早期乳腺導(dǎo)管內(nèi)癌鉬靶X線超聲造影表現(xiàn)及與免疫組化HER-2 nm-23表達(dá)的關(guān)系

馮華梅，劉 穎，宋 倩

(河北省唐山市人民醫(yī)院超聲科，河北 唐山 063000)

乳腺導(dǎo)管內(nèi)癌(ductal carcinoma in situ，DCIS)是女性最常見的惡性腫瘤之一。隨著對(duì)DCIS發(fā)生、發(fā)展機(jī)制研究的不斷深入及射線防護(hù)、內(nèi)分泌法等各種輔助治療在根治術(shù)的應(yīng)用[1]，臨床治療效果得到顯著提升。對(duì)乳腺癌患者而言，都強(qiáng)調(diào)免疫組化結(jié)果對(duì)制定輔助治療手段和評(píng)估預(yù)后的重要性[2]。HER-2表達(dá)情況是臨床醫(yī)師考慮行必要的輔助化療及何種化療方式的關(guān)鍵，而nm-23低表達(dá)則預(yù)示患者預(yù)后較差[3]。然而HER-2、nm-23的免疫組化結(jié)果需要獲取患者病理組織，這種有創(chuàng)檢查均不宜在術(shù)前、術(shù)后廣泛開展，而能夠?qū)⒚庖呓M化結(jié)果與無創(chuàng)輔助檢查手段相結(jié)合，不僅有利于術(shù)前及早制定輔助治療手段，且也提高了術(shù)后動(dòng)態(tài)評(píng)估的有效性。基于此，現(xiàn)選取我院收治的DCIS患者作為研究對(duì)象，觀察鉬靶X線、超聲造影(contrast-enhanced ultrasonography，CUES)與免疫組化HER-2、nm-23表達(dá)之間的相關(guān)性，旨在為臨床治療及預(yù)后評(píng)估提供更豐富的觀察指標(biāo)。研究結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1一般資料:回顧性的選取2018年1月至2020年1月在我院收治的80例DCIS患者作為研究對(duì)象，均由手術(shù)病理檢查證實(shí)為DCIS。納入標(biāo)準(zhǔn)：①術(shù)前均行鉬靶X線、CUES，且圖像清晰、影像學(xué)資料完整；②均具病理學(xué)組織切片；③患者均知情本次研究，并簽署知情同意書；④鉬靶X線、超聲造影間隔不超過7d。排除標(biāo)準(zhǔn)：①術(shù)前接受放療、化療等治療；②復(fù)發(fā)者；③合并其他腫瘤；④妊娠期、哺乳期女性；⑤非DCIS。均為女性，年齡20～68歲，平均年齡(44.80±6.73)歲。本研究獲醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2方 法

1.2.1影像學(xué):鉬靶X線：Mammomat型高頻鉬靶X線機(jī)(Giotto，意大利)；患者取坐位或立位，支架傾斜施壓乳房，對(duì)腋窩、胸大肌后間隙觀察并保存乳房側(cè)斜位攝片，后調(diào)節(jié)支架高度，使患者乳房平坦置于暗盒，X線片垂直投照，并爆粗乳房軸位攝片。CUES：AUCSON2000型超聲診斷儀(Siemens，美國(guó))及配套超聲探頭(頻率4～9MHz、8～10MHz)；患者取仰臥位，暴露乳腺、腋窩。常規(guī)掃查乳腺區(qū)域，并觀察腫塊形態(tài)、邊緣、內(nèi)部回聲及周邊血流分布情況后，調(diào)取超聲造影模式，替換8～10MHz探頭，靜脈團(tuán)注2.4mL混懸液(59mg Sono Vuc+4.8mL生理鹽水)，后注射5mL生理鹽水，持續(xù)造影180s，并保存造影圖像。所有圖像均由2位從事乳腺影像學(xué)診斷的高年資醫(yī)師雙盲法閱片。

1.2.2免疫組化:取石蠟切片，常規(guī)脫蠟、洗片，沖洗，修復(fù)抗原，沖洗，加過氧化氫液，沖洗，加封閉液，沖洗，分別加兔抗人HER-2多克隆抗體(LSBio)、鼠抗人nm-23單克隆抗體(Abcam)且37℃、40min反應(yīng)、沖洗、SABC法染色后，上鏡，并以PBS緩沖液代替一抗作為陰性對(duì)照組。

1.3觀察指標(biāo):①免疫組化結(jié)果。隨機(jī)選取10個(gè)視野技計(jì)數(shù)，HER-2附著于細(xì)胞膜上，nm-23表達(dá)在細(xì)胞漿內(nèi)，均呈黃色或棕黃色，以無染色或陽(yáng)性細(xì)胞<5%記為低表達(dá)，余記為高表達(dá)，統(tǒng)計(jì)所有患者HER-2、nm-23表達(dá)情況并行后續(xù)分析。②鉬靶X線及CUES特征。收集2組患者超聲造影的增強(qiáng)方式、增強(qiáng)強(qiáng)度、增強(qiáng)均勻、放射狀增強(qiáng)及時(shí)間強(qiáng)度峰值(time to peak，TTP)、峰值強(qiáng)度(peak Intensity，PI)、曲線下面積(area undercurve，AUC)、開始增強(qiáng)時(shí)間(arriving time，AT)，和鉬靶X線片腫塊、邊緣、鈣化等征象。

2 結(jié) 果

2.1不同表達(dá)HER-2患者中影像學(xué)特征:80例患者中，免疫組化檢查HER-2高表達(dá)36例、HER-2低表達(dá)44例。HER-2高表達(dá)組血管分布異常、非向心性增強(qiáng)、高增強(qiáng)、非均勻增強(qiáng)占比均顯著高于HER-2低表達(dá)組(P<0.05)，且HER-2高表達(dá)組的TTP顯著低于HER-2低表達(dá)組(P<0.05)，而PI顯著高于HER-2低表達(dá)組(P<0.05)。詳見表1。

表1 HER-2高低表達(dá)的影像學(xué)特征比較

2.2不同nm-23表達(dá)患者中的影像學(xué)特征:80例患者中，免疫組化檢查nm-23高表達(dá)38例、nm-23低表達(dá)42例。nm-23高表達(dá)組非放射性增強(qiáng)占比均顯著高于nm-23低表達(dá)組(P<0.05)，且nm-23高表達(dá)組的TTP顯著高于nm-23低表達(dá)組(P<0.05)，而PI顯著低于nm-23低表達(dá)組(P<0.05)。詳見表2。

表2 nm-23高低表達(dá)的影像學(xué)特征比較n(%)

2.3HER-2高表達(dá)與影像學(xué)特征的相關(guān)性:spearman分析結(jié)果顯示，TTP與HER-2高表達(dá)均呈正相關(guān)，r為0.557(P<0.05)，而與PI呈高度負(fù)相關(guān)，r為-0.834(P<0.05)。

2.4nm-23高表達(dá)與影像學(xué)特征的相關(guān)性:Spearman分析結(jié)果顯示：TTP與nm-23高表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，r為-0.620(P<0.05)，而與PI呈正相關(guān)，r為0.578(P<0.05)。

3 討 論

DCIS屬乳腺原位癌，為起源于乳腺末梢導(dǎo)管的異質(zhì)性腫瘤，病灶局限于乳腺導(dǎo)管系統(tǒng)中，并未侵及周圍基底膜，若突破基底膜則會(huì)進(jìn)展為浸潤(rùn)性癌。因DCIS為早期病變，10年生存期90%以上[4]，但這依賴于患者接受個(gè)體化治療。隨鉬靶X線、CUES等影像學(xué)的應(yīng)用，臨床上對(duì)于乳腺癌尤其是微小腫瘤的篩查、術(shù)前診斷均顯著提高，且鉬靶X片、CUES操作簡(jiǎn)單、價(jià)格低廉，在DCIS術(shù)前、術(shù)后具有很高的普適性。對(duì)DCIS制定個(gè)性化診療方案，除影像學(xué)手段，免疫組化結(jié)果也是其重要的參考內(nèi)容。如HER-2高表達(dá)患者應(yīng)用靶向藥物可使患者獲益更多，但對(duì)于HER-2低表達(dá)或無表達(dá)患者則會(huì)增加不必要的治療；而nm-23表達(dá)情況指導(dǎo)臨床醫(yī)師評(píng)估預(yù)后，且以nm-23高表達(dá)患者預(yù)后更好；其他如pS1、多藥耐藥基因(multi-drug resistance gene，MDR)等或多或少與乳腺癌的內(nèi)分泌治療、化療藥物抗藥性及交叉抗藥能力相關(guān)[5,6]，因此，明晰蛋白表達(dá)情況對(duì)于制定個(gè)體化治療方案具有非常重要的意義。然而，在實(shí)際臨床中，免疫組化標(biāo)本需獲得病理組織切片，若為穿刺活檢術(shù)獲取增加患者穿刺相關(guān)并發(fā)癥，且受標(biāo)本固定質(zhì)量、操作者技術(shù)等影響，均可導(dǎo)致檢查假陽(yáng)性、假陰性[7,8]，而結(jié)合患者接受度高且檢查效能好的影像學(xué)手段以分析免疫組化結(jié)果，對(duì)于臨床醫(yī)師制定個(gè)性化治療方案具有重要的臨床意義。

本組案例結(jié)果顯示，HER-2的不同表達(dá)在血管分布異常、非向心性增強(qiáng)、高增強(qiáng)、非均勻增強(qiáng)、TTP、PI上差異顯著，且spearman提示，HER-2與TTP、PI之間具相關(guān)性。HER-2本身參與了DCIS的發(fā)生、發(fā)展過程，其高表達(dá)上調(diào)VEGF水平促進(jìn)腫瘤微血管生長(zhǎng)[15]，造影劑可通過微血管通道快速達(dá)到腫瘤內(nèi)部，而腫瘤生長(zhǎng)速度過快導(dǎo)致部分腫瘤組織缺乏血供，從而表現(xiàn)為血管分布異常，病灶多表現(xiàn)為非向心性增強(qiáng)、高增強(qiáng)的灌注缺損區(qū)域，且其TTP更低、PI更高。nm-23是腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移的抑制因子。本組案例結(jié)果顯示nm-23不同表達(dá)的患者在放射性增強(qiáng)、TTP、PI上差異顯著，且nm-23與TTP、PI之間具相關(guān)性。nm-23可通過調(diào)控血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移，從而抑制微血管形成，而減少腫瘤細(xì)胞的血氧供給，最終達(dá)到抑制腫瘤生長(zhǎng)，這就表現(xiàn)為nm-23高表達(dá)組病灶邊緣更少的出現(xiàn)放射狀增強(qiáng)，其TTP更高、PI更低。這提示，對(duì)于血管分布異常、向心性增強(qiáng)、高增強(qiáng)、放射狀增強(qiáng)、淋巴結(jié)腫大及TTP較高而PI較低的DCIS患者應(yīng)當(dāng)懷疑為HER-2高表達(dá)；而對(duì)于TTP較低、PI較高的DCIS患者則應(yīng)當(dāng)懷疑nm-23高表達(dá)。本研究嘗試分析HER-2、nm-23不同表達(dá)的患者其鉬靶X線、CUES特征的差異性，以期輔助臨床醫(yī)師采用簡(jiǎn)捷且患者接受度高的手段提高術(shù)前評(píng)估、預(yù)后隨訪效果，但受DCIS患者差異性大，而本研究納入研究對(duì)象較少可能導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)學(xué)偏差，且也未對(duì)ER、PR等蛋白表達(dá)與影像學(xué)特征加以分析，未就HER-2、nm-23不同患者的預(yù)后進(jìn)行研究，這些都有待于后續(xù)更為嚴(yán)謹(jǐn)?shù)拇髽颖尽⒍嘀行难芯俊?/p>

總而言之，鉬靶X線、CUES特征與免疫組化HER-2、nm-23表達(dá)水平之間存在相關(guān)性，可能有助于臨床醫(yī)師選擇治療方案、評(píng)估預(yù)后。