中藥代煎包裝袋，剪碎至約1 mm2大小。準確稱取1.00 g碎片于具塞錐形瓶中，分別與蒸餾水200 ml、4%乙酸溶液(臨用前配制)200 ml，在梯度溫度下(T=30+10×n℃，n=0,2,3,…,7)水浴1 h，去除包裝袋碎片，編號備用。準確量取各編號溶液10 ml于玻璃試管中，加入5 ml正己烷振蕩提取10 min，4 000 r/min轉速下離心5 min，取上層正己烷層，重復2次，合并正己烷層，加正己烷定容至15 ml，備用，所制得的樣品可根據標準曲線的線性范圍進行稀釋。

1.2.4 色譜條件[5，9-10]GC條件為色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm；TG-5MS)；進樣口溫度：260 ℃；載氣：高純氦氣，流速1 ml/min；進樣方式：自動進樣，不分流；進樣量：1 μl；升溫程序：初始柱溫60 ℃，保持1 min，以20 ℃/min升溫至220 ℃，保持1 min，以5 ℃/min升溫至250 ℃，保持1 min，以20 ℃/min升溫至290 ℃，保持7.5 min。

MS條件為接口溫度：290 ℃；分流比：不分流；電離方式：電子轟擊電離源(EI)；電子轟擊能：70 eV；離子源溫度：280 ℃；溶劑延遲：7 min；監測方式：離子檢測模式(SIM)。

2 結果

2.1 標準曲線、檢測限及標準圖譜 將標準溶液按照本 “1.2.4”項條件進行測定，DEHP的特征離子見表1，DEHP的GC-MS色譜圖見圖1。用DEHP的峰面積對DEHP含量進行線性回歸，得回歸方程為Y=8.24×107X-3.93×106(R2=0.998 5)，見圖2，DEHP在0.05～5.00 μg/ml范圍內線性關系良好。取DEHP 0.05 μg/ml標準溶液，用正己烷逐步稀釋后進樣檢測。按信噪比(S/N)=3，計算檢出限為0.002 mg/L；按信噪比(S/N)=10，計算定量限為0.006 mg/L，表明試驗方法滿足GB9685 2016中DEHP特定遷移限量(1.5 mg/kg)的檢測需要。

2.2 精密度、穩定性試驗 取0.50 μg/ml DEHP標準溶液，按“1.2.4”項條件重復進樣6次，測定峰面積，峰面積的RSD值為1.26%(n=6)；按“1.2.4”項條件在0、1、6、12、18、24 h分別進樣，測定峰面積，峰面積的RSD值為2.08%(n=6)。說明該方法精密度較好，且樣品溶液在24 h內穩定性良好。

表1 DEHP的特征離子

圖1 DEHP標準品離子流色譜、質譜圖

圖2 響應度與濃度回歸曲線Y=8.24×107X-3.93×106 (R2=0.998 5)

2.3 加樣回收率 采用加樣回收試驗方法，量取1.00 μg/ml DEHP標準溶液1.00 ml，加至其中一份溶液中，按“1.2.3”和“1.2.4”項條件進行處理和測定，計算回收率。結果平均回收率為97.9%，RSD=2.1%(n=6)。

2.4 樣品的測定 將3個批次的樣品分別按“1.2.4”項條件檢測并計算DEHP含量，以水浴溫度為橫坐標，DEHP遷移量為縱坐標作圖，如圖3、圖4所示，隨著水浴溫度從30 ℃上升到100 ℃，遷移到蒸餾水中DEHP的含量從0.051～0.114 mg/kg上升到0.499～0.881 mg/kg，遷移到4%乙酸溶液中的DEHP的含量從0.002～0.006 mg/kg上升到0.098～0.125 mg/kg。

圖3 蒸餾水與3批次中藥代煎包裝袋共浴后DEHP的 遷移量與水浴溫度的關系

圖4 4%乙酸溶液與3批次中藥代煎包裝袋共浴后DEHP的 遷移量與水浴溫度的關系

3 討論

3.1 試驗操作注意事項 由于PAEs普遍存在于實驗室環境中[11-12]，為防止樣品受污染而造成假陽性的結果，本試驗禁止使用和接觸塑料、橡膠材質的器皿，使用的玻璃器皿也需要經蒸餾水洗、丙酮洗、然后用正己烷淋洗2次、氮吹后使用。水浴采用具玻璃塞的錐形瓶，減少空氣中顆粒粉塵污染。水浴后，包裝袋碎片采用離心的方式去除。

為降低灌裝機和中藥對DEHP遷移量的干擾，試驗根據《食品接觸材料及制品遷移試驗通則》(GB31604.1-2015)中DEHP遷移量的相關規范，選擇中藥代煎包裝袋與模擬液梯度溫度水浴的方式開展試驗，以水、4%乙酸模擬中藥煎液。這樣可以減少灌裝時灌裝機內部材料及中藥組方復雜化學成分的干擾，便于規范和簡化DEHP遷移量的檢測流程，有利于試驗的操作性和重復性。

3.2 對中藥代煎的指導意義

3.2.1 本研究檢出的3個批次的中藥代煎包材中DEHP的遷移量均符合國標規定(小于1.5 mg/kg)，說明LDPE/BOPA材質的包裝膜可以用作中藥代煎包裝袋。在良好質量控制的前提下，該材料DEHP的暴露風險較小。值得說明的是，試驗中抽取的中藥代煎包裝袋來自于上海市幾家較大規模的中藥飲片公司，材料均為LDPE/BOPA材質，且存放周期較短。但是，目前仍有其他材質(PE、PET、PVC等)的中藥代煎包裝袋流通于小藥店、中藥代煎加工門店等，可能存在DEHP暴露風險。

3.2.2 試驗表明，中藥代煎包裝袋中DEHP的遷移與接觸溶液的溫度、酸堿度存在一定的相關性。隨著溫度的升高，DEHP的遷移量也隨之升高，其中100 ℃水浴溫度下，水溶液中DEHP的遷移量相對30 ℃平均提高了9倍，4%乙酸溶液中平均提高了30倍；偏酸性環境相對抑制了DEHP的遷移，如圖5各值均小于圖4中同溫度下水中的遷移量。

3.2.3 在中藥代煎服務中，采取低溫灌裝的方式有利于降低DEHP遷移量，而且灌裝溫度在30～60 ℃時，DEHP的遷移量隨溫度升高，增長緩慢，當水浴溫度超過60 ℃，隨著溫度的上升，遷移到兩種中藥煎液模擬液中DEHP含量呈顯著增加的趨勢。因此，中藥代煎的灌裝溫度控制在60 ℃以下有利于降低中藥代煎包裝袋中DEHP的遷移量。

綜上，GC-MS法在檢測由煎液包裝袋遷移而引入的DEHP具有較高的靈敏度和準確性。試驗結果表明，灌裝溫度和灌裝液PH值對中藥代煎包裝袋中DEHP的遷移具有一定的影響規律。當然，影響中藥煎液中塑化劑的含量還有中藥代煎包裝袋質量、水質、中藥質量、代煎機器塑化劑暴露等因素，如果僅從減小中藥代煎包裝中DEHP遷移量的角度來看，將中藥代煎的灌裝溫度控制在60 ℃以下為宜。